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一起來了解一下單細胞全基因組的測序技術吧2019/11/23

單細胞全基因組測序技術是在單細胞水平對全基因組進行擴增與測序的一項新技術。其原理是將分離的單個細胞的微量全基因組DNA進行擴增，獲得高覆蓋率的完整的基因組后進行高通量測序用于揭示細胞群體差異和細胞進化關系。從方法學角度來看，獲得高覆蓋率高保真性的全基因組擴增產物是準確全面的測序結果的保障。多重置換擴增(multipledisplacementamplification，MDA)利用隨機引物和等溫擴增可以獲得高保真的DNA大片段，但該方法的主要缺陷在于非平衡的基因組覆蓋率、擴增偏倚、嵌合序列及非特

分享一下關于單克隆分離的方法有哪些2019/11/12

今天跟大家分享一下關于單克隆分離的方法有哪些吧，下面讓我們一起來看看吧。一、有限稀釋法材料：a、96孔細胞培養板等;b、HT培養基;c、活力強的雜交瘤細胞;d、小鼠腹腔細胞。方法：a、制備小鼠腹腔細胞。同“細胞融合”一節中的方法。b、制備待克隆的雜交瘤細胞懸液，用含20%血清的HT培養基稀釋至每毫升含2.5、15和50個細胞三種不同的稀釋度。c、按每毫升加入5×104-1×105細胞的比例，在上述雜交瘤細胞懸液中分別加入腹腔巨噬細胞。d、每種雜交瘤細胞分裝96孔板一塊，每個稀釋度32孔，每孔量為

在使用單細胞鋪板可能會出現的問題2019/10/23

單細胞鋪板是細胞實驗中常見又必須掌握的一門技術，看似簡單，我們卻經常遇到：如細胞居中或者中間稀疏等不均勻分布的現象，導致我們只能扔掉，重新鋪板。既耽擱時間又浪費了細胞及培養板等資源。歷經多次失敗后，才發現原來單細胞鋪板是有規律可循的，今天我們就聊一聊：細胞鋪板的技巧。首先，了解一下單細胞鋪板的必要性!從經濟和的角度來說，需要根據實驗目的選擇不同規格的培養板。如在進行藥物對待測細胞半抑制率(IC50)測試時，通常使用96孔板，一方面可以設置濃度梯度;另外還可一次性測多個藥物，減少實驗誤差。下面我們

單細胞鋪板的選擇分享2019/10/17

傳統的單細胞鋪板一般采用手動的有限稀釋法來進行，這種方法在需要的操作簡單，只需要普通的排槍就能實現，但是效果卻很不理想。主要體現在：一致性差，有效孔比例低下，耗費時間等。近年來，單抗藥物的開發領域又被推上了一個新的高度，越來越多的公司都紛紛投入到這個熱潮當中，隨之而來的相關法規的要求也是越來越嚴格。在眾多的要求當中，fda對藥物來源的單克隆源性的要求非常嚴格，這就要求生產和研發的企業在細胞株開發階段做到嚴格的單克隆驗證。目前市面上已經有幾款孔板掃描設備能夠得到fda的認可，他們的數據可以用來作為

Namocell單細胞分離儀在單細胞測序領域的應用2019/09/27

Namocell單細胞分離儀在單細胞測序領域的應用---Namocell參加2019細胞產業大會9月26至27日2019年細胞產業大會暨2019第四屆（上海）細胞與腫瘤醫療高峰論壇在上海新南雅酒店舉行。本屆會議，邀請了全國30位專家學者、人物演講、40家企業參展，400余人報名參會，逾500人參加了會議，就細胞儲存、細胞治療、細胞培養、細胞工程、細胞銀行、細胞能量與代謝、細胞免疫學、細胞生理學、細胞衰老、細胞病理學、再生醫學、生物冷鏈、生物樣本庫、醫療等議題，開展內容豐富、形式多樣的學術交流及主

