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單細(xì)胞鋪板在鋪細(xì)胞時(shí)要注意手法2022/04/20: 單細(xì)胞鋪板是細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中最常見又必須掌握的一門技術(shù)，看似簡(jiǎn)單，我們卻經(jīng)常遇到：如細(xì)胞居中或者中間稀疏等不均勻分布的現(xiàn)象，導(dǎo)致我們只能扔掉，重新鋪板。既耽擱時(shí)間又浪費(fèi)了細(xì)胞及培養(yǎng)板等資源。單細(xì)胞鋪板要鋪成那種很均勻的單層細(xì)胞，手法如下：1、細(xì)胞板子先加入一定量(一般是總量培養(yǎng)基的1/5)的培養(yǎng)基，放入孵箱中放置10-20min；2、在滴入細(xì)胞時(shí)，細(xì)胞板子與通風(fēng)櫥有一定的角度，沿著板壁的孔邊緣滴入；3、滴入后，呈“8”字方法搖晃5-8次；4、置于水平臺(tái)上，放置10-20分鐘；5、放入孵箱。其實(shí)單細(xì)胞鋪

單克隆篩選是新一代細(xì)胞克隆篩選和挑取技術(shù)2022/04/19: 單克隆篩選是新一代細(xì)胞克隆篩選和挑取技術(shù)，細(xì)胞克隆篩選系統(tǒng)能夠更少時(shí)間里，自動(dòng)化篩選并挑取更高水平表達(dá)的細(xì)胞克隆，擁有5組熒光通道，可以同時(shí)使用3組，細(xì)胞克隆篩選系統(tǒng)避免有限稀釋，快速高效篩選挑取雜交瘤克隆，建立穩(wěn)定細(xì)胞株，干細(xì)胞及特殊表面標(biāo)記細(xì)胞挑取及昆蟲細(xì)胞篩選挑取。單克隆篩選方法有有限稀釋法，半固體培養(yǎng)基挑選法，以及流式細(xì)胞術(shù)挑選法等。這其中有好多需要關(guān)注的點(diǎn)，例如挑選細(xì)胞的參數(shù)，挑選方法本身對(duì)細(xì)胞的損傷等。所以說，一個(gè)高效的篩選方法絕對(duì)能讓工作效率提高好幾倍。有限稀釋法是目前常用的一種常

上海單細(xì)胞分離實(shí)驗(yàn)基本步驟流程2022/04/18: 上海單細(xì)胞分離是研究中困難的步驟之一，目前的分離策略主要分為三類：手動(dòng)分離、熒光激活的細(xì)胞分選和微流體技術(shù)。在進(jìn)行單細(xì)胞轉(zhuǎn)錄分析之前，我們需要確定自己拿到了正確的細(xì)胞。如果你想要的細(xì)胞已經(jīng)處于懸浮狀態(tài)（比如循環(huán)腫瘤細(xì)胞），而且含量相對(duì)比較豐富，那么流式細(xì)胞分析將是你的理想選擇。如果樣本是實(shí)體組織，我們可以用酶分解掉膠原和其他細(xì)胞外蛋白。不過酶學(xué)消化對(duì)細(xì)胞影響較大，甚至可能改變基因轉(zhuǎn)錄情況。把組織細(xì)胞制成懸液之后，我們就可以通過特異性的熒光標(biāo)簽分離出自己想要的細(xì)胞，進(jìn)一步拿到單細(xì)胞是比較棘手的一步

