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單細(xì)胞分選的使用方法和應(yīng)用2020/07/14: 單細(xì)胞分選控制臺可通過計(jì)算機(jī)USB接口控制流體閥和顯微LED照明光源，同時(shí)也可以自由地控制顯微鏡熒光快門，并且整合了高速控制閥實(shí)現(xiàn)流體快速、精密控制。一、使用方法細(xì)胞分選儀配備高精度微移液管支架，控制臺始終保證微量吸液管位于視場的正中心，并且微移液管控制臺可非常容易地安裝在物鏡上，同時(shí)軟件可對移液管的位置進(jìn)行偏差校準(zhǔn)。微移液管的可通過轉(zhuǎn)動控制臺的旋鈕進(jìn)行手動聚焦，同時(shí)顯微鏡的圖像可跟進(jìn)調(diào)整；玻璃微移液管更換便捷，當(dāng)更換培養(yǎng)皿時(shí)簡單地取下來分選針頭即可。該系統(tǒng)采用液體靜壓力方式進(jìn)行細(xì)胞沉積，微量吸

單克隆篩選利用選擇性培養(yǎng)基進(jìn)行篩選2020/07/14: 單克隆篩選在穩(wěn)定細(xì)胞系構(gòu)建實(shí)驗(yàn)中，部分外源基因能夠通過細(xì)胞質(zhì)進(jìn)入細(xì)胞核內(nèi)，并通過分子間重組，整合進(jìn)宿主細(xì)胞染色體，不同外源基因整合位點(diǎn)不同，只有整合到表達(dá)區(qū)的基因才會表達(dá)。想要獲得穩(wěn)定表達(dá)的細(xì)胞株，需要對轉(zhuǎn)染后得到的細(xì)胞池進(jìn)行陽性克隆篩選，如果想要獲得穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的單克隆細(xì)胞株，還需要進(jìn)行單克隆篩選。原理：細(xì)胞池篩選系統(tǒng)可以分為非基因擴(kuò)增選擇系統(tǒng)與基因擴(kuò)增選擇系統(tǒng)兩種。基因擴(kuò)增選擇系統(tǒng)及GS系統(tǒng)常用。轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的質(zhì)粒帶有某種選擇性標(biāo)記（例如代謝標(biāo)記、抗生素標(biāo)記等），將帶有標(biāo)記的質(zhì)粒轉(zhuǎn)入宿主細(xì)胞后，

單細(xì)胞分選對于高通量需求具有重要意義2020/07/09: 單細(xì)胞分選可以依據(jù)熒光信號的強(qiáng)度挑出特定生物學(xué)屬性的細(xì)胞，相比起其他單細(xì)胞分離技術(shù)(如有限稀釋法、激光捕獲顯微切割、顯微操作等)，其特定類型的單細(xì)胞獲取更具準(zhǔn)確性。另外，依賴于精確的液滴分析模式，采用32等份液滴分選模式，實(shí)現(xiàn)液滴的精確分析，可以準(zhǔn)確判斷相應(yīng)液滴中目標(biāo)細(xì)胞的數(shù)量，因此可以準(zhǔn)確完成單細(xì)胞的分離操作。單細(xì)胞分選儀具有高速分析能力，可以快速識別特定細(xì)胞，尤其對于低含量細(xì)胞的分選尤為重要，分選速度快，可以在短時(shí)間內(nèi)完成多孔板的操作。另外，流式細(xì)胞分選儀支持96孔和384孔板，對于后期分析

新型單細(xì)胞分選有哪些優(yōu)勢？2020/07/06: 單細(xì)胞分選摒棄一貫以來通過微珠實(shí)現(xiàn)液滴延遲的做法，這樣可減少因噴嘴堵塞而重新計(jì)算液滴延遲時(shí)間時(shí)需要取出無菌樣品的情況，從而確保分選過程中無菌狀態(tài)不會中斷。此外還能監(jiān)測及保持液滴斷點(diǎn)的穩(wěn)定以實(shí)現(xiàn)無間斷無菌分選，確保分選的完整性。雙前向角散射光檢測技術(shù)可實(shí)現(xiàn)同時(shí)在三個數(shù)量級上測量散射光信號的特性，適當(dāng)?shù)牟ㄩL選擇則可將檢測范圍擴(kuò)大至405–640nm，從而可對較小和較大的顆粒進(jìn)行檢測。借助該儀器，研究人員可對品類繁多的生物樣本進(jìn)行研究工作，從微粒體到巨噬細(xì)胞到異種移植體，全都可以進(jìn)行分析和分選。該儀器

