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實驗室的中針式過濾器的使用方法2022/12/16

針式過濾器是在實驗室中HPLC及IC分析時進行樣品前處理的重要耗材，可以過濾樣本溶液，去顆粒污染物，保護儀器。作為實驗室常規(guī)使用的方便可靠的過濾工具，針式過濾器有利于實驗操作步驟的簡化，可以大幅提高工作效率。掌握針式過濾器的使用方法核注意事項十分重要。針式過濾器有不同的膜材質(zhì)，不同材質(zhì)的膜應(yīng)用不同，應(yīng)該根據(jù)實驗需要選取適合樣本過濾的膜，將針式過濾器連接到注射器上，要輕輕擰緊以保證密封良好，針式過濾器分滅菌和非無菌兩種類型，滅菌型針式過濾器使用前需進行預(yù)處理，過濾器安裝完成后用清水對過濾系統(tǒng)進行沖

考馬斯亮蘭的測定含量2022/12/15

簡介該方法用于大多數(shù)蛋白質(zhì)的定量是比較精確的，但不適用于小分子堿性多肽的定量。如核糖核酸酶或溶菌酶。去污劑的濃度超過0.2%影響測定結(jié)果，如TritonX-100、SDS、NP-40等。常用于細胞骨架的檢驗。濃染液將100mg考馬斯亮藍G-250溶于50mL95%乙醇，加入100mL85%的磷酸，然后，用蒸餾水補充至1000mL，此染液放4℃至少6個月保持穩(wěn)定。樣本準(zhǔn)備盡量使用與待測樣本性質(zhì)相近的蛋白質(zhì)作為標(biāo)準(zhǔn)品，例如測定抗體，可用純化的抗體作為標(biāo)準(zhǔn)。如果待測樣本是未知的，也可用抗體作為標(biāo)準(zhǔn)蛋白

原位雜交技術(shù)服務(wù)分類2022/12/14

基因組原位雜/交技術(shù)基因組原位雜/交(Genomeinsituhybridization，GISH)技術(shù)是20世紀80年代末發(fā)展起來的一種原位雜/交技術(shù)。它主要是利用物種之間DNA同源性的差異，用另一物種的基因組DNA以適當(dāng)?shù)臐舛茸鞣庾瑁诎腥旧w上進行原位雜/交。GISH技術(shù)剛開始應(yīng)用于動物方面的研究(Pinkeletal.,1986)，在植物上剛開始應(yīng)用于小麥雜/zhong和栽培種的鑒定(余舜武等2001；王文奎等2000)。熒光原位雜/交技術(shù)熒光原位雜/交(Fluorescenceinsi

超氧化物岐化酶是什么2022/12/13

超氧化物歧化酶（SuperoxideDismutase，SOD）是生物體內(nèi)存在的一種抗氧化金屬酶，它能夠催化超氧陰離子自由基歧化生成氧和過氧化氫，在機體氧化與抗氧化平衡中起到至關(guān)重要的作用，與很多疾病的發(fā)生、發(fā)展密不可分。分類按照SOD中金屬輔基的不同,大致可將SOD分為三大類，分別為Cu/Zn-SOD、Mn-SOD、Fe-SOD。①Cu/Zn-SOD：呈藍綠色,主要存在于真核細胞的細胞質(zhì)內(nèi)，被認為存在于比較原始的生物類群中且分布最/廣的一種。②Mn-SOD：呈粉紅色,主要存在于原核生物和真核生

什么是預(yù)染蛋白marker2022/12/12

ELISA試劑盒蛋白marker可分為未預(yù)染的Marker即寬分子量蛋白標(biāo)準(zhǔn)、高分子量蛋白標(biāo)準(zhǔn)以及低分子量蛋白標(biāo)準(zhǔn)以及預(yù)染的Marker即單色預(yù)染和多色預(yù)染。那么，什么是預(yù)染蛋白marker？預(yù)染蛋白marker為一些純化好的蛋白的混合物.這些蛋白混合物與一種藍色染料共價偶聯(lián).可在凝膠電泳時出現(xiàn)強度均勻的8條帶.同未預(yù)染的蛋白marker相比,預(yù)染蛋白marker因與染料共價偶聯(lián)而在SDS-PAGE電泳時的遷移特性發(fā)生某些改變。預(yù)染蛋白分子量標(biāo)準(zhǔn)預(yù)染蛋白分子量是一些純化好的蛋白混合物，通過與染料