單克隆鋪板能夠快速識(shí)別出是否有細(xì)胞被分配到孔里2022/04/14: 單克隆鋪板將細(xì)胞通過一次性的芯片上端加樣孔，注入到芯片腔體中。單細(xì)胞流在微流控通道中流過激光檢測(cè)區(qū)域，機(jī)器能對(duì)細(xì)胞進(jìn)行識(shí)別，去除掉細(xì)胞碎片，死細(xì)胞以及狀態(tài)較差的細(xì)胞，使得最終落到孔板中的細(xì)胞都具有很好的活性。高速電子閥門能夠精確捕獲每一個(gè)活性細(xì)胞，最終形成1ul體積的液滴，輕柔地落進(jìn)孔板中。整個(gè)過程對(duì)細(xì)胞的損傷可以忽略不計(jì)，所以分選得到的細(xì)胞絕大多數(shù)的細(xì)胞都能再次分裂生長。單克隆鋪板是一款基于有限稀釋的基礎(chǔ)上研發(fā)的全自動(dòng)細(xì)胞鋪板工具，有別于其他類型的細(xì)胞鋪板工具，它的整合了細(xì)胞成像系統(tǒng)，細(xì)胞識(shí)別

單細(xì)胞測(cè)序是一種高效的檢測(cè)技術(shù)2022/01/16: 單細(xì)胞測(cè)序技術(shù)又稱“下一代“測(cè)序技術(shù)或深度測(cè)序技術(shù)，可以一次性對(duì)幾十萬至幾百萬條DNA分子進(jìn)行序列測(cè)定，現(xiàn)已廣泛應(yīng)用在基因組測(cè)序、基因表達(dá)分析、非編碼小分子RNA鑒定、轉(zhuǎn)錄因子靶基因篩選及DNA甲基化等相關(guān)的研究領(lǐng)域。測(cè)序技術(shù)的突出優(yōu)點(diǎn)是可以從細(xì)胞圖譜的角度，探測(cè)細(xì)胞特異性以及細(xì)胞間的差異，探索細(xì)胞間的協(xié)同運(yùn)作方式，研究組織異質(zhì)性問題，根據(jù)細(xì)胞層面的特征對(duì)疾病進(jìn)行深度刻畫，能有效地解決組織樣本無法破解的細(xì)胞異質(zhì)性難題，有助于發(fā)現(xiàn)新的細(xì)胞類型。基于大量的單細(xì)胞基因表達(dá)數(shù)據(jù)，該平臺(tái)還可進(jìn)行細(xì)胞表達(dá)特

單細(xì)胞培養(yǎng)有哪些注意要點(diǎn)？2022/01/16: 單細(xì)胞培養(yǎng)從植物器官、愈傷組織或懸浮培養(yǎng)物中游離出單個(gè)細(xì)胞，在無菌條件下，進(jìn)行體外生長、發(fā)育的技術(shù)，人們分離和培養(yǎng)植物單細(xì)胞的設(shè)想和實(shí)踐都比較早，但成功地進(jìn)行單細(xì)胞培養(yǎng)是隨著更有效的培養(yǎng)基的發(fā)展以及從愈傷組織懸浮培養(yǎng)物分離單細(xì)胞的專門技術(shù)的建立才實(shí)現(xiàn)的。細(xì)胞間實(shí)現(xiàn)信號(hào)傳遞交流，采用三明治方式將PET/PC膜嵌在兩板之間，除了細(xì)胞本身，培養(yǎng)基中其他成分都可以自由通過PET/PC膜，達(dá)到細(xì)胞間信號(hào)傳遞交流的目的，配合10cm培養(yǎng)皿使用，適用于任何不同類型細(xì)胞間的共培養(yǎng)，培養(yǎng)皿底部的飼養(yǎng)層細(xì)胞可以為目

北京單細(xì)胞分選詳細(xì)步驟介紹2022/01/16: 生物體有成千上萬種細(xì)胞類型，有多種方法可以從生物體組織中分離出單個(gè)的細(xì)胞。從實(shí)體組織中單細(xì)胞分選關(guān)鍵兩步：一，（單個(gè)細(xì)胞）通常是用酶解的方式把離體或者活體分解成單個(gè)的細(xì)胞；二，單個(gè)的細(xì)胞必須在單個(gè)的反應(yīng)器中進(jìn)行裂解和進(jìn)一步的分析。利用流式細(xì)胞分選技術(shù)進(jìn)行的單細(xì)胞分選，具有精度高、通量大、分選參數(shù)多，成本相對(duì)低等優(yōu)點(diǎn)，但要通過流式分選出足夠多的符合要求的單細(xì)胞進(jìn)行下游實(shí)驗(yàn)并沒有那么容易。下面三方面是要考慮的問題：1、細(xì)胞活性狀態(tài)對(duì)后續(xù)實(shí)驗(yàn)而言很重要，就拿轉(zhuǎn)錄組分析為例，高通量表達(dá)譜芯片技術(shù)，都需要