單細(xì)胞分選可應(yīng)對各種復(fù)雜生物樣本2020/07/02: 單細(xì)胞分選與傳統(tǒng)的流式細(xì)胞分選技術(shù)相比，該技術(shù)不對細(xì)胞進(jìn)行任何“修飾”即可實(shí)現(xiàn)精準(zhǔn)分選，可保持細(xì)胞本來的狀態(tài)，對不同類型和尺寸的細(xì)胞具有良好的普適性，可應(yīng)對各種復(fù)雜生物樣本，特別適用于微生物單細(xì)胞分選。細(xì)胞分選可從血液、尿液等成分復(fù)雜的臨床樣本中，快速定位并分離病原微生物，從而指導(dǎo)用藥，為患者特別是重癥感染患者爭取治療時(shí)間。在腫瘤醫(yī)學(xué)方面，可以對癌細(xì)胞做到單細(xì)胞水平的診斷，為早期癌癥篩查和治療提供基礎(chǔ)。同時(shí)，它還能為加快深海、高原等特殊自然環(huán)境中微生物資源的開發(fā)與利用提供前沿性技術(shù)手段。與人體和

如何實(shí)現(xiàn)高通量的單細(xì)胞分選？2020/06/30: 單細(xì)胞分選通過集成基于介電的單細(xì)胞捕獲釋放和電磁閥吸吮技術(shù)，實(shí)現(xiàn)了高速流動狀態(tài)下單細(xì)胞的捕獲、采集、釋放和分選，通量達(dá)~60個細(xì)胞/分鐘。為了進(jìn)一步提高通量，研究人員提出，單細(xì)胞經(jīng)液滴包裹后，通過耦合介電可實(shí)現(xiàn)高通量分選。首先，液滴表面凸/凹的形狀會產(chǎn)生透鏡效應(yīng)，影響激光聚焦，降低空間分辨率，導(dǎo)致無法獲取液滴中細(xì)胞的信號。其次，單細(xì)胞液滴包裹需要油相的引入，而油相具有強(qiáng)拉曼背景，會嚴(yán)重影響細(xì)胞信號的精確獲取。第三，如何實(shí)現(xiàn)采集、分析、單細(xì)胞液滴包裹及分選的自動化集成未見先例。研究人員巧妙利用先獲

單細(xì)胞分選方式利弊以及難易程度介紹2020/06/22: 單細(xì)胞分選是對細(xì)胞（或微粒）的物理、生理、生化、免疫、遺傳、分子生物學(xué)性狀及功能狀態(tài)等進(jìn)行定性或定量檢測的一種現(xiàn)代細(xì)胞分析技術(shù)。如果對通量要求較高，同時(shí)目標(biāo)細(xì)胞有適宜的熒光標(biāo)記，可利用流式細(xì)胞儀完成分選。經(jīng)熒光染色或標(biāo)記的單細(xì)胞懸液，被高壓壓入流動室內(nèi)，在鞘液的包裹和推動下，細(xì)胞被排成單列，以一定速度從流動室噴口噴出。通過相應(yīng)熒光檢測及充電，獲得目的細(xì)胞，實(shí)現(xiàn)單細(xì)胞分離。優(yōu)點(diǎn)：通量較高，可分選單個細(xì)胞。缺點(diǎn)：需要具有分選功能的流式細(xì)胞儀，有穩(wěn)定可用的熒光標(biāo)記或熒光染料，需制備一定量的細(xì)胞懸浮液，

單細(xì)胞鋪板的原理介紹2020/06/18: 單細(xì)胞鋪板是將一個孔加入少量無血清培養(yǎng)基，晃動浸潤整個孔底，然后用移液槍吸至第二孔，同樣方法浸潤孔底，其它孔依此類推，這樣整個孔底都是濕潤的，細(xì)胞懸液會平鋪在整個孔底。加細(xì)胞懸液的時(shí)候可以避免加在中間中間細(xì)胞多，而加在周邊晃勻后周邊細(xì)胞多中間少的現(xiàn)象，細(xì)胞分散較均勻，注意加完細(xì)胞懸液后要放工作臺靜置一下，細(xì)胞懸液加完后，將細(xì)胞培養(yǎng)板抬高，對著燈光，從底部往上看，看細(xì)胞有沒有抱團(tuán)，然后從底部敲擊，使之分散。全新的高效率無損全鋪板系統(tǒng)，它是真正意義上的無損、高效率、全自動的鋪板系統(tǒng)，可以實(shí)現(xiàn)并保證分