蛋白酶K的應(yīng)用2022/12/09

蛋白酶K已廣泛應(yīng)用在皮革、毛皮、絲綢、醫(yī)藥、食品、釀造等方面。皮革工業(yè)的脫毛和軟化已大量利用蛋白酶，既節(jié)省時間，又改善勞動衛(wèi)生條件。蛋白酶還可用于蠶絲脫膠、肉類嫩化、酒類澄清。臨床上可作藥用，如用胃蛋白酶治療消化不良，用酸性蛋白酶治療支氣管炎，用彈性蛋白酶治療脈管炎以及用胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶對外科化膿性創(chuàng)口的凈化及胸腔間漿膜粘連的治療。加酶洗衣粉是洗滌劑中的新產(chǎn)品，含堿性蛋白酶，能去除衣物上的血/漬和蛋白污物，但使用時注意不要接觸皮膚，以免損傷皮膚表面的蛋白質(zhì)，引起皮疹、濕疹等過敏現(xiàn)象。值得注

轉(zhuǎn)化生長因子TGF-beta Superfamily2022/12/08

轉(zhuǎn)化生長因子β(TGF-beta)超家族是最大的分泌性生長因子家族，它由幾個亞家族組成，包括TGF-βs、骨形態(tài)發(fā)生蛋白(BMPs)、生長和分化因子(GDFs)、激活素、抑制素和神經(jīng)膠質(zhì)細胞衍生的神經(jīng)營養(yǎng)因子(GDNFs)。TGF-β信號傳導(dǎo)是通過配體結(jié)合由I型和II型跨膜絲氨酸/蘇氨酸激酶受體組成的異聚體復(fù)合物而啟動的。配體結(jié)合后，II型受體將I型受體轉(zhuǎn)磷酸化。I型受體激酶隨后磷酸化受體調(diào)節(jié)的Smads(R-Smads)，然后與co-Smad、Smad4結(jié)合，并轉(zhuǎn)移到細胞核并激活靶基因的轉(zhuǎn)錄。

瓊脂糖的電泳技術(shù)2022/12/07

特點天然瓊脂（agar）是一種多聚糖，主要由瓊脂糖（agarose，約占80%）及瓊脂膠（agaropectin）組成。瓊脂糖是由半乳糖及其衍生物構(gòu)成的中性物質(zhì)，不帶電荷，而瓊脂膠是一種含硫酸根和羧基的強酸性多糖，由于這些基團帶有電荷，在電場作用下能產(chǎn)生較強的電滲現(xiàn)象，加之硫酸根可與某些蛋白質(zhì)作用而影響電泳速度及分離效果。因此，多用瓊脂糖為電泳支持物進行平板電泳，其優(yōu)點如下。（1）瓊脂糖凝膠電泳操作簡單，電泳速度快，樣品不需事先處理就可以進行電泳。（2）瓊脂糖凝膠結(jié)構(gòu)均勻，含水量大（約占98%~

6-芐氨基嘌呤的生理作用2022/12/06

用途機理用途：6-BA是第一個人工合成的細胞分裂素。6-BA具有抑制植物葉內(nèi)葉綠素、核酸、蛋白質(zhì)的分解。目前6BA在柑橘保花保果和促進花芽分化上大量應(yīng)用，比如6BA是個高效能植物生長調(diào)節(jié)劑，在促進發(fā)芽、促進花芽分化、提高坐果率、促進果實生長、提高果品品質(zhì)等多方面表現(xiàn)良好。機理：屬廣譜性植物生長調(diào)節(jié)劑，可促進植物細胞生長，抑制植物葉綠素的降解，提高氨基酸的含量，延緩葉片衰老等，可用于發(fā)綠豆芽和黃豆芽，最大使用量為0.01g/kg，殘留量小于0.2mg/kg。誘導(dǎo)芽的分化，促進側(cè)芽生長，促進細胞分裂

腫瘤壞死因子有什么臨床應(yīng)用2022/12/05

應(yīng)用TNF在治療腫瘤等方面開始臨床Ⅱ期試驗，也可與IL-2聯(lián)人事治療腫瘤，目前認為全身用藥的療效不及局部用藥，后者如病灶內(nèi)注射，局部濃度高且副作用也較輕。近年來已采用TNF基因治療開始對黑素瘤等腫瘤進行臨床驗證。值得重視的TNF又與臨床某些疾病的發(fā)生有關(guān)。(1)感染性休克：目前認為革蘭氏陰性桿菌或腦膜炎球菌引起的彌漫性血管內(nèi)凝血、中毒性休克是由于細菌內(nèi)毒素刺激機體產(chǎn)生過量TNF-α，引起發(fā)熱，心臟、腎上腺嚴重損害，呼吸循環(huán)衰竭，甚至引起死亡，其TNF水平與病死率正相關(guān)。其發(fā)病機理可能是TNF刺激

