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上海聯碩生物科技有限公司
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免疫熒光技術的技術分類有幾種2023/05/11
⑴熒光抗體技術抗原抗體反應后,利用熒光顯微鏡判定結果的檢測方法。⑵免疫熒光測定抗原抗體反應后,利用特殊儀器測定熒光強度而推算被測物濃度的檢測方法⑴熒光物質1)熒光色素許多物質都可產生熒光現象,但并非都可用作熒光色素。只有那些能產生明顯的熒光并能作為染料使用的有機化合物才能稱為免疫熒光色素或熒光染料。常用的熒光色素有:⑴異硫氰酸熒光素(fluoresceinisothiocyanate,FITC)為黃色或橙黃色結晶粉末,易溶于水或酒精等溶劑。分子量為389.4,最大吸收光波長為490--495nm
常見蛋白質變性劑尿素、鹽酸胍和異硫氰酸胍的優缺點、區別2023/05/10
蛋白質變性劑是一類能使蛋白質發生變性作用的試劑。蛋白質變性是指當蛋白質受物理或化學因素的影響,其分子內部原有的結構和性質發生改變的過程。一般認為蛋白質的二級結構和三級結構有了改變或遭到破壞,都是變性的結果。常見的蛋白質變性劑有強酸、強堿、重金屬鹽、丙酮、尿素、鹽酸胍和異硫氰酸胍等。在生化實驗中,常需要對蛋白質進行變性研究,一般我們常用尿素、鹽酸胍和異硫氰酸胍這三種蛋白質變性劑。今天我們就來講講這三種蛋白質變性劑的優缺點、區別、變性機制和注意事項等內容。尿素、鹽酸胍和異硫氰酸胍的優缺點:尿素的溶解
胰酶的作用機理和應用領域2023/05/09
胰酶是經提取、精制、復配而成的一種復合酶,含有蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶等,具有較強的分解蛋白質及脂肪等能力,廣泛應用于食品、醫療、釀造、絲綢、制革等行業。應用領域:1、胰酶應用在動物蛋白水解,如雞豬牛等家禽肉類、骨類肉副產品、魚蝦蚌類等水海產品的蛋白水解,生產各種肉類香精、骨湯料、肉類及海產品的抽提物。2、胰酶是一種無毒的蛋白質,已成功應用于洗滌劑用酶工業,可添加在普通洗衣粉、濃縮洗衣粉和液體洗滌劑當中,既可用于家庭洗衣,也可用于工業洗衣,可以有效的去除蛋類、乳制品、或肉汁、菜汁等蛋白類的污漬,另
NC膜、PVDF膜的選擇2023/05/08
硝酸纖維素膜又稱為NC膜,在膠體金試紙中用做C/T線的承載體,同時也是免疫反應的發生處。所以NC膜成為該試驗中最重要的耗材NC膜、PVDF膜的選擇westernblot中膜的選擇是實驗成功的關鍵點,Westernblot實驗中一般可以選擇硝酸纖維素膜(NC)和PVDF膜,那NC膜和PVDF膜有什么區別呢?怎樣才能選擇最恰當的雜交膜進行Westernblot實驗呢?WesternBlot時該選擇NC膜還是PVDF膜?硝酸纖維素膜:硝酸纖維素膜(NC膜)是蛋白印跡實驗的標準固相支持物。在低離子轉移緩
實驗室移液吸頭的分類2023/05/06
吸頭作為與移液器配合使用的耗材,一般根據應用的不同可分為:標準吸頭、濾芯吸頭、低吸附吸頭、自動工作站吸頭、寬口吸頭。1.標準吸頭是應用最為廣泛的吸頭,幾乎所有移液操作可使用普通吸頭,這是吸頭中實惠的一類。2.濾芯吸頭是為了避免交叉污染而設計的一種耗材,濾芯吸頭移取的樣品,不能進入移液器的內部,從而起到保護移液器的部件不被污染和腐蝕,更重要的是也可以保證樣品間不會有交叉污染,常用于分子生物學、細胞學、病毒學等實驗中。3.對于靈敏度要求高的實驗,或者易殘留的珍貴樣品或試劑,可以選擇低吸附吸頭來提高回