單細(xì)胞分離使工藝過程更加簡單2020/06/03: 單細(xì)胞分離法是一種從待分離的材料中直接分離單個細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)獲得純培養(yǎng)的方法。該法在顯微鏡下操作，對于體積較大的微生物，可以用毛細(xì)管提取微生物個體；對較小的細(xì)胞或孢子，可以用顯微針、鉤、環(huán)等挑取以獲得單細(xì)胞；也可將適當(dāng)稀釋后的樣品制成小液滴，在顯微鏡下選取只含有一個細(xì)胞的液滴培養(yǎng)。細(xì)胞分離的手段主要是通過將細(xì)胞懸浮后做高通量篩選，其中主要使用的是流式細(xì)胞熒光分選技術(shù)（FACS）或者免疫磁性細(xì)胞分選法（MACS），這兩種方法在臨床上目前均廣泛應(yīng)于細(xì)胞篩選。然而這兩種方法均需要使用相當(dāng)大量數(shù)量的細(xì)胞，

單細(xì)胞分離技術(shù)大揭秘，值得收藏！2020/05/27: 單細(xì)胞分離是研究中困難的步驟之一，目前的分離策略主要分為三類：手動分離、熒光激活的細(xì)胞分選和微流體技術(shù)。在進(jìn)行單細(xì)胞轉(zhuǎn)錄分析之前，我們需要確定自己拿到了正確的細(xì)胞。如果你想要的細(xì)胞已經(jīng)處于懸浮狀態(tài)（比如循環(huán)腫瘤細(xì)胞），而且含量相對比較豐富，那么流式細(xì)胞分析將是你的理想選擇。如果樣本是實(shí)體組織，我們可以用酶分解掉膠原和其他細(xì)胞外蛋白。不過酶學(xué)消化對細(xì)胞影響較大，甚至可能改變基因轉(zhuǎn)錄情況。把組織細(xì)胞制成懸液之后，我們就可以通過特異性的熒光標(biāo)簽分離出自己想要的細(xì)胞，進(jìn)一步拿到單細(xì)胞是比較棘手的一步，可

單細(xì)胞分離對操作技術(shù)有比較高的要求2020/05/22: 單細(xì)胞分離法是一種從待分離的材料中直接分離單個細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)獲得純培養(yǎng)的方法。該法在顯微鏡下操作，對于體積較大的微生物，可以用毛細(xì)管提取微生物個體；對較小的細(xì)胞或孢子，可以用顯微針、鉤、環(huán)等挑取以獲得單細(xì)胞；也可將適當(dāng)稀釋后的樣品制成小液滴，在顯微鏡下選取只含有一個細(xì)胞的液滴培養(yǎng)。毛細(xì)管分離法：對于較大的微生物，可采用毛細(xì)管提取單個個體，并在大量的滅菌培養(yǎng)基中轉(zhuǎn)移清洗幾次，除去較小微生物的污染。這項(xiàng)操作可在低倍顯微鏡，如解剖顯微鏡下進(jìn)行。顯微操作法：對于個體相對較小的微生物，需采用顯微操作儀，在顯

北京單細(xì)胞分選要考慮哪些問題？2020/05/21: 北京單細(xì)胞分選技術(shù)，即利用優(yōu)化后的高通量測序技術(shù)分析每一個單個細(xì)胞的序列信息，從而更高分辨率地揭示細(xì)胞間的細(xì)胞差異以及其在微環(huán)境中的功能情況。那么問題就來了：1.如何獲得單個細(xì)胞？如果無法獲得單個細(xì)胞這一切都是不成立的。2.如何獲得大批量的單個細(xì)胞？單組織細(xì)胞群體在10E6以上，如果被檢測的測序細(xì)胞數(shù)量過小精確度不足。3.如何低成本地獲得大批量單個細(xì)胞？單細(xì)胞測序成本高，尤其是需要測2000~3000個以上的細(xì)胞的時(shí)候，如果單個細(xì)胞的分選成本也很高，技術(shù)根本無法普及。*傳統(tǒng)的生物學(xué)分析方法常見的

