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優誓(北京)生物技術有限公司
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體外診斷試劑之生物芯片2020/07/21
生物芯片主要包括DNA芯片、蛋白芯片、組織芯片和細胞芯片等。生物芯片診斷試劑產品基本可分成二個部分,一部分是芯片,另一部分檢測用工作液。生物芯片工作液配制包括:1.芯片生產所需試劑,包括細胞培養基,探針制備試劑,陣列制作和固定試劑等。2.樣品處理試劑,芯片檢測靶分子分為核酸和蛋白質。檢測核酸的樣品處理試劑包括臨床取樣,DNA提取或RNA提取試劑,逆轉錄試劑,PCR擴增試劑,核酸標記試劑等;檢測蛋白的處理試劑包括取樣試劑,蛋白稀釋液以及特殊試劑等。3.反應液:檢測核酸時的反應液包括預雜交液,雜交液
熒光PCR凍干試劑形式及要點2020/07/19
熒光PCR凍干試劑研發要點:1.倉儲溫度設計。2.凍干保護劑篩選。3.容器設計。4.生產環境設計、設備設計。熒光PCR凍干試劑形式有西林瓶凍干,八連管凍干,凍干微芯等。下面簡單的介紹一下凍干微芯的優點。能準確定量,單人單份,產品使用方便,可實現特殊工藝處理,防止吸潮,對包材沒有要求,可以分裝到八連管、微流控芯片、各種生物芯片、卡、流式管、96孔板等包材里,而且可以實現常溫儲存。熒光PCR凍干試劑的凍干機技術要點:1.完整的PAT控制技術,可對凍干過程進行完整的控制和分析監控。包括預凍全過程控制、
實時熒光定量PCR標準品稀釋法2020/07/19
實時熒光定量PCR是在常規PCR基礎上加入熒光標記探針或相應的熒光染料,利用熒光信號積累對PCR反應的過程,進行實時監控實現起始模板的準確定量。實時熒光定量PCR標準品梯度稀釋方法依次是選擇目標、提取/PCR、純化、測試濃度、調整濃度、梯度稀釋。一般CT值在18-30之間,覆蓋全部樣品濃度區間。和大家在分享一下10倍連續梯度稀釋方法:1V原液(標準品為i)+9V稀釋緩沖液,得到標準品為ii。1V標準品ii+9V稀釋緩沖液,得到標準品為iii,1V標準品iii+9V稀釋緩沖液,得到標準品為iv,1
熒光PCR之常用探針2020/07/18
熒光PCR技術擁有特異性強、靈敏度高、重復性好、定量準確、速度快、全封閉反應等優點,已成為了分子生物學研究的重要工具。常用的探針有全基因組核酸探針、克隆探針、寡核苷酸探針、單鏈RNA探針、cDNA探針、蛋白質探針以及酶探針。常用的幾種探針都有各自的優點。例如酶探針中,分子信標核酶探針常用,優點是設計及操作簡單,能準確靈敏地反應核酶切割反應過程,為核酶篩選及切割動力學研究提供直接依據。例如RNA探針一般都是單鏈,具有許多DNA單鏈探針所沒有的優點,主要是:RNA:DNA雜交體比DNA:DNA雜交體
實時熒光定量PCR實驗時的注意事項2020/07/17
實時熒光定量PCR實驗需要先制備混合反應液,大劑量包裝的反應試劑,使用前進行分裝,盡量減少試劑的反復凍融。建議所有樣本要有三個重復。實驗操作過程時需注意以下幾點,有利于避免實驗污染問題。1.用稀釋的漂白劑或凈化劑擦拭凈化臺。2.在的配有紫外燈超凈式或者超靜臺中準備樣品,理想的是樣品的準備與PCR的擴增分開在不同的區域完成。3.在樣品制備和配制反應過程中要勤換手頭。4.勤用稀釋的漂白劑擦拭移液器。5.只使用PCR級的水和PCR試劑進行PCR實驗。5.用帶旋蓋的EP管稀釋和配制反應液。6.在進行PC
熒光PCR實驗的關鍵步驟2020/07/16
熒光定量PCR實驗時所需的耗材有八連管,光學級八連管蓋子,光學級96孔板封膜,96孔板等。熒光定量PCR實驗過程分為RAN的提取,反轉錄,熒光定量PCR反應,數據分析。做熒光定量PCR實驗有幾個關鍵步驟需要注意1.應有合適數目的生物學重復及正確的對照樣品設置2.樣品的獲得應按照實驗流程中對采樣,處理和保存的要求及確保重復性并減小重復樣品間的標準偏差。3對RAN的純度和完整性進行質量控制。4.將總RAN反轉錄成cDNA的反轉錄反應。5.試驗中正確的引物設計,引物退火溫度確定,基因擴增效率摸索。6.