常見細胞裂解液有哪些?2023/04/25
RIPA裂解液:RIPA裂解液是一種傳統的細胞組織快速裂解液,獲得的蛋白樣品可用于常規WB、IP等實驗。組分:25mMTris-HCl,pH7.6、150mMNaCl、1%NP-40、1%去氧膽酸鈉、0.1%十二烷基硫酸鈉(SDS)。IP裂解液:IP裂解液是一種改良后的RIPA裂解液,具中等強度效力,可高效溶解細胞蛋白,但不會像RIPA一樣釋放染色體組DNA或破壞蛋白復合物。適合下游免疫沉淀或親和吸附應用。組分:25mMTris-HCl,pH7.4、150mMNaCl、1%NP-40、1%mME
ripa裂解液的成分及使用方法2023/04/24
RIPA主要是從動物組織和動物細胞中抽取的可溶性蛋白。RIPA裂解液(RIPALysisBuffer)是一種傳統的細胞組織快速裂解液。RIPA裂解液裂解得到的蛋白樣品可以用于常規的Western、IP等。RIPA的本意是RadioImmunoprecipitationAssay。RIPA裂解液的配方有很多種,根據其裂解液的強度大致可以分為強、中、弱三類。成分:RIPA裂解液(強)的主要成分為50mMTris(pH7.4),150mMNaCl,1%TritonX-100,1%sodiumdeoxy
瓊脂和瓊脂糖有什么區別?2023/04/18
瓊脂和瓊脂糖的區別:瓊脂和瓊脂糖之間的主要區別在于,瓊脂是從紅藻中獲得的凝膠狀物質,而瓊脂糖是從瓊脂或紅海藻中純化的線性聚合物。瓊脂和瓊脂糖是來自紅藻或海藻的兩種多糖產品。它們在各個領域都非常有用,從廚房(如食物)到化學實驗室(作為細菌生長的培養物)。因此,這些資源的種植具有商業價值,并且正在亞洲和美國的部分地區進行。在結構上,瓊脂糖是一種線性聚合物,由交替的D-半乳糖和3,6-脫水-L-半乳糖單元組成。另一方面,瓊脂是瓊脂糖和瓊脂膠的混合物。什么是瓊脂?瓊脂或瓊脂-瓊脂是從江蘺和石花菜等紅藻中
DMEM高糖、DMEM低糖、DMEM/F-12培養基到底啥差別?2023/04/11
DMEM高糖培養基DMEM高糖培養基是在MEM培養基基礎上改良而來,目前已廣泛應用于各種細胞的培養。DMEM高糖培養基普遍應用于生長快、粘附性低的細胞。可用于多種哺乳動物原代細胞的培養,例如原代成纖維細胞、神經細胞、神經膠質細胞、HUVEC、平滑肌細胞等,也可以用于一些細胞系的培養,例如Hela、293、Cos-7及PC-12等。DMEM低糖培養基DMEM低糖培養基是一種應用十分廣泛的培養基,可用于許多哺乳動物細胞培養。DMEM低糖培養基適合代謝作用慢、依賴性貼壁細胞的培養。DMEM/F-12培
姬姆染色液的操作步驟及注意事項2023/03/23
操作步驟:1、滴加姬姆染色液A液(0.5-0.8ml)于涂片上,并讓染液覆蓋整個標本涂色片染色1分鐘。2、將姬姆薩染色液B液滴加于A液上面(滴加之量為A液的2-3倍)以洗耳球吹出微風使液面產生漣漪狀,使兩液充分混合,染色3-10分鐘。3、水洗(沖洗時不能先倒掉染液,應以流水沖去,以防有沉渣沉淀在標本上)。4、干燥,鏡檢。注意事項:1、染色時間要視何種標本,涂片薄厚,有核細胞多少,何種細胞及溫室等而定;通常染血液涂片時滴加B液后染1-3分鐘即可,染骨髓片則應不少于5分鐘。2、做骨髓涂片時因為骨髓纖
