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文獻解讀 | IL-7轉(zhuǎn)基因調(diào)節(jié)CAR-T細胞抗腫瘤持久性研究2022/09/19

上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬瑞金醫(yī)院/國家轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)研究中心醫(yī)學(xué)基因組學(xué)國家重點實驗室團隊在Nature旗下綜合性科學(xué)期刊ScientificReports發(fā)表文章“TransgenicexpressionofIL?7regulatesCAR?Tcellmetabolismａndenhancesinvivopersistenceagainsttumorcells”，發(fā)現(xiàn)在CAR結(jié)構(gòu)設(shè)計中引入IL-7，增強了CAR-T細胞的持久性，并誘導(dǎo)CAR-T細胞治療后的持久緩解。研究背景CAR-T細胞治療已成為一種

瑋馳小課堂丨生物制藥行業(yè)如何快速識別離子鹽？2022/09/15

客戶需求生物制藥公司在生產(chǎn)過程中需要使用離子鹽類原料。按照要求，每一個包裝袋內(nèi)的樣品均需要進行檢查。使用標(biāo)準(zhǔn)濕化學(xué)法檢測，是一個繁瑣且昂貴的過程：分析耗時長，需要進行原料分裝、取樣、實驗室檢測等多個流程；工作量大，檢測成本高，需要耗費人力、物力和時間成本；存在污染樣品的風(fēng)險。這一問題急需解決。圖1氯化鈉原料（氯化鈉外包裝為編織袋，內(nèi)包裝為聚乙烯塑料袋）探索發(fā)現(xiàn)更快速簡便的原料鑒別方法，一直是分析研究者所不斷追求的方向，離子鹽分析儀器的問世無疑極大程度上加速了這一發(fā)展。離子鹽分析儀器2019年，賽

新品——賽橋Gentle Trans 全封閉自動液體轉(zhuǎn)移小助手2022/09/13

聽說你還在用注射器或者移液器頻繁進行大體積轉(zhuǎn)液？耗時費力還有污染風(fēng)險。別再這樣操作了！GentleTrans小助手輕松幫你解決難題。從瓶到袋，從袋到瓶，只要你需要，轉(zhuǎn)液就會很簡單。GentleTrans自動轉(zhuǎn)液儀是賽橋生物新的一款用于不同容器間自動液體轉(zhuǎn)液設(shè)備，可兼容袋裝、瓶裝試劑，培養(yǎng)瓶液體的轉(zhuǎn)移，速度快通量高，實現(xiàn)自動化全封閉不同容器之間液體轉(zhuǎn)移。四個場景都要用GentleTrans自動轉(zhuǎn)液儀培養(yǎng)基轉(zhuǎn)液：瓶裝培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移到大體積細胞培養(yǎng)袋試劑分裝：ficoll分裝，洗液分裝，凍存液分裝細胞收獲

瑋馳分享丨操作技巧：如何降低內(nèi)毒素檢測失敗率？2022/09/08

在日常的內(nèi)毒素檢測中，我們經(jīng)常會遇到結(jié)果異常或失敗,常見為孔反應(yīng)、標(biāo)準(zhǔn)曲線失敗和CV%值超標(biāo)。今天我們來聊聊，針對以上這些，在日常的內(nèi)毒素檢測中，該怎么應(yīng)對？孔和陰性對照的失敗孔反應(yīng)是分析方法失敗常見原因之一移液過程中，避免灰塵、毛發(fā)、皮膚細胞和其他顆粒物對反應(yīng)孔造成污染；樣品準(zhǔn)備時，移液吸頭不應(yīng)經(jīng)過孔或陰性對照孔；制備標(biāo)準(zhǔn)品時，確保充分混勻，低濃度點和點有濃度差；切勿使用可能被污染的LAL試劑水制備孔；通過使用可靠廠商的試劑耗材，進一步降低污染的可能性。標(biāo)準(zhǔn)曲線和陽性對照的失敗這類實驗的失敗通