單細胞分選的使用方法及用途2019/09/20

單細胞分選的使用方法及用途單細胞分選用流式細胞儀將特定的細胞分選出來的技術，在分選前，細胞要被戴上特殊的符號，所用的符號細胞的探針是可以同待分選細胞外表特征性蛋白（抗原）結合的抗體，而這種抗體又可以同某種熒光染料結合。當結合有熒光染料的探針與細胞群溫育時，探針就會同具有特異外表抗原的細胞緊緊結合，因為抗體的結合，被結合的細胞帶上了熒光符號，細胞被符號之后，除掉游離的抗體，并將細胞進行稀釋。當稀釋的細胞進入超聲波振蕩器時，極稀的細胞懸浮液形成很小的液滴，一個液滴中只含有一個細胞。液滴一旦形成并經過

單細胞分離確保了分析結果的高精度2019/09/11

單細胞分離確保了分析結果的高精度單細胞分離是一種從待分離的材料中直接分離單個細胞進行培養獲得純培養的方法。該法在顯微鏡下操作，對于體積較大的微生物，可以用毛細管提取微生物個體；對較小的細胞或孢子，可以用顯微針、鉤、環等挑取以獲得單細胞；也可將適當稀釋后的樣品制成小液滴，在顯微鏡下選取只含有一個細胞的液滴培養。對于較大的微生物，可采用毛細管提取單個個體，并在大量的滅菌培養基中轉移清洗幾次，除去較小微生物的污染，這項操作可在低倍顯微鏡，如解剖顯微鏡下進行。對于個體相對較小的微生物，單細胞分離采用顯微

單細胞分析是研究細胞異質性的有效手段2019/08/26

單細胞分析是研究細胞異質性的有效手段單細胞分析研究細胞異質性的關鍵就在于能否實現對單個細胞進行較多參數的分析，這就是“單細胞分析”的概念。事實上，自從“細胞”學說被提出后，人類一直在努力尋求分析單個細胞的技術方法。但是，單細胞分析有一個巨大的挑戰，那就是樣品量及其有限，一個典型的人類細胞僅含有約6.6pgDNA、10pg總RNA，從如此有限的樣品中獲取大量的數據無疑是一個巨大的挑戰。所以，傳統的高通量分析手段例如基因組學、轉錄組、蛋白質組學等，往往只能基于大量細胞進行分析，得到的也是大量細胞的平

單細胞基因表達分析在基因表達研究中占有越來越重要的地位2019/08/21

單細胞基因表達分析在基因表達研究中占有越來越重要的地位單細胞基因表達分析是一種快速分析基因表達信息的技術，它通過快速和詳細分析成千上萬個表達序列標簽來尋找出表達豐度不同的SAGE標簽序列，從而接近完整地獲得基因組表達信息。單細胞基因表達分析技術與基因芯片一起為目前兩種常見的基因表達譜研究方法。隨著第三代測序技術的發展，通過構建cDNA文庫，然后利用第二代測序技術的高通量優勢對mRNA文庫進行測序，進而進行基因表達譜分析的方法在基因表達譜研究中占有越來越重要的地位。單細胞基因表達分析又稱定量即時聚

單細胞分離用于細胞鋪板的原理2019/07/25

單細胞分離用于細胞鋪板的原理單細胞分離儀為細胞鋪板提供了全新解決方案。該設備采用新的微流體技術能夠實現快速，，準確的細胞鋪板工作并且分離過程輕柔，不會影響細胞的后續生長，能廣泛應用于單抗開發中的CLD環節，以及單細胞測序等。單細胞分離用于細胞鋪板的原理如下：將細胞通過一次性的芯片上端加樣孔，注入到芯片腔體中。單細胞流在微流控通道中流過激光檢測區域，機器能對細胞進行識別，去除掉細胞碎片，死細胞以及狀態較差的細胞，使得落到孔板中的細胞都具有很好的活性。高速電子閥門能夠捕獲每一個活性細胞，終形成1ul