DMEM(低糖)的注意事項和使用步驟2023/03/06
DMEM培養基是一種含各種氨基酸和葡萄糖的培養基,是在MEM培養基的基礎上研制的。與MEM比較增加了各種成分的用量,同時又分為高糖型(低于4500gm/L)和低糖型(低于1000mg/L)。DMEM低糖培養基用于養干細胞可防分化,DMEM高糖可養大多數哺乳動物的細胞。注意事項:1、培養及長期放置,需要2-8℃避光保存,請勿低溫凍存。2、培養基中添加的L-谷氨酰胺在溶液中不穩定、易分解,長期放置后使用若發現細胞生長變慢可以在使用前加入適量的L-谷氨酰胺,來維持細胞正常代謝。3、含有NaHCO3的培
DNA提取試劑盒有哪幾種?2023/02/28
DNA提取試劑盒是根據lv/芐化/法構建的,能夠從樣本中提取基因組DNA的試劑盒。lv化/芐具有能將含有纖維素等的細胞壁中的羥基芐基化,從而破壞細胞壁的特性。本制品利用了lv化/芐的這一特性,將植物樣品凍結融解后,再使用PipetTip將植物樣品在Microtube壁上數次按壓即可破壞細胞壁。本法與傳統方法相比,省去了液氮研磨等煩瑣步驟,有利于一次性處理大量樣品。而且,本制品經過了改良,熱處理時間只需15分鐘,使用本制品從實驗開始至水相回收只需30分鐘時間。得到的基因組DNA可以進行PCR擴增及
離心管與EP管的區別?離心管有哪些種類?2023/02/21
離心管和ep管區別是規格不同,名稱不同。1.EP管是一種小型的離心管,主要是1.5毫升容量的離心管,可與微型離心機一起使用,主要用于微量試劑的分離。EP管為離心管,而離心管不一定是EP管,所含離心管范圍較大,有較多的規格。EP管覆蓋范圍更大,規格也更多。按大小可分為大量離心管、普通離心管和微量離心管。2.塑料離心管通常是一次性實驗用具,不建議多次重復使用。為了節約成本,可以根據需要對離心管進行再利用,但要保證實驗結果的科學性,需要通過高溫高壓消毒。PE材料離心管,不能高溫高壓消毒。3.離心式管道
酶標板分類與性能判斷2023/02/08
酶標板作為ELISA檢測實驗中的輔材,起著舉足輕重的作用并直接影響最終實驗結果,酶標板的好壞主要取決于其對蛋白吸附的靈敏度、板孔間蛋白吸附能力差異以及所采購酶標板批次間的差異。因此,選擇一款蛋白吸附靈敏度高、對蛋白吸附能力孔間差異小、批次間差異小的酶標板產品,是實驗者獲得可靠、穩定實驗結果的保障。酶標板分類:根據不同的分類標準,酶標板有著不同的分類。一、根據孔數,可分為96孔、48孔等,由于酶標板主要是配合酶標儀用,目前市面上的酶標儀最多為96孔,因此酶標板最為常用的也是96孔。二、根據其底部的
培養皿和培養基的區別?2023/02/06
培養基,是指供給微生物、植物或動物(或組織)生長繁殖的,由不同營養物質組合配制而成的營養基質。培養基有好幾種分類方法,按狀態分可以分為固體培養基,液體培養基和半固體培養基,還可以按原料來源,功能或者使用范圍等來分類。培養皿是放培養基的容器,一般用于盛放固體瓊脂培養基,說白了就是塑料或者玻璃制成的圓形淺碟。培養皿和培養基的區別大概就相當于水杯和水的區別吧,一個是容器一個是內容物。培養基:培養基是供植物組織、動物組織和微生物生長以及維持用的人工配制的養料,一般都包含有碳水化合物、無機鹽(包括微量元素