多重熒光PCR2020/07/14
多重熒光PCR也叫多重引物熒光PCR,主要用于多種病院微生物的同時檢測或鑒定某些病原微生物、某些遺傳病。其優點是解決不同類型的核酸,需要多次擴增的情況,不僅節省了時間,還節約了耗材成本。并且多重熒光PCR試劑凍干后,方便運輸,穩定性好。多重熒光PCR的原理是在同一PCR反應體系里加上兩對以上的引物、探針,從而對兩種或兩種以上的不同核酸片段進行PCR擴增。目前,基于熒光探針的多重熒光PCR試劑基本都是對同一種類型的核酸進行檢測,如都針對DNA類的核酸或都針對RNA類的核酸。在做多重熒光PCR試劑凍
熒光定量PCR凍干保護劑的篩選及優化2020/07/13
在做熒光定量PCR凍干時,先要對凍干保護劑進行篩選,可采用的凍干保護劑(大加注量)包含:5wt.%的甘油、100mg/mL的海藻糖、5mmol/L的DTT、1wt.%牛血清白蛋白、0.3wt.%Proclin300、1wt.%甲酰胺等。篩選完凍干保護劑后需要進行優化,舉個例子講一下凍干保護劑的優化。先將各種凍干保護劑稀釋成多組不同的濃度,與配置好的反應試劑混勻,然后進行無菌分裝,200ul的8連管中,每管加入20ul。凍干后根據凍干樣品的性質進行評價。Pilot7-12T凍干機應用于醫療,涉及產
PCR試劑凍干過程2020/07/12
PCR技術是一種在體外模擬DNA復制過程的核酸過程技術。PCR技術應用于不對稱PCR制備單鏈DNA,反向PCR測定未知DNA區域,反轉錄PCR,cDNA末端快增技術等,PCR試劑包括:1.各種提取dna的常用試劑和純化dna所用的試劑。2.PCRtaq酶,dntp(四種堿基),緩沖試劑(buffer),引物。3.瓊脂糖,聚丙烯酰胺凝膠,aps,tmed,eb等。在做其中一類PCR試劑凍干時,先將裝有PCR試劑的西林瓶放入凍干機倉內,預凍要大約經過40-60分鐘,隔板溫度大約降到-50℃左右,預凍
實驗室凍干機操作法之開機操作2020/07/06
實驗室凍干機操作簡單易懂,即使是沒有使用過凍干機也能很快掌握操作法。下面簡單介紹下實驗室凍干機FD-2C開機操作法。開機操作時,先要連接好總電源線,打開后側的總電源開關,這時顯示窗開始顯示冷阱溫度。在按一下制冷機開關,制冷機開始運轉,此儀器為雙極制冷,需要注意的是大約20分鐘后第二極制冷開始運轉。為使冷阱具有充分吸附水的能力,在第二極制冷運轉后,預冷時間要不少于30分鐘。在按一下真空計開關,真空度顯示為999。預冷結束后,將準備好的制品置于物料盤中,在將有機玻璃筒罩上。這時按下快速充氣閥上的按片
凍干制品的關鍵屬性2020/07/02
凍干制品的關鍵屬性影響著整個凍干過程。凍干質量參數是否能達成,是由關鍵屬性決定的。凍干制品關鍵屬性:物理性質包括粒徑、形態、粒徑分布、不同PH值下的溶解度、含水率值、外觀要求、吸濕性、共熔點、共晶點、玻璃態轉換溫區、塌陷溫區、倉儲玻璃態轉換溫區、晶型等。化學性質包括酸堿解離常數、對酸堿光照氧濕熱等的穩定性。生物性質包括不同PH值對活性影響、不同升降溫速率對活性影響、倉儲溫度對活性影響、油水分配系數、膜通透性、生物利用度及常用輔料活性保持值。凍干研發項目涉及面廣且復雜,博醫康凍干技術將從應用開發技