了解一下單細(xì)胞鋪板可能會(huì)出現(xiàn)的問題2022/01/16: 單細(xì)胞鋪板采用微流體技術(shù)能夠?qū)崿F(xiàn)快速，高效，準(zhǔn)確的細(xì)胞鋪板工作，并且分離過程輕柔，不會(huì)影響細(xì)胞的后續(xù)生長，能廣泛應(yīng)用于單抗開發(fā)中的CLD環(huán)節(jié)，以及單細(xì)胞測(cè)序等。原理如下：將細(xì)胞通過一次性的芯片上端加樣孔，注入到芯片腔體中，單細(xì)胞流在微流控通道中流過激光檢測(cè)區(qū)域，機(jī)器能對(duì)細(xì)胞進(jìn)行識(shí)別，去除掉細(xì)胞碎片，死細(xì)胞以及狀態(tài)較差的細(xì)胞，落到孔板中的細(xì)胞都具有很好的活性，高速電子閥門能夠捕獲每一個(gè)活性細(xì)胞，輕柔地落進(jìn)孔板中，整個(gè)過程對(duì)細(xì)胞的損傷可以忽略不計(jì)，所以分選得到的細(xì)胞絕大多數(shù)的細(xì)胞都能再次分裂生長。目

單細(xì)胞分離技術(shù)適用于基因工程細(xì)胞的克隆2022/01/16: 單細(xì)胞分離讓單細(xì)胞選取和分離變得簡(jiǎn)單，它可以迅速選取單細(xì)胞，并將細(xì)胞直接投放至96孔或384孔板中，每一各液滴中只含有一個(gè)單細(xì)胞，主要應(yīng)用包括：腫瘤免疫治療，基因編輯，抗體工程，細(xì)胞系培育，噬菌體展示，雜交瘤細(xì)胞，循環(huán)腫瘤細(xì)胞，以及胚胎細(xì)胞的分離。Namocell單細(xì)胞分離儀具有超高的性價(jià)比，簡(jiǎn)單的用戶界面，無需培訓(xùn)，讓每一個(gè)用戶輕松掌握，得心應(yīng)手，微流控芯片分離技術(shù)，通過對(duì)細(xì)胞尺寸、顆粒度以及熒光信號(hào)的判斷，將目的細(xì)胞通過微流控液流分選至收集孔板（96或者384孔板的）。流體系統(tǒng)的壓力不到2p

單細(xì)胞分選適合大多數(shù)的實(shí)驗(yàn)室2022/01/16: 單細(xì)胞分選被越來越多的用戶采用，應(yīng)用于各類單細(xì)胞分析實(shí)驗(yàn)中。如果用戶對(duì)分選的細(xì)胞要求不是很高，也不需要最終分到單個(gè)目的細(xì)胞，我們可以選擇磁珠分選。結(jié)合了磁珠的抗體去標(biāo)記細(xì)胞，讓目的細(xì)胞帶上磁珠，通過磁場(chǎng)將結(jié)合了磁珠與沒結(jié)合磁珠的細(xì)胞分離開來,設(shè)備簡(jiǎn)單，只需要一塊磁鐵，不需要大型儀器，得到的細(xì)胞活性好，適合大多數(shù)的實(shí)驗(yàn)室。可以在重懸細(xì)胞的時(shí)候加入1%-2%的胎牛血清，大部分流式分選儀的上樣器均沒有冷卻系統(tǒng)，要想分選后獲得比較好的細(xì)胞活性，應(yīng)盡量減少細(xì)胞在室溫的暴露時(shí)間,該方法長時(shí)間分選的時(shí)候能較好