免疫組化原理、流程及結果分析2023/02/03
免疫組化原理免疫組化染色是用一抗與被檢測組織中目的蛋白抗原結合,然后用HRP等標記的二抗與一抗進行結合,最后通過與DAB顯色劑反應,進而確認所要檢測蛋白抗原的定位、半定量等目的。免疫組化更多的意義在于查看目的蛋白的定位。定量一般用western來實現。免疫組化染色和HE染色的不同之處可能是HE染色比較粗略地辨認不同細胞形態學改變;而后者能夠針對特異性細胞標志物來檢測特異性細胞的改變(數量)、也可檢測細胞內細胞因子的轉位,組織中一些特異性蛋白的表達的量改變(通過圖像分析系統分析顏色深淺、分布的面積
關于細胞樣的操作步驟及注意事項2023/02/02
一、操作步驟:1、在37℃5%CO2條件下將細胞加在處理的載玻片上,用培育基培育,時間通過預試驗確定;2、細胞長好后,用洗刷液洗2分鐘×3次,室溫下將其放入細胞固定液中固定30-60min,蒸餾水洗刷;3、室溫下用洗刷液充沛洗刷固定細胞,(干燥后-20℃冰凍保存2周以上)4、雜交前將固定的細胞進行如下處理;順次在70%,90%,100%的乙醇中浸泡,脫水每次5min,用二jia苯洗刷,除掉殘留脂質順次在100%,90%,70%乙醇中浸泡,進行再水化,每次5min,后浸泡于洗刷液中;5、在37℃用
普魯士藍和滕氏藍的區別2023/02/01
一、來源不同1、普魯士藍:Fe與[Fe(CN)6]4-反應,生成沉淀普魯士藍。2、滕氏藍:Fe與[Fe(CN)6]3-反應,生成沉淀滕氏藍。二、顏色不同1、普魯士藍:普魯士藍的顏色較滕氏藍略深一些,為深藍色。2、滕氏藍:滕氏藍的顏色較普魯士藍略淺一些,為暗藍色。三、化學式不同1、普魯士藍:普魯士藍的化學式為Fe4[Fe(CN)6]3。2、滕氏藍:滕氏藍的化學式為Fe3[Fe(CN)6]2。一、普魯士藍與滕氏藍的電子結構略有差異,且普魯士藍的顏色比滕氏藍更深。二、普魯士藍與滕氏藍的制作方法不同,但
如何選擇離心管?2023/01/30
離心管是離心機中最重要的配件之一,它主要是用來承裝實驗樣品的,我們使用離心機時,首先需要用到的就是轉子,轉子里面需要放的就是離心管了。那么,了解過離心管的作用之后,你知道離心管應該如何選擇嗎?想要了解離心管如何選擇就要先說到材質,離心管的材質一般分為三種,第一種是塑料離心管,第二種是玻璃離心管,第三種是鋼制離心管。一般來說,我們zuichangyong的離心管就是塑料離心管,塑料離心管的優缺點也很明顯,優點是它的硬度較小,可以利用穿刺法來得到我們需要的物質。但這也正是它的缺點,因為硬度小,所以它
正辛酸的合成方法及用途2023/01/29
合成方法:生產方法簡述:工業上生產辛酸是采用辛醛為原料,在實驗室制備時采用正己基丙二酸加熱放出二氧化碳,減壓至4-6.65kPa使反應wanquan。最后將反應產物減壓蒸餾,收集127-129℃(2.13kPa)餾分即為辛酸。收率80-85%。由1-辛烯和過醋酸反應可制得辛酸。此外還有正辛醇氧化脫氫法。精制方法:用分子篩脫水后減壓分餾。也可用分步結晶法精制。1.辛醛氧化法2.正己基丙二酸法3.正辛醇氧化脫氫法4.1-辛烯法由1-辛烯和過醋酸反應制得:5.煙草:OR,44;OR,49;BU,56;
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