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怎樣提取及分離純化金屬硫蛋白2022/11/18

金屬硫蛋白（metallothionein，MT)是一類廣泛存在于生物中的低分子質量(6~7kD)、無芳香族氨基酸、富含金屬與半胱氨酸(Cys20%?30%)的生物學特性的金屬結合蛋白。1957年，美國科學家Margoshes和Vallee最早從馬腎中分離得到金屬硫蛋白，繼1975年Prinz從釀酒酵母中分離得到Cu-MT后，1977年科學家又從大豆的根中分離出富含Cd2+的類金屬硫蛋白。金屬硫蛋白中大量巰基賦予了其螯合重金屬離子功能及重金屬解毒作用，同時MT清除自由基的能力明顯強于超氧化物歧化

雌二醇的制備方法2022/11/17

制備方法：采用人骨髓來源細胞使用化合物三甲基膽蒽（MCA）誘導產生并篩選出細胞，并使用該細胞在體外合成性雌二醇；所述細胞已由中國典型培養物保藏中心保藏，保藏號CCTCCC2012173；制備步驟為：（1）人骨髓來源細胞（HMBDCs，主要成分為人骨髓間充質干細胞）采用現有技術（本實施例采用骨髓沖洗、貼壁法）進行原代培養制備，制備的細胞培養于含15%胎牛血清的DMEM培養基，培養條件為37℃，5%CO2，直至105個細胞/培養瓶；（2）培養基中加入MCA，使其終濃度為1ug/ml，并每星期更換含M

胎牛血清、新生牛血清、小牛血清之間的區別2022/11/16

小牛血清，新生牛血清，胎牛血清三者是依據采集的牛齡的不同來命名。胎牛是還未接觸外界世界的母牛體內的牛，所以胎牛血清的免疫球蛋白含量應該是極少的，血清比較純。依次是新生牛，再次是小牛。三者的區別：1、采血時間不同胎牛血清（FetalBovineSerum）是在母牛懷孕5-8個月時，通過胎牛心臟穿刺采血獲取的血清。新生牛血清（NewbornCalfSerum）是來自剛出生~出生后2周內的新生牛靜脈取血。小牛血清（CalfSerum）采自出生后2周至1年內的小牛靜脈取血。2、組份與比例不同兩者所含的促

蛋白酶k在DNA提取中的作用2022/11/15

蛋白酶k是一種枯草蛋白酶類的高活性蛋白酶，用于生物樣品中蛋白質的一般降解。從林伯氏白色念球菌（tritirachiumalbumlimber）中純化得到。蛋白酶k，是一種切割活性較廣的絲氨酸蛋白酶。它切割脂族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽鍵。此酶經純化去除了RNA酶和DNA酶活性。由于蛋白酶k在尿素和SDS中穩定，還具有降解天然蛋白質的能力，因而它應用很廣泛，包括制備脈沖電泳的染色體DNA，蛋白質印跡以及去除DNA和RNA制備中的核酸酶。蛋白酶k的一般工作濃度是50—100μg/ml。在較廣的p

DNA提取試劑盒的幾種提取步驟2022/11/14

DNA提取試劑盒是根據氯/化/芐法構建的，能夠從樣本中提取基因組DNA的試劑盒。氯/化/芐具有能將含有纖維素等的細胞壁中的羥基芐基化，從而破壞細胞壁的特性。本制品利用了氯/化/芐的這一特性，將植物樣品凍結融解后，再使用PipetTip的尖//端將植物樣品在Microtube壁上數次按壓即可破壞細胞壁。本法與傳統方法相比，省去了液氮研磨等煩瑣步驟，有利于一次性處理大量樣品。而且，本制品經過了改良，熱處理時間只需15分鐘，使用本制品從實驗開始至水相回收只需30分鐘時間。得到的基因組DNA可以進行PC