瑋馳小課堂丨培養(yǎng)基快速鑒別神器——賽默飛手持拉曼應(yīng)用介紹2022/09/02

隨著藥品受生產(chǎn)過程的監(jiān)管越來越嚴(yán)格，培養(yǎng)基作為生物藥生產(chǎn)關(guān)鍵原材料，其主要成分必須得到明確，然而培養(yǎng)基組分的復(fù)雜性以及不同培養(yǎng)基之間的組份相似性給培養(yǎng)基的鑒別帶來了極大挑戰(zhàn)。在檢測過程中常常會遇到以下問題檢測成本高，分析耗時長，需要進行原料分裝、取樣、實驗室檢測等多個流程。需要“打開包裝”，打開容器會使培養(yǎng)基暴露，接觸到空氣中的水分和潛在微生物污染，這會極大地影響產(chǎn)量、效力和安全。往往需要提前知道配方信息（可能無法獲得）。探索發(fā)現(xiàn)更快速簡便的原料鑒別方法，一直是分析研究者所不斷追求的方向，對培養(yǎng)

瑋馳分享丨快速了解“單細胞技術(shù)”與“傳統(tǒng)流式技術(shù)”檢測胞內(nèi)蛋白的區(qū)別2022/08/30

IsoPlexis的單細胞蛋白組技術(shù)不僅可以“向外看”---檢測培養(yǎng)單個細胞胞外分泌的細胞因子；也可以“向內(nèi)看”---檢測單細胞水平胞內(nèi)蛋白。使用細胞內(nèi)蛋白組學(xué)相關(guān)panel可以在幾天內(nèi)揭示腫瘤靶向治療中信號通路變化。在腫瘤治療耐藥性研究中，研究人員經(jīng)常通過基因組研究來了解腫瘤的微環(huán)境和信號通路，但腫瘤中一些功能的適應(yīng)性變化沒有引起基因?qū)用娴母淖儯詢H憑基因組學(xué)研究很難提供腫瘤治療耐藥性機制的完整信息。單細胞胞內(nèi)蛋白組解決方案是研究腫瘤信號通路和治療耐藥性基礎(chǔ)的關(guān)鍵工具，幫助研究人員進行完整的

介紹蛋白質(zhì)定量分析的兩種分析方法2022/08/27

蛋白質(zhì)定性分析通常是指利用質(zhì)譜法進行蛋白質(zhì)鑒定和序列分析。蛋白質(zhì)定性分析分為top-down分析和bottom-up分析兩種策略。目前，bottom-up分析策略被更廣泛的應(yīng)用于蛋白質(zhì)定性分析工作。Bottom-Up（自底向上）和Top-Down（自頂向下）兩種策略“自底向上”策略是指通過分析由蛋白質(zhì)酶解生成的肽段來鑒定蛋白質(zhì)。當(dāng)應(yīng)用該策略來分析蛋白質(zhì)組混合物時，因其類似于基因組測序的，所以又被稱為白質(zhì)組學(xué)（Shot-gunProteomics)。“自頂向下”策略直接鑒定完整蛋白質(zhì)，在翻譯后修飾

為什么要對細胞進行支原體檢測？2022/08/25

支原體檢測試劑盒(MycoAlertMycoplasmaDetectionKit)定義：支原體（mycoplasma），又稱霉形體，沒有細胞壁的原核生物，為目前發(fā)現(xiàn)的小的簡單的原核生物。支原體細胞中可見的細胞器是核糖體（支原體是原核細胞，原核細胞的細胞器只有核糖體）。它對許多抗生素具有抗性，如類胸膜肺炎微生物。一、支原體污染成為細胞培養(yǎng)的重大隱患:1．研究表明，世界范圍內(nèi)超過15%的培養(yǎng)細胞都有支原體污染。2．支原體污染會對細胞造成多方面的影響，包括代謝、免疫或生化特性、生長狀況、以及細胞存活等

瑋馳分享丨基于NK細胞的免疫治療2022/08/19

前言自然殺傷（NK）細胞是起源于淋巴的細胞毒性先天免疫細胞。1973年，人們發(fā)現(xiàn)了一種非T非B淋巴細胞亞群可有效殺死被抗體識別的細胞，隨后被描述為“null”殺傷細胞。兩年后，有報道稱這種細胞能夠殺死各種類型的腫瘤細胞，并創(chuàng)造了術(shù)語“自然”殺傷細胞。NK細胞不僅在抗腫瘤反應(yīng)中發(fā)揮作用，而且在抵抗微生物感染方面也發(fā)揮作用。NK細胞表達多種激活和抑制受體，這些受體介導(dǎo)的信號之間的平衡決定了NK細胞激活的結(jié)果。NK細胞在沒有預(yù)先致敏的情況下殺死癌細胞的能力在腫瘤免疫監(jiān)測中發(fā)揮重要作用。以NK細胞為基礎(chǔ)