實驗室凍干機之鐘罩凍干機2020/06/29
實驗室凍干機之鐘罩凍干機,一般在大學實驗室,科研研究所等使用較多。其優點是體積較小,預算成本低,性能穩定,可滿足實驗要求。適合凍干水溶性溶液、懸濁液或糊狀物質,共晶點溫度高于-20℃。根據不同類型的凍干制品選擇適用的鐘罩凍干機。如選用不銹鋼盤可凍干散裝物料,與帶壓蓋的有機玻璃干燥室組合可凍干西林瓶,與帶掛瓶的有機玻璃干燥時組合可凍干在燒瓶內的樣品,與T型架附件組合可凍干安瓿瓶。鐘罩凍干機FD-1A-50特點:臺式設計,緊湊,占用臺面小。外形美觀,人體工學設計,操作方便。品牌全封閉壓縮機,高效可靠
實驗室凍干機真空度排除法2020/06/22
實驗室凍干機真空度達不到指標的故障排除法:1檢查放氣閥是否關緊,可在抽氣過程中反復開、關該閥,讓外界空氣吹沖閥孔,吹除閥內可能有的雜質,從而保證閥的密封。2真空泵與主機之間由真空管連接,檢查連接處的卡箍是否擰緊,右側抽氣口的不銹鋼接頭,要順時針方向擰緊。3檢查玻璃罩底面是否光潔平整,橡膠密封圈是否破損,在真空泵開始工作的時候,用力下壓玻璃罩一會,有利于密封。4檢查真空泵油質量,從視油鏡觀察泵油是否渾濁或混入雜質,一般情況下連續工作200小時,就需要更換真空泵油。實驗室凍干機FD-1A-80特點:
實驗室凍干機裝載物料須知2020/06/19
實驗室凍干機一般配置分為主機、真空泵、凍干倉、真空管、物料盤、外掛瓶等。根據裝載物料的不同形式分為普通型、壓塞型,多岐管型、多岐管壓塞型、T型多岐管型。凍干前需要知道五種不同類型的實驗室凍干機裝載物料的量,如FD-2系列實驗室凍干機普通型的物料干燥盤直徑24mm,共6層,可放置物料約1800ml(物料厚10mm)或者放置直徑22mm的瓶子大約384只。壓塞型的物料干燥盤直徑為170mm共3層,可放置物料約650ml(物料厚10mm),或者放置直徑22mm的瓶子大約135只。多岐管型配置8個橡膠閥
怎樣選用實驗室凍干機2020/06/17
實驗室凍干機從外形上可分為臺式和立式,例如博醫康FD系列凍干機的臺式凍干機和立式凍干機一般冷阱溫度為-50℃,-85℃或-110℃。捕水能力一般為3L-6L/24H,真空度一般為<10Pa,凍干面積一般為0.08㎡-0.8㎡之間。按照凍干不同種類制品又可分為普通型,壓塞型,掛瓶普通型,掛瓶壓塞型,多岐管型。凍干散裝物料可選普通型,裝載西林瓶物料可選壓塞型,裝載外掛瓶物料可選掛瓶普通型,如果是裝載散裝物料,瓶裝物料,外掛瓶物料需選掛瓶壓塞型,裝載外掛瓶及安瓿瓶物料可選多岐管型。五種類型凍干機的共晶
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