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了解一下單細胞鋪板可能會出現的問題

來源:Bio-Techne   2021年05月19日 10:59  
  單細胞鋪板采用微流體技術能夠實現快速,高效,準確的細胞鋪板工作,并且分離過程輕柔,不會影響細胞的后續生長,能廣泛應用于單抗開發中的CLD環節,以及單細胞測序等。

  原理如下:將細胞通過一次性的芯片上端加樣孔,注入到芯片腔體中,單細胞流在微流控通道中流過激光檢測區域,機器能對細胞進行識別,去除掉細胞碎片,死細胞以及狀態較差的細胞,落到孔板中的細胞都具有很好的活性,高速電子閥門能夠捕獲每一個活性細胞,輕柔地落進孔板中,整個過程對細胞的損傷可以忽略不計,所以分選得到的細胞絕大多數的細胞都能再次分裂生長。

       目前絕大多數用戶采用的單細胞鋪板是手動的有限稀釋法,該方法可操作性強,成本低廉。不過,有限稀釋法也存在不足之處,下面我們再來了解一下有限稀釋法進行單細胞鋪板可能會出現的問題

  1、細胞計數前后出現較大誤差?
  考慮細胞沉降導致懸液不勻;懸液體積過大或過小;稀釋倍數太高或太低等原因造成。
  2、如何克服細胞懸液不均勻的問題?
  盡量將細胞吹打為單個,防止抱團,且用移液槍充分吹打,使其均勻懸浮在培養基中。
  3、一般加多少細胞懸液合適?
  由于加入計數室的量,過少會導致計數室內出現氣泡,過多則會使得計數板上的蓋玻片不緊貼計數板,使得高度變高。

     

       使用Namocell單細胞分離儀進行單細胞鋪板,可以避免上述問題,還可以提高效率,用戶可以在1min左右完成一塊96孔板的鋪板工作,并且整板的單細胞效率可以高達90%。Namocell單細胞分離儀是單細胞鋪板的可靠選擇。

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