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蛋白藥物凍干時出現的常見現象2020/08/20

生物藥品是以微生物，寄生蟲，動物霉素，生物組織為起始材料，采用生物學工藝或分離純化技術制備。對于大多數生物藥品來說，冷凍干燥都是生產過程的一項極為重要的制劑手段。對于藥品的品質起了關鍵作用。蛋白藥物凍干時出現的常見現象，1.快速凍結大多對蛋白類藥品凍干不利，是因為快速凍結過程中，冰晶與凍結濃縮的溶液間界面面積增大，使變性蛋白質量增大。2.低溫回火常有利于蛋白類藥品的凍干，是因為低溫回火促使冰晶生長，冰界面面積減小。3.凍干過程中濃度較高的蛋白溶液凍干后穩定性相對較好。是因冰界面處蛋白處于飽和狀態

凍干機放大工藝要考慮的因素2020/08/19

試驗型凍干機凍干結果的放大工藝，要考慮這些因素1.箱體壁溫TW,2.隔板溫度Th，3.箱體真空壓力Po,4.隔板，箱體壁，藥瓶之間的幾何關系。傳到板層上藥瓶的熱量與這些因素有關，1.從箱體壁面傳到板層端部藥瓶側部的熱量比板層中心部藥瓶的熱量多的多，并且從下隔板的空余面往端部藥瓶側面有追加傳熱量，因此，中心部藥瓶的升華干燥時間約為端部藥瓶的2倍。2.箱體壁溫，對于壁面傳熱到端部藥瓶側面以及中心藥瓶上部的熱量影響很大，隨著箱體壁溫的降低，壁面傳到藥瓶的熱量則大為減少。3.隨著隔板溫度的降低，從下隔板

抗生素類藥物及凍干2020/08/18

抗生素（antibiotics）是由微生物（包括細菌、真菌、放線菌屬）或高等動植物在生活過程中所產生的具有抗病原體或其它活性的一類次級代謝產物，能干擾其他生活細胞發育功能的化學物質。抗生素提取方法溶媒萃取法，離子交換法，直接沉淀法。抗生素類藥物的制備與凍干時需要知道的幾個方面1.配料的水溫、加料的順序、活性炭的吸附時間和溫度、料液放置時間。2、有的原料存在多晶型，不同晶型的穩定性是不一樣的；有的原料對溫度敏感；有的原料對pH敏感；有的原料對氧化敏感等。不穩定性物質的分解物很可能就是異物的來源。3

抗體及冷凍干燥2020/08/17

抗體是一類能與抗原特異性結合的免疫球蛋白。抗體按其反應形式分為凝集素、沉降素、抗毒素、溶解素、調理素、中和抗體、補體結合抗體等。抗體在醫療實踐中應用廣泛。抗體的溶解方法是用移液器加0.1ml雙蒸水到試管內，混勻，-20℃保存。怎樣分裝呢？抗體溶解后，將其分裝成5-10支（如0.1ml抗體，20ulx5支或10ulx10支），-20℃保存，用一支取一支，避免反復凍溶。抗原抗體凍干保護劑機理：甘油、山梨醇可以保持抗原抗體表面的滋潤，使其不至于因失水而失活。以血漿為例介紹一下其制備及冷凍干燥1.先將冰

輔酶及凍干法制備工藝2020/08/15

輔酶A為白色或微黃色粉末，具典型的硫醇味。有引濕性，一溶于水不溶于丙酮、乙醇。易被空氣（特別在痕量重屑離子存在時）、過氧化氫、碘或高猛酸堿鹽等氧化成無活性的二硫化物，故在制劑中加穩定劑和賦形劑（填充劑）。輔酶A為水溶液中不穩定的藥物，需采用凍干法制備成粉針。凍干法制備工藝先是藥品的準備，包括無菌配液→過濾→分裝（安瓿瓶或西林瓶），此時藥品溶液要保持一定的濃度，為了有利于干燥和凍干后形成穩定的多孔結構，還需要添加賦形劑：對于激素、酶、疫苗等劑量相對較小的熱敏型藥品，加入凍干保護劑：為保護含有蛋白質