單克隆篩選的加藥時間和維持濃度2019/07/18

單克隆篩選的加藥時間和維持濃度由于基因轉染到細胞內之后要一段時間才能表達出蛋白質，所以單克隆篩選不能太早；但是也不能太晚，因為轉染了外源基因的細胞代謝負荷較大，增值較慢，時間長了就會被沒有外源基因轉入的細胞所淹沒，終導致單克隆篩選不出陽性克隆，一般要在轉染24小時之后才開始篩選。隨著細胞的代謝的濃度和活性都回下降，所以每3~5天都要更換一次篩選液，這時藥物濃度可以降至200ug/ml。加抗生素的時機，主要是考慮插入到細胞基因組的抗性基因是否已經得到表達，一般是轉染48小時后加入抗生素，挑出單克隆

上海單細胞分離巧妙的新方法在不斷涌現2019/06/25

上海單細胞分離巧妙的新方法在不斷涌現上海單細胞分離是單細胞研究中困難的步驟之一，目前的單細胞分離策略主要分為三類：手動分離、熒光激活的細胞分選和微流體技術。在進行單細胞轉錄分析之前，我們需要確定自己拿到了正確的細胞。如果你想要的細胞已經處于懸浮狀態（比如循環腫瘤細胞），而且含量相對比較豐富，那么流式細胞分析將是你的理想選擇。如果樣本是實體組織，我們可以用酶分解掉膠原和其他細胞外蛋白。不過酶學消化對細胞影響較大，甚至可能改變基因轉錄情況。把組織細胞制成懸液之后，我們就可以通過特異性的熒光標簽分離出

北京單細胞分選整體結構設計合理2019/06/23

北京單細胞分選整體結構設計合理北京單細胞分選可實現同時在三個數量級上測量散射光信號的特性，適當的波長選擇則可將檢測范圍擴大至405–640nm，從而可對較小和較大的顆粒進行檢測，借助該儀器，研究人員可對品類繁多的生物樣本進行研究工作，從微粒體到巨噬細胞，從星型膠質細胞到異種移植體，全都可以進行分析和分選。該儀器還可用于一些非生物學應用，比如瓊脂糖凝膠液滴、金納米粒子或環境顆粒；或者單細胞研究，比如循環腫瘤細胞、新藥研發、稀有分析、干細胞和神經細胞以及微生物生態和生理學等。北京單細胞分選是一款空氣

細胞基因表達分析增加了實驗數據的可靠性2019/05/29

細胞基因表達分析增加了實驗數據的可靠性細胞基因表達分析與芯片可以為眾多研究生成高質量的數據，其精心挑選的內容提供超過180萬種預設計的引物/探針套裝，覆蓋超過30個物種，基于研究需求，通量和目標數量，具有預配置，可配置或自定義選項等可用規格。細胞基因表達分析核酸標準品與新一代測序文庫的稀有目標檢測和定量，可以在進行實時PCR反應之前對DNA進行擴增，它可以增加用于后續反應的DNA而不改變樣本中DNA的相對量，該方法可以用來進行單細胞研究。細胞基因表達分析通過將逆轉錄（RT）和實時PCR擴增（qP

單細胞挑選的使用范圍越來越廣闊2019/05/06

單細胞挑選的使用范圍越來越廣闊單細胞挑選顯微操作法是通過鏡檢，對單個細胞進行人工挑選的方法，在制備好適宜濃度的細胞懸浮液后，可置于顯微鏡下觀察，利用口吸管（可由玻璃毛細管拉制而成）將目標細胞吸取出來。條件允許的話，還可使用顯微操作儀，該儀器對口吸管、注射儀、毛細針有一定的固定、調節功能，可在一定程度上增加操作的通量以及穩定性。如果對通量要求較高，同時目標細胞有適宜的熒光標記，可利用流式細胞儀完成單細胞挑選。經熒光染色或標記的單細胞懸液，被高壓壓入流動室內，在鞘液的包裹和推動下，細胞被排成單列，以