二甲基亞砜用途與作用2022/12/02

二甲基亞砜，英文名稱DMSO。無色粘稠液體。有吸濕性。能與水、乙醇、丙酮、乙醛、吡啶、乙酸乙酯、苯二甲酸二丁酯、二惡烷和芳烴化合物等任意互溶，不溶于乙炔以外的脂肪烴類化合物。二甲基亞砜用途廣泛，可用作溶液和反應(yīng)試劑。DMSO在有機合成，醫(yī)藥、電子等方面均有應(yīng)用。二甲基亞砜特別用于無水化學(xué)合成反應(yīng)及醫(yī)藥中間體合成反應(yīng)溶劑。使用該溶劑能提高反應(yīng)速度，反應(yīng)收率，縮短反應(yīng)時間。二甲基亞砜是有機溶媒，溶解范圍廣，并具有一定的消炎止癢作用，在實驗室中作為溶媒被廣泛使用。也廣泛用作滲透性冷凍保護劑。在生物方面

Western blotting實驗完整流程-從蛋白提取到出結(jié)果2022/12/01

1.提蛋白（不同細胞類型的蛋白或細胞不同部位的蛋白提取方法或有不同，需要提前查找資料）我用的是凱基生物公司的全蛋白提取試劑盒一般是取100mg標(biāo)本+1mllysisbuffer+10ul磷酸酶抑制劑+10ulPMSF+1ul蛋白酶抑制劑放入研磨器研磨，直至研磨成勻漿（注意冰上操作，有的試劑盒說明在研磨時加液氮），倒入EP管，放入離心機離心，12,000g/5min，取上清。另一種提蛋白試劑，用RIPAbuffer(Gibco)+1%cOmplete™,EDTA-freeProteaseInhib

透析袋的用處有多大？2022/11/30

透析袋是用半透膜制成袋狀，將生物大分子樣品溶液置入袋內(nèi)，將此透析袋浸入水或緩沖液中，樣品溶液中的大分子量的生物大分子被截留在袋內(nèi)，而鹽和小分子物質(zhì)不斷擴散透析到袋外，直到袋內(nèi)外兩邊的濃度達到平衡為止。保留在透析袋內(nèi)未透析出的樣品溶液稱為“保留液”，袋（膜）外的溶液稱為“滲出液”或“透析液”。新透析袋可用沸水煮五至十分鐘，再用蒸餾水洗凈，即可使用。透析膜可用動物膜和玻璃紙等，但用的多的還是用纖維素制成的透析膜，截留分子量MWCO（即留在透析袋內(nèi)的生物大分子的小分子量）。截留分子量越大也就是說透過性

DMEM培養(yǎng)基的高糖與低糖有哪些區(qū)別？2022/11/29

DMEM培養(yǎng)基由MEM培養(yǎng)基改良而來，是貼壁培養(yǎng)細胞優(yōu)先選擇的一款培養(yǎng)基。根據(jù)葡萄糖含量的高低，DMEM培養(yǎng)基一般可以區(qū)分為高糖型(低于4500mg/L)和低糖型(低于1000mg/L)兩種。其中，高糖型DMEM培養(yǎng)基有利于細胞停泊于一個位置生長，適于生長較快、附著較困難的腫瘤細胞等。而做單抗細胞融合時，則一般會選用使用低糖型DMEM培養(yǎng)基。高糖型DMEM使細胞生長過快，反而不利于融合細胞的染色體穩(wěn)定。DMEM培養(yǎng)基的高糖與低糖有哪些區(qū)別？1、用途不同：低糖DMEM用于養(yǎng)干細胞可防分化，高糖DM

濾膜中的有機系和水系區(qū)別在哪里?2022/11/28

再生纖維素膜(RegeneratedCelluloseMembranes，RC)為疏水型濾膜，具有非特異性吸附低，特別適合于除微粒過濾，其化學(xué)兼容性強，可以耐受大多數(shù)有機溶劑，其化學(xué)兼容性如下表所示。直徑50mm和47mm，孔徑0.45μm作為標(biāo)準(zhǔn)用于溶劑的超凈和脫氣過濾以及HPLC流動相的過濾。主要用于有機溶劑的過濾。醋酸纖維素膜(CelluloseAcetateMembranes，CA)具有很高的流速和熱穩(wěn)定性以及非常低的吸附。0.2μm的濾膜非常適合于水溶液、緩沖液、血清和培養(yǎng)基的除菌過濾