單細(xì)胞分離的關(guān)鍵技術(shù)有哪些？2020/05/13: 相信許多實(shí)驗(yàn)人員，都見過傳統(tǒng)的單細(xì)胞分離設(shè)備，傳統(tǒng)的分離方法主要有：口吸管技術(shù)、顯微操作法、激光顯微切割法及流式細(xì)胞法。操作者可以將組織內(nèi)單一細(xì)胞或細(xì)胞群切割下來進(jìn)行研究，避免間質(zhì)細(xì)胞及一些炎癥細(xì)胞造成背景“污染”，可以了解到細(xì)胞的位置信息。但該方法相鄰細(xì)胞容易污染，另外在組織固定及激光切割的過程中可能會破壞細(xì)胞的完整性，對細(xì)胞核酸損傷較大，從而影響后續(xù)的遺傳物質(zhì)的擴(kuò)增。分離微流控技術(shù)利用口吸管技術(shù)，操作者可以在顯微鏡下選擇形態(tài)較好的細(xì)胞，對細(xì)胞幾乎無損傷，因此下游實(shí)驗(yàn)的成功率高，但對操作人員的

介紹單細(xì)胞培養(yǎng)的4種方法2020/04/26: 單細(xì)胞培養(yǎng)是指酵母菌、細(xì)菌等單細(xì)胞生物的培養(yǎng)，或取多細(xì)胞生物體上的一個細(xì)胞的無菌培養(yǎng)。從多細(xì)胞生物中得到單細(xì)胞的辦法是，開始對切離的組織的初始培養(yǎng)物進(jìn)行振蕩培養(yǎng)，然后在連續(xù)培養(yǎng)中用適當(dāng)?shù)暮Y孔將游離的細(xì)胞分篩出來，再將收集起來的游離的單細(xì)胞懸浮在液體培養(yǎng)基中，用微量吸管吸取一個細(xì)胞。動物細(xì)胞的單細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，要適當(dāng)稀釋接種，為使得到的單細(xì)胞進(jìn)行增殖，可以采用微量培養(yǎng)法和保護(hù)培養(yǎng)法，對浮游的單細(xì)胞群進(jìn)行平面培養(yǎng)。培養(yǎng)物的目的，在于可以得到來自單個細(xì)胞的細(xì)胞群的無性繁殖系。細(xì)胞培養(yǎng)有利于觀察細(xì)胞個體的分

單細(xì)胞測序的核心優(yōu)勢及產(chǎn)品特點(diǎn)2020/04/22: 單細(xì)胞測序技術(shù)被廣泛應(yīng)用于基礎(chǔ)科研和臨床研究。單細(xì)胞在許多領(lǐng)域都占有一席之地，對于癌癥早期的診斷、追蹤以及個體化治療具有重要意義。初次聽說細(xì)胞測序技術(shù)，又是什么噱頭？如果細(xì)胞測序就能測一個細(xì)胞或幾個細(xì)胞的話，這有什么意義？特別是對異質(zhì)性高的腫瘤組織來講，測一個細(xì)胞能代表什么？無論是蠕蟲，藍(lán)鯨，還是人類，自然界所有的多細(xì)胞生命都是從單個細(xì)胞發(fā)育而來開始。這樣一個單細(xì)胞，鬼斧神工地構(gòu)建出有機(jī)生命體所需的各種組織、器官、系統(tǒng)。每個新細(xì)胞在正確的時(shí)間，在正確的地方分裂、分化，并與相鄰細(xì)胞協(xié)調(diào)精準(zhǔn)發(fā)揮功能

研發(fā)針對晚期肝臟疾病的細(xì)胞治療方案2020/02/24: 2020年2月20日，的單細(xì)胞分離系統(tǒng)提供商美國Namocell公司與TakaraBio及HepaTx聯(lián)合宣布三方合作研發(fā)針對晚期肝臟疾病的細(xì)胞治療方案，將HepaTx研發(fā)的可發(fā)育成肝臟細(xì)胞的脂肪組織內(nèi)干細(xì)胞，首先利用Namocell專有的單細(xì)胞分離儀進(jìn)行分離，然后用TakaraBio的SMART-Seq®試劑盒進(jìn)行單細(xì)胞RNA測序，開發(fā)針對晚期肝病以及肝衰竭的治療方案。“我們很高興與Takara及HepaTx合作。我們的單細(xì)胞分離平臺能夠迅速有效地分離和獲取HepaTx研發(fā)的可發(fā)育成肝臟細(xì)胞的