單細胞基因組具有安全便捷的優點2019/05/06

單細胞基因組具有安全便捷的優點單細胞基因組可以揭示出每個細胞*的微妙變化，甚至可以揭示全新的細胞類型。單細胞測序技術可謂是科技發展*的一大創舉，它極大地推進了基因組學領域，使不同細胞類型得以精細區分，使得科學家們在單細胞水平進行分子機制研究成為可能。單細胞基因組顯微操作技術提供了獲得少量細胞的替代方法，我們可以通過直接特定位置摘取單個細胞進行測序，但是這種方法依賴于人工操作，無法實現高通量進行。在多細胞生物體中，由于細胞存在著有絲分裂，在傳代過程中DNA復制存在著各種各樣的突變，這些突變通過積累

單克隆分離深受廣大客戶的好評2019/05/05

單克隆分離深受廣大客戶的好評單克隆分離采用的是集流式細胞術和微流控技術于一體的新一代細胞分離技術。流式細胞儀的流體聚焦技術能夠極大地提高檢測靈敏度，另外微流控技術使得設備內部的鞘液壓力可以降至2psi以下，也無需高頻振蕩，減少了分選過程對細胞的傷害，大大提高了分選出來的細胞的活性，適用脆弱細胞的分離。另外，一次性芯片真正實現了細胞分選過程中，樣本之間的*隔離（從加樣到分離全都在芯片中完成）?！皢慰寺》蛛x頭”利用聚丙稀導入頭細長柔韌無斷裂且導通的特性，將試劑、糊劑等材料直接送入細長多彎深孔處，有通

單克隆鋪板的開發領域又被推上了一個新的高度2019/05/05

單克隆鋪板的開發領域又被推上了一個新的高度單克隆鋪板為細胞鋪板提供了全新解決方案，該設備采用新的微流體技術能夠實現快速，，準確的細胞鋪板工作。并且分離過程輕柔，不會影響細胞的后續生長，能廣泛應用于單抗開發中的CLD環節，以及單細胞測序等。單克隆鋪板是一款基于有限稀釋的基礎上研發的全自動細胞鋪板工具，有別于其他類型的細胞鋪板工具，它的整合了細胞成像系統，細胞識別系統及自動加樣系統，在進行鋪板后能夠快速識別出是否有細胞被分配到孔里，對沒有分配到細胞的孔進行重復操作，直到分配有細胞為止，能夠大大提高一

單細胞鋪板使用過程安全可靠2019/04/30

單細胞鋪板使用過程安全可靠單細胞鋪板可以根據熒光條件篩選，也可以不染色直接鋪板，一次性芯片，保證樣本之間*隔離；儀器體積小巧，可置于超凈臺中，96孔板分選不到1min，384孔板4min以內，單克隆率超過95%，儀器操作簡單，無需專人操作維護。傳統的細胞鋪板一般采用手動的有限稀釋法來進行，這種方法在需要的操作簡單，只需要普通的排槍就能實現，但是效果卻很不理想。主要體現在：一致性差，有效孔比例低下，費時間等。近年來，單抗藥物的開發領域又被推上了一個新的高度，越來越多的公司都紛紛投入到這個熱潮當中，

上海單細胞分離提高了實驗的靈敏度和效率2019/04/30

上海單細胞分離提高了實驗的靈敏度和效率上海單細胞分離是在單細胞研究中使用廣泛的技術，其高出其他方法幾個數量級的篩選能力和富集細胞的特性讓前面提到的技術*。上海單細胞分離在基礎研究和臨床中的使用已經成熟。但是，由于對已知免疫特征的依賴，它無法被用來篩選特征未知的異質細胞，而單細胞研究的主旨就是發現未知，這導致其在生物探索領域的功用存在缺憾。另一方面，上海單細胞分離的優勢是富集具有同質免疫特性的細胞，但產物仍然是許多細胞的懸浮液，將其應用于單細胞分選需要比較繁瑣的改進，且仍然缺乏簡便有效的驗證方法，