什么是組蛋白？組蛋白的功能是什么？2022/11/08

組蛋白（histone）是真核生物體細胞染色質與原核細胞中的堿性蛋白質，和DNA共同組成核小體結構。它們是染色質的主要蛋白質組分，作為DNA纏繞的線軸，并在基因調控中發揮作用，但是原核細胞組蛋白對基因調控的作用非常微弱。沒有組蛋白，染色體中未纏繞的DNA將非常長（人類DNA中的長寬比超過1000萬比1）。例如，每個人類二倍體細胞（含有23對染色體）具有約1.8米長的DNA，但是在組織蛋白上纏繞它具有約90微米（0.09毫米）的染色質，當在有絲分裂期間復制和濃縮時，其導致約120微米的染色體。組蛋

常用抗原的修復方法2022/10/31

1）抗原熱修復可根據實驗室的具體條件，選用微波爐抗原修復、高壓鍋抗原修復或水浴高溫抗原修復。抗原熱修復可選用各種緩沖液，如TBS、PBS、重金屬鹽溶液等，但實驗證明，以0.01M枸櫞酸鹽緩沖液（pH6.0）效果。請選用我公司提供的ZLI-9064枸櫞酸鹽緩沖液（粉劑）配制，取該粉劑一包溶于1000ml的蒸餾水中，混勻，其pH值在6.0±0.1，如因蒸餾水本身造成的pH值偏差，請自行調整。（1）高壓熱修復切片脫蠟至水。將1500ml~3000ml的0.01M枸櫞酸鈉緩沖溶液（pH6.0，工作液）或

Trizol法提取總RNA的流程及原理2022/10/26

提取原理：Trizol試劑的主要成分是苯/酚。苯/酚的主要作用是對細胞進行裂解，從而使細胞當中的蛋白質以及核酸物質解聚而得以釋放。苯/酚雖然可以有效的使蛋白質變性，但它不能抑制RNA酶的活性，因此Trizol中還加入了8－羥基喹/啉、異硫氰酸胍、β-巰基乙醇等來抑制內源和外源RNase（即RNA酶）。Trizol試劑是直接從細胞或組織中提取總RNA的試劑。在樣品的裂解液或勻漿中，Trizol能保持RNA的完整性。加入氯/仿(CHCl3)后離心，樣品能分成水樣層和有機層。而RNA存在于水樣層中。在

吐溫的用途有哪幾種？2022/09/30

吐溫（或聚山梨酯）為非離子型表面活性劑，有異臭，溫暖而微苦，系一系列聚氧乙xi去水山梨醇的部分脂肪酸酯。廣泛用作乳化劑和油類物質的增溶劑。聚山梨酯通常被認為是無毒、無刺激性的材料。據WHO的評估，按總聚山梨酯計算，日攝入量可高到25mg/kg體重。用途：1.生物學實驗中乳化蛋白，在使用時，Tween和同類型的TritonX-1OO(聚乙二醇辛基苯基醚)非離子型去污劑不破壞蛋白的結構，可減少對蛋白質之間原有的相互作用的破壞。離子型去污劑如SDS則破壞蛋白的結構。2.在生物學實驗中作封閉劑，封閉劑應

pH 標準緩沖溶液的特點、配飾方法及保存方法有哪些？2022/09/29

1.什么是pH標準緩沖溶液？它有哪些特點？pH緩沖溶液是一種能使pH值保持穩定的溶液。如果向這種溶液中加入少量的酸或堿，或者在溶液中的化學反應產生少量的酸或堿，以及將溶液適當稀釋，這個溶液的pH值基本上穩定不變，這種能對抗少量酸堿或大或稀釋，而使pH值不變化的溶液就稱為緩沖溶液。pH標準緩沖液有以下特點：（1）標準溶液的pH值是已知的，并達到規定的準確度；（2）標準溶液的pH值有良好的復現性和穩定性，具有較大的緩沖容量，較小的稀釋值和較小的溫度系數；（3）溶液的制備方法簡單；2.如何配制pH標準