多肽的穩定性及凍干保存2020/08/14

多肽是蛋白質水解的中間產物。通常由三個或三個以上氨基酸分子脫水縮合而成的化合物都可以成為叫多肽。多肽在其制劑研究中存在不穩定性，其原因較多。但對某一個多肽來說引起不穩定的主要原因并不多。可以詳細研究外界條件（如PH、溫度、光照、氧濃度等）對多肽穩定性的影響有助于設計合理的制劑配方。怎樣能提高多肽的穩定性？可通過加入添加劑，如糖類、多元醇、明膠、氨基酸和某些鹽類，可以提高多肽的穩定性。在凍干過程中，上述物質還可以取代水而與多肽形成氫鍵來穩定多肽的天然構象，而且還可以提高凍干制品的玻璃化溫度。多肽發

緩沖溶液及溶液凍干升華2020/08/13

緩沖溶液是由能抵抗外加的少量酸，堿或稀釋而保持本身的PH值基本不變的溶液，用來配制緩沖溶液的試劑叫緩沖試劑。在生物制品冷凍干燥配方中選擇緩沖試劑應注意什么呢？如每一種緩沖劑不能都用于任何溶液，如蛋白質溶液對于PH敏感，這時就應該避免使用磷酸鈉緩沖劑。這是由于在凍結過程中磷酸氫二鈉易于優先結晶，溶液PH值降低，終會引起蛋白質變性。又如緩沖劑的濃度也是很重要的，例如，β-牛乳糖水溶液（2μg/ml）冷凍干燥過程中，因為甘露醇結晶而不能起到保護作用。當添加濃度為10mM的磷酸鹽緩沖液（pH7.4）后，

冷凍干燥之凍干曲線2020/08/12

凍干曲線是表示凍干過程中產品的溫度、壓力隨時間變化的關系曲線。實踐中凍干曲線往往用擱板溫度（或箱內空間溫度）與時間的關系曲線來表示。在制定凍干曲線時要考慮下列幾個因素：1.有些產品受冷凍的影響較大，有些產品則影響較小；一般細菌性的產品受冷凍的影響較大，病毒性的產品受冷凍的影響較小。共熔點低的產品要求預凍的溫度低，加熱時板層的溫度相應要低些；為了長期保存產品，殘余水份含量要求低的產品，凍干時間需長些。殘余水份含量要求高的產品，凍干時間可縮短；2.總裝液量和每一容器內產品裝液量的多少，裝液量多則凍干

生物制品冷凍干燥的升華要點2020/08/11

生物制品的溶液是由主要功能成分（如藥用成分）、多種天加組分（如抗氧化劑、填充劑等）和蒸餾水混合的膠體懸浮液。在冷凍干燥時升華時的要點，升華時所需的熱量由加熱設備(通過擱板)提供。從擱板傳來的熱量由下列途徑至產品的升華界面：1.由玻璃瓶底與擱板接觸部位傳到玻璃瓶底，穿過瓶底和產品的凍結部分到達升華界面；2.上擱板的下表面和下擱板的上表面向玻璃瓶及產品干燥層上表面輻射，再通過玻璃瓶壁及凍結層或已干燥層的導熱到達升華界面；3.通過擱板與玻璃瓶外表面問殘存氣體的對流，由于傳熱中必需有傳熱溫差，各段傳熱溫

藥液在凍干后出現的常見問題及凍干工藝優化2020/08/08

藥液在凍干前分裝，方便、準確，可實現連續化生產，且在低溫凍干過程中微生物和酶的作用幾乎不進行，可較好保持被凍干藥物的性狀，凍干的藥物大多疏松多孔，脫水*藥物可以進行長時間的貯存，而且容易重新吸收水分和恢復活性。藥液在冷凍干燥后會出現的一些常見問題及解決方法，如凍干產品出現萎縮、塌陷、空洞、硬殼、灰散或形成不定形結構等現象，有以下幾種原因:1.產品干燥不*，殘存冰晶，出箱后，產品的溫度、壓力均處于共熔點以上，冰晶融化，水被周圍已干燥的物質吸收，使得產品出現空洞、萎縮。解決方法:可能是由于干燥時間不