單細(xì)胞測(cè)序的主要步驟和特點(diǎn)介紹2022/01/16: 單細(xì)胞測(cè)序的興起，不僅是新概念炒作，而是在相關(guān)領(lǐng)域，長時(shí)間由于技術(shù)的瓶頸很多生物學(xué)問題沒有解決，現(xiàn)在突然有一個(gè)技術(shù)可以高性價(jià)比地解決這些問題，導(dǎo)致這個(gè)技術(shù)被大量應(yīng)用。以單細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組測(cè)序技術(shù)為例開展探討，單細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組主要包括以下四個(gè)步驟，其中關(guān)鍵的一點(diǎn)就是如何進(jìn)行單細(xì)胞的捕獲/分選，這是決定單細(xì)胞檢測(cè)成本和通量的關(guān)鍵步驟。主要步驟：在細(xì)胞分選的方法里，主要包括特異性分選和非特意性分選兩類方法，兩類方法的關(guān)系有點(diǎn)類似定量（只針對(duì)特定目標(biāo)基因進(jìn)行檢測(cè)）和轉(zhuǎn)錄組測(cè)序。非特異性選擇的方法則通常都是高通量的

單細(xì)胞分選的使用增加實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)真實(shí)性與可靠性2022/01/16: 單細(xì)胞分選利用Namocell單細(xì)胞分選儀富集目的細(xì)胞群體縮小研究范圍，對(duì)單細(xì)胞群體可進(jìn)一步精細(xì)化解讀。尤其在研究罕見細(xì)胞族群，單細(xì)胞測(cè)序前先以流式細(xì)胞分選富集稀有細(xì)胞，可大大增加實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)真實(shí)性與可靠性。現(xiàn)今已有愈來愈多單細(xì)胞測(cè)序研究結(jié)合Namocell單細(xì)胞分選，篩選目的細(xì)胞、過濾死細(xì)胞減少樣本中無效細(xì)胞的比例，提高單細(xì)胞構(gòu)建的成功率以及后續(xù)的數(shù)據(jù)質(zhì)量，讓單細(xì)胞測(cè)序更有深度與廣度分析實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，推動(dòng)進(jìn)一步研究范疇。單細(xì)胞分選儀是一款全新的細(xì)胞分離設(shè)備，基于激光與物質(zhì)相互作用的原理，實(shí)現(xiàn)對(duì)復(fù)雜生物

單克隆篩選方法和途徑介紹2022/01/16: 單克隆篩選是將免疫小鼠的脾細(xì)胞與B淋巴細(xì)胞結(jié)合成雜交瘤細(xì)胞，是新一代細(xì)胞克隆篩選和挑取技術(shù)，篩選系統(tǒng)能夠更少時(shí)間里，快速高效篩選挑取雜交瘤克隆，建立穩(wěn)定細(xì)胞株，干細(xì)胞及特殊表面標(biāo)記細(xì)胞挑取及昆蟲細(xì)胞篩選挑取。篩選方法有有限稀釋法，半固體培養(yǎng)基挑選法，以及流式細(xì)胞術(shù)挑選法等，這其中有好多需要關(guān)注的點(diǎn)，例如挑選細(xì)胞的參數(shù)，挑選方法本身對(duì)細(xì)胞的損傷等，所以說，一個(gè)高效的篩選方法絕對(duì)能讓工作效率提高好幾倍。有限稀釋法是目前常用的一種常規(guī)方法，這種方法篩選細(xì)胞的好處就是基本上不會(huì)傷害細(xì)胞，整個(gè)過程中細(xì)胞所