牛血清白蛋白（BSA）的主要成分及作用有哪些？2022/09/28

牛血清白蛋白（BovineSerumAlbumin,BSA）是牛血清中的一種球蛋白，又稱第五組分（需要注意的是，第五組分并不是BSA的一種組份，而是EdwinJ.Cohn教授早期從血液中通過特定的分離技術得到5種組份，其中第五種就是白蛋白）一、主要成分：1、蛋白質是牛血清中主要成份。除包括可攜帶金屬離子、脂肪酸和自身是激素類蛋白外主要還有白蛋白，球蛋白。纖維粘連素細胞促進細胞附著；α2巨球蛋白抑制胰蛋白酶的作用；胎牛血清中含胎球蛋白促細胞附著；轉鐵蛋白能結合鐵離子，減少其毒性和被細胞利用。2、多

關于細胞傳代2022/09/27

1.細胞吸除培育瓶內舊培育液。2.參加無菌pbs洗液（5-8mL）悄悄潤濕細胞，稀釋多余的培育基，之后吸走洗液，動作要輕，不可吹打到細胞。3.向瓶內參加含0.25%EDTA的胰蛋白酶混合液少許，以能覆滿瓶底為限。4.置溫箱中2~5分鐘，一旦鏡檢發現細胞質回縮，細胞間隙增大后，細胞變圓，比較松動后，當即終止消化。5.參加該細胞對應的培育基6mL（T25培育瓶）或12mL（T75培育瓶）終止消化。6.用吸管通過吸取的培育基悄悄反復吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時應盡量以少的次數將細胞

二甲基亞砜的運用有哪些2022/09/22

二甲基亞砜是一種在許多制造行業上都可以用獲得的物質，這類物質能夠協助大家處理各個方面的問題。而在藥業生產及其診療中，二甲基亞砜也是擁有較為普遍的運用，能夠用于醫治各種各樣的病癥，使病人修復身心健康。一、在診療中的運用DMSO對很多藥品具備水溶液性、透水性、自身具備消炎、止疼，推動血液循環系統和傷口修復，并有有利排尿、銷靜功效。能提升藥品消化吸收和提升功效。各種各樣藥品融解在DMSO中，無需內服和注射，涂在皮膚上就能滲透到身體，開拓了給藥有效途徑。更關鍵的是提升了病房部分藥品成分，減少人體別的的藥

提取原代細胞的方法與詳細步驟2022/09/21

原代細胞是通過一定的方法如酶法或機械法或生長法使細胞從人體和動物的母體器官、組織或液體中分離出來，并在受控環境條件下分離的細胞在體外或其他人體和動物體內生長。原代細胞的提取方法詳細步驟：1.整個操作要在潔凈通風的超凈臺下進行，所有的器材要高壓消毒。2.根據BALB/c小鼠的體重，將小鼠置于盛有75%乙醇的燒杯內，這一步不僅可以消毒，也可以讓小鼠體毛浸濕，后續剃去皮毛的時候不會沾到剪刀或組織上。3.用鑷子輕輕挑起小鼠的心臟，裝有PBS的注射器插入心尖，同時在右心耳處剪開一個小口，緩慢推動注射器，隨

甲殼質的應用2022/09/20

甲殼質又稱甲殼素、幾丁質，英文名Chitin，是一種從海洋甲殼類動物的殼中提取出來的多糖物質，化學式為(C8H13O5N)n。甲殼質是淡米黃色至白色，溶于濃鹽酸、磷酸、硫酸和乙酸，不溶于堿及其它有機溶劑，也不溶于水。甲殼質的脫乙酰基衍生物殼聚糖（chitosan）不溶于水，可溶于部分稀酸。甲殼素應用范圍很廣泛，在工業上可做布料、衣物、染料、紙張和水處理等。在農業上可做殺蟲劑、植物抗病毒劑。漁業上做養魚飼料。化妝品美容劑、毛發保護、保濕劑等。醫療用品上可做隱形眼鏡、人工皮膚、縫合線、人工透析膜和人