溶液凍干時的要素及冷凍干燥過程2020/08/08

溶液凍干時的關鍵要素如確定處方，處方包括：活性成分；賦形劑；工藝用水。溶液的組成關系到冷凍、升華等步驟的實施。如凍干工藝曲線的設定，包括過冷的程度；結晶的程度；崩解溫度或共晶溫度；亞穩狀態間隙物質的相變化；溶液的結晶熱；間隙物質的熔化溫度。溶液凍干過程分為以下幾個步驟：1.預凍是將溶液中的水固化，防止抽空干燥時起泡、濃縮、收縮和溶質移動等不可逆的變化。溶液在凍結過程中，需過冷到冰點以下，其內產生晶核以后，水開始結晶，同時放出結晶熱，使其溫度上升到冰點，隨著晶體的生長，溶液濃度增加，當濃度到達共晶

凍干工藝及優化-蛋白2020/08/07

冷凍干燥作為蛋白類藥物干燥常用的方法，能保持蛋白類藥物的活性，干燥后能保持原形，體積幾乎不變，凍干藥品疏松多孔，呈海綿狀，復水性好。藥品脫水*能長期保存。想要凍干藥品復水性好并且能長期保存，凍干工藝及優化很重要，例舉幾個方面如冷凍干燥過程中凍結中形成的冰晶形態和大小以及玻璃化程度不光影響干燥效率，還影響凍干藥品的質量。在凍結過程中要考慮配方、凍結速率、凍結方式以及是否退火等問題。配方中如果固體含量少于2%，藥品的性能就會不穩定，尤其在干燥過程中，藥品微粒不能粘在基質上，溢出的水蒸汽會把微粒帶到小

熒光PCR凍干保護劑-甘氨酸2020/08/03

甘氨酸又名氨基乙酸，是結構簡單的氨基酸，其甜度為蔗糖的0.8倍，廣泛應用于醫藥、食品、飼料、電鍍、有機合成等領域。在藥物制劑中的應用甘氨酸作為蛋白穩定劑，在生物制品中得到廣泛的應用，如人白細胞干擾素口含片、液體干擾素制劑，也可作為凍干制劑的骨架成分，混懸劑的穩定劑。甘氨酸經常用作凍干蛋白質制劑的填充劑。甘氨酸在用作填充劑時具有優勢，因為它是無毒的。它具有高共晶/共熔溫度(Teu)，可實現高效冷凍干燥和高溶解度。甘氨酸對特定蛋白質藥物如LDH和轉化生長因子-b1具有穩定作用，其穩定效果取決于其濃度

實時熒光定量PCR的方法2020/07/28

實時熒光定量PCR技術，是指在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程，后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的方法有實時熒光PCR一步法與實時熒光PCR兩步法。一步法與兩步法有什么區別呢？一步法為反轉錄和PCR擴增在同一個管內完成。兩步法為反轉錄和PCR擴增分兩步進行，先從RAN模板反轉錄得到cDNA，得到的cDNA在進行一次或多次不同的PCR反應。一步法與兩步法有那些優點呢？一步法:快速,簡便,敏感,減少污染機會,減少了RNA二級結構,聚合

熒光PCR凍干-DTT2020/07/27

二硫蘇糖醇（簡稱為DTT）是一種小分子有機還原劑，其還原狀態下為線性分子。DTT有什么特點？怎么保存呢？DTT是一種常用還原劑，有抗氧化作用，進口分裝。DTT和巰基乙醇相比，DTT的刺激性氣味要小很多，毒性也比巰基乙醇低很多。另外DTT比巰基乙醇的濃度低7倍時，兩者效果相近。DTT一般保存條件為-20℃保存。1MDTT溶液可以在-20℃保存2年以上。由于容易被空氣氧化，DTT的穩定性較差;但冷凍保存或在惰性氣體中處理能夠延長它的使用壽命。DTT作為PCR的添加劑與DMSO、甜菜堿、BSA混合配制