淺析單細(xì)胞鋪板可能會(huì)出現(xiàn)的問題2022/01/16: 單細(xì)胞鋪板是克隆篩選的常用方式，其中手動(dòng)的有限稀釋法更是具備可操作性強(qiáng)，成本相對(duì)低廉等優(yōu)勢(shì)，因此受到廣大用戶的青睞，長期用于克隆篩選的過程中。手動(dòng)細(xì)胞鋪板可能會(huì)出現(xiàn)的問題：1、細(xì)胞計(jì)數(shù)前后出現(xiàn)較大誤差？考慮細(xì)胞沉降導(dǎo)致懸液不勻；懸液體積過大或過小；稀釋倍數(shù)太高或太低等原因造成。2、如何克服細(xì)胞懸液不均勻的問題？盡量將細(xì)胞吹打?yàn)閱蝹€(gè)，防止抱團(tuán)，且用移液槍充分吹打，使其均勻懸浮在培養(yǎng)基中。3、一般加多少細(xì)胞懸液合適？由于加入計(jì)數(shù)室的量，過少會(huì)導(dǎo)致計(jì)數(shù)室內(nèi)出現(xiàn)氣泡，過多則會(huì)使得計(jì)數(shù)板上的蓋玻片不緊貼計(jì)

單細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組是一項(xiàng)新開發(fā)的技術(shù)2022/01/16: 單細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組的技術(shù)在目前的科研實(shí)驗(yàn)中應(yīng)用越來越多。最初的細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組我們都是把一群細(xì)胞或一個(gè)器官混合到一起去提取RNA，獲得的是每個(gè)細(xì)胞中RNA表達(dá)量的平均值，單細(xì)胞是把每個(gè)細(xì)胞單獨(dú)分出來去提取RNA，然后建庫測(cè)序，獲得是是單個(gè)細(xì)胞的表達(dá)值。在每個(gè)細(xì)胞里面基因的表達(dá)具有隨機(jī)性，且存在異質(zhì)性。細(xì)胞群中會(huì)存在不同類型的細(xì)胞，尤其是當(dāng)我們對(duì)整個(gè)組織或者器官進(jìn)行測(cè)序時(shí)，它們本身就是由不同類型的細(xì)胞組成的，而我們用普通轉(zhuǎn)錄組來測(cè)序，相當(dāng)于掩蓋住了這些不同的細(xì)胞類型的差異，展示的是整個(gè)組織的平均的狀態(tài)，所以說

單細(xì)胞基因組的使用解決了細(xì)胞異質(zhì)性難題2022/01/16: 單細(xì)胞基因組通過對(duì)單個(gè)細(xì)胞進(jìn)行基因組擴(kuò)增和測(cè)序，解決了用組織樣本無法獲得不同單個(gè)細(xì)胞的異質(zhì)性信息、樣本量太少無法進(jìn)行常規(guī)測(cè)序的難題，為科學(xué)研究解析單個(gè)細(xì)胞的行為、機(jī)制、與機(jī)體的關(guān)系等提供了新方向，為早期檢測(cè)、診斷疾病及疾病的個(gè)體化治療提供指導(dǎo)。單細(xì)胞測(cè)序可針對(duì)性揭示單個(gè)細(xì)胞整體水平的基因信息，解決了細(xì)胞異質(zhì)性難題，獲取單克隆細(xì)胞的突變來源及精準(zhǔn)的突變頻率，用來研究疾病以及癌癥發(fā)生發(fā)展機(jī)制等，是在單細(xì)胞水平對(duì)全基因組進(jìn)行擴(kuò)增與測(cè)序的一項(xiàng)新技術(shù)，其原理是將分離的單個(gè)細(xì)胞的微量全基因組DNA進(jìn)行擴(kuò)增，