PBS是磷酸鹽緩沖溶液2022/09/19

PBS緩沖液，是生物化學研究中使用最為廣泛的一種緩沖液，主要成分為Na2HPO4、KH2PO4、NaCl和KCl，一般作為溶劑，起溶解保護試劑的作用。由于Na2HPO4和KH2PO4有二級解離，緩沖的pH值范圍很廣，而NaCl和KCl主要作用為增加鹽離子濃度。如有需要PBS還可以補加1mmol/LCaCl2和0.5mmol/LMgCl2，以提供二價陽離子。PBS是磷酸鹽緩沖溶液的簡稱，不僅偽狂犬病毒要用它稀釋，一般的有活性的生物制劑都要用它來稀釋。原因就是它具有鹽平衡、可調整的適宜pH緩沖作用，

檸檬酸鐵的作用與危害2022/09/16

檸檬酸鐵銨具有強身健體、消除疲勞等作用，但可能會有輕度的、胃難受、便秘和腹瀉等副作用。可促進脂肪分解，調節身體酸堿平衡。緩解小兒厭食、智力發育遲緩和出牙晚、青少年精力不集中、易疲勞和牙齒發育不良以及預防老年性皮膚病、腰椎頸椎疼痛等癥狀。檸檬酸鐵銨也能夠去除皮膚表面堆積的陳舊性角質，清潔皮膚、疏通毛孔檸檬酸鐵銨一般不會對人造成較大的危害。檸檬酸鐵銨作為一種食品添加劑，一般并不會對身體組織器官功能造成損害，危害到身體健康，只是在少數情況下，可以引起嘔吐、、胃部疼痛、腹瀉等消化道不適癥狀。生活中使用檸

羧甲基纖維素2022/09/15

天然纖維素是自然界中分布、含量最多的多糖，來源十分豐富。當前纖維素的改性技術主要集中在醚化和酯化兩方面。羧甲基化反應是醚化技術的一種。纖維素經羧甲基化后得到羧甲基纖維素（CMC），其水溶液具有增稠、成膜、黏接、水分保持、膠體保護、乳化及懸浮等作用，廣泛應用于石油、食品、醫藥、紡織和造紙等行業，是最重要的纖維素醚類之一。羧甲基纖維素（CMC）屬陰離子型纖維素醚類，外觀為白色或微黃色絮狀纖維粉末或白色粉末，無臭無味，無毒；易溶于冷水或熱水，形成具有一定粘度的透明溶液。溶液為中性或微堿性，不溶于乙醇、

葡聚糖的作用與功效2022/09/13

葡聚糖可以讓巨噬細胞被有效激活，能夠讓膠原蛋白產生更好，也可以讓傷口愈合速度更快，讓皮膚細胞再生能力提高，在燕麥，靈芝以及香菇中存在葡聚糖成分，它可以發揮出很好的保健作用，能夠讓免疫力增強，改善腸道功能，抵抗輻射以及改善血脂，是一種非常不錯的物質，可以根據身體需求進行補充，讓身體更加健康，抵抗疾病的能力更強。1、可提升免疫力，預防和抑制腫瘤；2、可以降低血糖，有預防和控制糖尿病的作用；3、可以改善肝功能，快速增強抵抗力，預防肝臟疾病；4、降低高血脂，對膽固醇有較好的吸附作用，防止血栓的形成；5、

鹽酸小檗堿簡介2022/09/09

一種異喹啉生物堿。分子式[C20H18NO4]+。又稱黃連素。存在于小檗科等4科10屬的許多植物中。小檗堿從中可析出黃色針狀晶體。熔點145℃。溶于水，難溶于苯、和氯仿。小檗堿為一種季銨生物堿，其鹽類在水中的溶解度都比較小，例如鹽酸鹽為1∶500，硫酸鹽為1∶30。小檗堿從水或稀乙醇中析出的晶體帶有5.5分子結晶水；若從氯仿、丙酮或苯中結晶，也帶有相應的結晶溶劑分子。小檗堿用不同的堿處理，可得到季銨式、醛式和醇式等三種不同形式的小檗堿，其中以季銨式穩定。小檗堿對溶血性鏈球菌、金黃色葡萄球菌、淋球