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實時熒光定量PCR實驗時的注意事項

來源:優(yōu)誓(北京)生物技術有限公司   2020年07月17日 08:50  

實時熒光定量PCR實驗需要先制備混合反應液,大劑量包裝的反應試劑,使用前進行分裝,盡量減少試劑的反復凍融。建議所有樣本要有三個重復。實驗操作過程時需注意以下幾點,有利于避免實驗污染問題。1.用稀釋的漂白劑或凈化劑擦拭凈化臺。2.在的配有紫外燈超凈式或者超靜臺中準備樣品,理想的是樣品的準備與PCR的擴增分開在不同的區(qū)域完成。3.在樣品制備和配制反應過程中要勤換手頭。4.勤用稀釋的漂白劑擦拭移液器。5.只使用PCR級的水和PCR試劑進行PCR實驗。5. 用帶旋蓋的 EP 管稀釋和配制反應液。6. 在進行 PCR 實驗時,還應準備一個無模板的對照來驗證有無污染發(fā)生,而且用熱啟動酶防止反應開始之前的非特異性擴增。在選擇適合做熒光定量PCR試劑凍干的凍干機時,,要具有完整的PAT控制技術,可對凍干過程進行完整的控制和分析監(jiān)控。包括預凍全過程控制、預凍結束判定、升華全過程控制、升華結束判定、解析全過程控制及凍干結束判定。板層溫度均一度±1℃。系統(tǒng)極限真空度±1Pa。系統(tǒng)真空泄露率<3Pa.L/S。外界干擾熱量屏蔽。共晶點測試儀助力工藝開發(fā)。全進口配件。建議提高熒光PCR凍干的相關性。

型號Pilot3-6T Pilot5-8T Pilot7-12T Pilot10-15T
凍干面積0.42㎡0.56㎡0.84㎡1.05㎡
∅22西林瓶裝量(20ML)≥900支≥1170支≥1500支≥2100支
∅16西林瓶裝量(5ML)≥1700支≥2210支≥3100支≥4100支
冷阱溫度(空載)-85℃
真空度(空載)≤1Pa
板層溫度(空載)-55℃
板層制冷方式硅油循環(huán)
板層數(shù)量3+14+14+15+1
板層尺寸(mm)350*400350*400350*600350*600
捕水能力6L8L12L10L
凍干效率3L/24H5L/24H7L/24H10L/24H
板層間距100mm80mm90mm100mm
穿墻隔離
凍干曲線擬合度100%100%100%100%
晶型控制
蒸汽分壓控制
升華結束判定
凍干終點測試
壓塞液壓
整機尺寸 (約)W860*D1400*H1800W860*D1400*H1800W860*D1700*H1900W860*D1700*H1900

 

 

 

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