熒光PCR凍干保護劑-牛血清白蛋白2020/07/26

牛血清白蛋白是牛血清中的一種球蛋白。牛血清白蛋白在生化實驗中有廣泛的應用。牛血清白蛋白一般做為穩定劑被用于限制酶或者修飾酶的保存溶液和反應液中，因為有些酶在低濃度下不穩定或活性低。加入牛血清白蛋白后起到“保護”或“載體”作用，不少酶類添加牛血清白蛋白后能使其活性大幅度提高。在37℃，酶切反應超過1h時，牛血清白蛋白可以使酶更加穩定。牛血清白蛋白可以結合緩沖液或底物DNA中抑制限制性內切酶活性的金屬離子和其它化學物質。牛血清白蛋白在熒光PCR凍干時常作為凍干保護劑使用，其中與甘油、海藻糖、DTT、

熒光PCR凍干-吐溫2020/07/25

吐溫溶于水，容易分散。按結構式中R不同，分為吐溫20、吐溫40、吐溫80和吐溫85等種類。由司班分子中殘余的羥基與氧化乙烯縮合而成。主要用作乳化劑，色層分析固定液。吐溫的應用例如吐溫80在水、乙醇、甲醇或醋酸乙酯中易溶，在礦物油中極微溶解。應用于注射液及口服液的增溶劑或乳化劑；膠囊劑用分散劑；軟膏劑用乳化劑和基質，栓劑用基質等。例如吐溫20在實時熒光PCR反應緩沖液的應用，反應緩沖液包括這些原料如三羥甲基氨基甲烷?鹽酸緩沖液、氯化鎂、硫酸銨、二甲基亞砜、脫氧核糖核苷三磷酸、甘油、牛血清蛋白、吐溫

熒光PCR凍干保護劑-PEG2020/07/24

聚乙二醇（PEG）是親水性高分子物質，可作為增塑劑以改變聚合物的物理機械性質，使其更具柔順性、塑性。聚乙二醇可作為增塑劑、潛溶劑、注射用溶劑、半極性溶劑、抗粘劑、潤濕劑。聚乙二醇在化妝品工業和制藥工業中的應用很廣泛。聚乙二醇有哪些作用呢？1、由于聚乙二醇具有水溶性、不揮發性、生理惰性、溫和性等可選取不同相對分子質量級分的聚乙二醇改變制品的粘度、吸濕性和組織結構。2、在清洗劑中，聚乙二醇也用作懸浮劑和增稠劑。3、聚乙二醇廣泛用于多種藥物制劑，如注射劑、局部用制劑、眼用制劑、口服和直腸用制劑。4、聚

熒光PCR凍干保護劑-甘油2020/07/23

甘油又叫丙三醇，為無色透明的粘稠狀液體，吸水性強，能從空氣中吸取水分，可以任意比例與水乙醇相混合，不溶于笨、四氯化碳和二氧化碳等有機溶劑，不溶于油脂。甘油在醫藥領域主要用于抗菌防腐劑、柔和劑、保濕劑、增塑劑、溶劑、甜味劑等。在制劑生產中使用甘油需注意因甘油為高熱可燃性有機物，與強氧化劑混合可能發生劇烈的反應甚至爆炸。另外在使用甘油生產制劑時，一定要確保沒有鐵污染物摻雜在其中，否則會導致甘油與苯酚、水楊酸、丹尼酸的混合物顏色變黑，從而影響藥品的質量。熒光PCR凍干反應液中甘油的濃度為高濃度時會有起

實驗室凍干機使用時需注意點2020/07/22

實驗室凍干機在使用時需要注意點。1.臺式凍干機要將主機放置于桌面上，真空泵放置于地面上。如果出現突然停電時，二者的高度差能阻止真空泵返油。2.凍干機主機一般采用風冷式全封閉制冷系統，制冷劑為新型無氟制冷劑，環境溫度不要超過30℃，否則會影響制冷機正常工作。3.主機安裝時左側、右側、后面與墻壁的距離應在20公分以上，保證正常通風散熱。4.降低真空泵噪音，減輕震動，可以在真空泵下面墊一些軟性泡沫板、紙板等。5.操作過程中不要頻繁開關，如果因為錯誤操作造成制冷機停止運轉，不要馬上啟動，等待二十分鐘后在