單細(xì)胞鋪板的三種手法2020/02/14: 單細(xì)胞鋪板手法一：均勻單層。要鋪成那種很均勻的單層細(xì)胞，手法如下：1，細(xì)胞板子先加入一定量(一般是總量培養(yǎng)基的1/5)的培養(yǎng)基，放入孵箱中放置10-20min。2，在滴入細(xì)胞時(shí)，細(xì)胞板子與通風(fēng)櫥有一定的角度，沿著板壁的孔邊緣滴入。3，滴入后，呈“8”字方法搖晃5-8次。4，置于水平臺上，放置10-20分鐘5，放入孵箱。在細(xì)胞鋪板時(shí)，每一種板子的孔面積有多大，培養(yǎng)的液體量以及加入細(xì)胞量。手法二：中間少，周圍多。其實(shí)細(xì)胞鋪板不一定都需要單個單個的那么均勻，比如，做免疫熒光時(shí)，學(xué)霸姐姐喜歡鋪中間少，周

上海單細(xì)胞分離日趨火爆的原因有哪些？2020/02/05: 上海單細(xì)胞分離日趨火爆的原因有哪些？上海單細(xì)胞分離從異質(zhì)性的細(xì)胞群體中分離單細(xì)胞，目前主要有三種選擇：手動分離、熒光激活細(xì)胞分選和微流體技術(shù)。當(dāng)然，除了成熟的方法，巧妙的新方法也在不斷涌現(xiàn)，能以更高的準(zhǔn)確性和特異性來分離單細(xì)胞。如果你想要的細(xì)胞已經(jīng)處于懸浮狀態(tài)（比如循環(huán)腫瘤細(xì)胞），而且含量相對比較豐富，那么流式分選將是你的理想選擇。如果樣本是實(shí)體組織，我們可以用酶分解掉膠原和其他細(xì)胞外蛋白。不過，酶學(xué)消化對細(xì)胞影響較大，甚至可能改變基因轉(zhuǎn)錄情況。把組織細(xì)胞制備成懸液之后，我們就可以通過特異性的熒

你知道單細(xì)胞分析在研究細(xì)胞異質(zhì)性有哪些手段么2019/12/23: 單細(xì)胞分析是研究細(xì)胞異質(zhì)性的有效手段研究細(xì)胞異質(zhì)性的關(guān)鍵就在于能否實(shí)現(xiàn)對單個細(xì)胞進(jìn)行較多參數(shù)的分析，這就是“單細(xì)胞分析(singlecellanalysis)”的概念。事實(shí)上，自從“細(xì)胞”學(xué)說被提出后，人類一直在努力尋求分析單個細(xì)胞的技術(shù)方法。但是，單細(xì)胞分析有一個巨大的挑戰(zhàn)，那就是樣品量及其有限，一個典型的人類細(xì)胞僅含有約6.6pgDNA、10pg總RNA。從如此有限的樣品中獲取大量精確的數(shù)據(jù)無疑是一個巨大的挑戰(zhàn)。所以，傳統(tǒng)的高通量分析手段例如基因組學(xué)、轉(zhuǎn)錄組、蛋白質(zhì)組學(xué)等，往往只能基于大量細(xì)

了解一下什么是單細(xì)胞全轉(zhuǎn)錄組吧2019/12/11: 單細(xì)胞全轉(zhuǎn)錄組測序技術(shù)是在單細(xì)胞水平對全轉(zhuǎn)錄組進(jìn)行擴(kuò)增與測序的一項(xiàng)新技術(shù)。MALBAC(MultipleAnnealingａndLoopingBasedAmplificationCycles，簡稱MALBAC)，即多次退火環(huán)狀循環(huán)擴(kuò)增技術(shù)是該領(lǐng)域的先進(jìn)技術(shù)，相關(guān)文章發(fā)表于《科學(xué)》(Science)。單細(xì)胞全轉(zhuǎn)錄組技術(shù)是在單細(xì)胞水平對全轉(zhuǎn)錄組進(jìn)行擴(kuò)增與測序的一項(xiàng)新技術(shù)。其原理是將分離的單個細(xì)胞的微量全轉(zhuǎn)錄組RNA進(jìn)行擴(kuò)增后進(jìn)行高通量測序。對單個細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組的分析由Brady等和Eberwine等分別

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