胎牛血清的生產(chǎn)工藝流程有哪些2022/11/25

胎牛血清是母牛在懷孕五至八月齡胎時，將胎牛取出并進行心臟穿刺取血。穿刺取血可較大程度的避免外界的污染。而新生牛血清是從剛出生到2周內(nèi)的新生牛靜脈采血。和新生牛血清相比，胎牛血清顯然產(chǎn)量低，成本高。胎牛血清應(yīng)用在哺乳動物細胞培養(yǎng)中；因此，胎牛血清應(yīng)用很廣泛。比如，胎牛血清能夠用在科研、工業(yè)生產(chǎn)、人獸疫苗生產(chǎn)的質(zhì)量控制及生物技術(shù)藥物的質(zhì)量控制領(lǐng)域。真正胎牛血清的生產(chǎn)工藝流程有哪些呢？胎牛血清主要步驟：1.固定和麻醉胎牛原血清采集的關(guān)鍵技術(shù)主要是懷孕母牛的剖腹產(chǎn)和太牛的全封閉無菌心臟穿刺采血，對懷孕8

培養(yǎng)皿的使用方式和注意事項2022/11/24

1、注意事項:使用前經(jīng)過清潔消毒，,培養(yǎng)皿清潔與否對工作影響較大，可影響培養(yǎng)基的酸堿度，若有某些化學(xué)藥品的存在，會抑制細菌生長。新購的培養(yǎng)皿應(yīng)先用熱水沖洗，再置于質(zhì)量分數(shù)為1%或2%的鹽酸溶液中浸泡數(shù)小時，使游離堿性物質(zhì)除去，再用蒸餾水沖洗2次。若要培養(yǎng)細菌,再用高壓蒸氣(一般6.8*10的5次方Pa高壓蒸氣)，120°C的溫度下30min滅菌,置室溫干燥，或用干熱滅菌，就是將培養(yǎng)皿置于烘箱內(nèi),度控制在120°C左右的情況下維持2h,殺死細菌的胞牙。經(jīng)過消毒的培養(yǎng)皿才能接種培養(yǎng)使用。2、使用方法

如何使用超濾管2022/11/23

超濾離心管具有快速超濾功能，能夠達到較高的濃縮倍數(shù)，輕松實現(xiàn)從稀釋和復(fù)雜的混和樣本中濃縮回收目的產(chǎn)物。垂直設(shè)計的超濾膜以及較大的有效濾膜表面積有助于快速的樣本處理，獲得較高樣本回收率(通常90%),并達到30倍的濃縮。根據(jù)標(biāo)稱分子量限值(NMWL)的不同,典型處理時間為10-30分鐘。超濾膜的垂直設(shè)計也大大降低了溶質(zhì)極化造成的濾膜結(jié)垢;死體積設(shè)計能有效防止過度離心使樣本干掉而造成樣本損失。收集濾出液后，濃縮樣本(截留部分)可通過一個簡便的倒置(上下反轉(zhuǎn))離心步驟而實現(xiàn)高效回收。超濾管未經(jīng)消毒,僅

percoll分離細胞的原理2022/11/22

Percoll是一種包有乙烯吡咯烷酮的硅膠顆粒。滲透壓很低（Ficoll常用來分離人外周血單個核細胞。Ficoll是蔗糖的多聚體，呈中性，犌W水性高，平均分子量為400,000，當(dāng)密度為1.2g／ml仍未超出正常生理性滲透壓，也不穿過生物膜。紅細胞、粒細胞比重大，離心后沉于管底；淋巴細胞和單核細胞的比重小于或等于分層液比重，離心后漂浮于分層液的液面上，也可有少部分細胞懸浮在分層液中。吸取分層液液面的細胞，就可從外周血中分離到單個核細胞。

二甲基亞砜的用途與作用2022/11/21

二甲基亞砜，英文名稱DMSO。無色粘稠液體。有吸濕性。能與水、CH3CH2OH、丙酮、CH?CHO、吡啶、乙酸乙酯、苯二甲酸二丁酯、二惡烷和芳烴化合物等任意互溶，不溶于C?H?以外的脂肪烴類化合物。二甲基亞砜用途廣泛，可用作溶液和反應(yīng)試劑。DMSO在有機合成，醫(yī)藥、電子等方面均有應(yīng)用。二甲基亞砜特別用于無水化學(xué)合成反應(yīng)及醫(yī)藥中間體合成反應(yīng)溶劑。使用該溶劑能提高反應(yīng)速度，反應(yīng)收率，縮短反應(yīng)時間。二甲基亞砜是有機溶媒，溶解范圍廣，并具有一定的消炎止癢作用，在實驗室中作為溶媒被廣泛使用。也廣泛用作滲透