單細(xì)胞分析技術(shù)的應(yīng)用與展望2022/01/16: 單細(xì)胞分析技術(shù)的應(yīng)用與展望，小編來帶大家一起了解一下吧！細(xì)胞作為生命體結(jié)構(gòu)和生命活動(dòng)的基本單元，要了解生命體中一些生命活動(dòng)規(guī)律，就必須要以細(xì)胞為研究基礎(chǔ)。在對(duì)于細(xì)胞內(nèi)組分的分析研究中，由于對(duì)此分析的難度比較大，所以往往采取對(duì)細(xì)胞群體的分析手段來獲得細(xì)胞中的化學(xué)信息，但是這樣就會(huì)帶來很多的局限性和弊端。在生物體內(nèi)的組織具有不均勻性，對(duì)于單個(gè)細(xì)胞間更是具有較大的差異。在對(duì)細(xì)胞群體的統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果中，掩蓋了單細(xì)胞間的差異，造成了醫(yī)學(xué)、生物學(xué)及其它學(xué)科在深一步研究中受到限制。對(duì)于單個(gè)細(xì)胞的研究，能夠掌握更

單克隆鋪板的適用特點(diǎn)，一起來了解一下吧！2022/01/16: 單克隆鋪板的適用特點(diǎn)，一起來了解一下吧！單克隆鋪板為篩選克隆提供了全新解決方案，該設(shè)備采用新的微流體技術(shù)能夠?qū)崿F(xiàn)快速，，準(zhǔn)確的細(xì)胞鋪板工作。并且分離過程輕柔，不會(huì)影響細(xì)胞的后續(xù)生長，能廣泛應(yīng)用于單抗開發(fā)中的CLD環(huán)節(jié)，以及單細(xì)胞測(cè)序等。適用特點(diǎn)：輕柔分選：鞘液壓力小于2psi，提高分選細(xì)胞的活性；靈活分選：樣本濃度范圍10~10^8cell/ml；可挑選百萬分之一含量的極稀少樣本；無菌分選：一次性芯片，保證樣本之間*隔離；儀器體積小巧，可置于超凈臺(tái)中；高效分選：96孔板分選不到1min，384孔

單細(xì)胞鋪板的有關(guān)經(jīng)驗(yàn)，來一起了解一下吧2022/01/16: 單細(xì)胞鋪板大概是我們常見的一個(gè)實(shí)驗(yàn)。現(xiàn)在我們常用的方法就是手動(dòng)的有限稀釋，但有時(shí)候鋪得不是很均勻：要么中間密周圍稀，要么周圍密中間禿頂。為了做好手動(dòng)的有限稀釋單細(xì)胞鋪板，我們需要注意以下事項(xiàng)：盡量消化細(xì)胞分散成單細(xì)胞懸液。對(duì)于易于消化的細(xì)胞，我一般DPBS清洗一遍，加0.5ml胰酶潤洗一遍（25cm2培養(yǎng)瓶或6孔板），棄掉胰酶，37度消化2-3分鐘或室溫消化5min左右，鏡下觀察是否細(xì)胞消化較為分散。如果不夠，延長消化時(shí)間。96孔板一般以100微升每孔接種，直接用100微升移液器吸取細(xì)胞懸液，沿

單細(xì)胞分離廣泛應(yīng)用于眾多研究領(lǐng)域2022/01/16: 單細(xì)胞分離對(duì)于很多應(yīng)用場(chǎng)景如，單細(xì)胞測(cè)序，單克隆培養(yǎng)等而言是關(guān)鍵的前處理步驟，殊不知單細(xì)胞分離的前處理步驟也有很多需要注意的地方。下面我們就來了解一下，為了提高單細(xì)胞分離的效率和效果，都有哪些小竅門。單細(xì)胞分離用于區(qū)分碎片、死細(xì)胞和活細(xì)胞，然后可以根據(jù)操作流程分離單個(gè)活細(xì)胞，為了去除細(xì)胞結(jié)團(tuán)，在染色之后可以用40um左右的細(xì)胞篩網(wǎng)過濾細(xì)胞，盡量保證在上樣的時(shí)候樣本都是單個(gè)細(xì)胞。作為對(duì)照，我們采用細(xì)胞密度進(jìn)行手動(dòng)有限稀釋法鋪板。然后，用顯微鏡在明場(chǎng)下觀察每個(gè)孔的細(xì)胞（或者微球）的數(shù)量，同樣的實(shí)驗(yàn)持

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