瑋馳小課堂丨為什么重組C因子可以代替鱟試劑用于內(nèi)毒素檢測？2022/08/18

隨著技術(shù)的，內(nèi)毒素檢測方法也從初的兔熱原檢測法（RPT）發(fā)展到鱟試劑檢測法(LAL/TAL)，再到如今的重組因子C(rFc)法，經(jīng)歷了從體內(nèi)到體外，從少量到通量，從緩慢到快速的逐步發(fā)展更替，來不斷滿足行業(yè)發(fā)展的需求。圖1內(nèi)毒素檢測方法發(fā)展史近年來，重組C因子內(nèi)毒素檢測法以其快速、簡單、非動物源等特點受到越來越多的關(guān)注，有望替代鱟試劑，成為內(nèi)毒素檢測的主要方法。我們將從4個方面論述了這一替代趨勢的必然性：從原理角度看，LAL和rFC都能用于內(nèi)毒素檢測重組生物技術(shù)的發(fā)展必然帶來檢測方法的革新對rFc

Nature深度綜述：ADC藥物發(fā)展歷程、挑戰(zhàn)和下一代發(fā)展方向2022/08/11

抗體-藥物偶聯(lián)物(ADC)由linker、payload、單克隆抗體(mAb)組成。它結(jié)合了高特異性靶向能力和強效殺傷作用的優(yōu)勢，實現(xiàn)了對癌細胞的高效殺滅，已成為抗癌藥物研發(fā)的熱點之一。自個ADC藥物Mylotarggemtuzumabozogamicin）于2000年獲得FDA批準(zhǔn)以來，截至2021年12月全球共有14款A(yù)DC藥物獲批用于血液系統(tǒng)惡性腫瘤和實體瘤，此外，目前還有100多個ADC候選者處于臨床試驗的不同階段。日前，Nature子刊signaltransductionａndtarg

西林瓶耐冷凍性實驗，溫控在-41±2℃ 斯特林超低溫冰箱滿足驗證要求2022/08/08

國家食品藥品監(jiān)督管理局《國家藥品包裝容器（材料）試行標(biāo)準(zhǔn)》中明確指出硅硼玻璃管制注射劑瓶需要耐受嚴(yán)格的耐冷凍性實驗：取本品適量，注入標(biāo)稱容量1/2的水放入冷凍箱中，溫度控制在-41℃±2℃，24h后取出，立即放入40±1℃水中，1min后取出，檢驗不得破裂。從要求中可以看出國家食品藥品監(jiān)督管理局對包材的穩(wěn)定性有嚴(yán)格的規(guī)范，對驗證的冷凍設(shè)備也有嚴(yán)苛的溫度穩(wěn)定性要求。常規(guī)的冷凍冰箱只能設(shè)置特定溫度點，比如-20℃、-40℃、-86℃等，而且溫度波動性較大，-80℃時在±10℃浮動，-40℃時在±10

PCR儀的使用要注意哪些事項2022/08/05

PCR就是利用DNA聚合酶對特定基因做體外或試管內(nèi)InVitro的合成，基本上它是利用DNA聚合酶進行專一性的連鎖復(fù)制。那么它都有哪些注意事項呢？盡管擴增序列的殘留污染大部分是假陽性反應(yīng)的原因，樣品間的交叉污染也是原因之一。因此，不僅要在進行擴增反應(yīng)是謹(jǐn)慎認(rèn)真，在樣品的收集、抽提和擴增的所有環(huán)節(jié)都應(yīng)該注意：1.戴一次性手套，若不小心濺上反應(yīng)液，立即更換手套；2.使用一次性吸頭，嚴(yán)禁與PCR產(chǎn)物分析室的吸頭混用，吸頭不要長時間暴露于空氣中，避免氣溶膠的污染；3.避免反應(yīng)液飛濺，打開反應(yīng)管時為避免此

使用多功能酶標(biāo)儀要注意這幾點要求2022/08/04

多功能酶標(biāo)儀又稱多功能微孔板檢測儀，可對以微孔板為體系的實驗提供多種不同模式的檢測。通常，多功能酶標(biāo)儀至少可提供“吸收光”、“熒光”、“發(fā)光”三種不同的檢測模式。一些中多功能酶標(biāo)儀還可完成“時間分辨熒光”、“熒光偏振”、“熒光共振能量轉(zhuǎn)移”等熒光檢測實驗。如何使用多功能酶標(biāo)儀？首先，多功能酶標(biāo)儀需要放在一個干凈、平整的工作臺上，做到防塵、防潮、防曬、防震、防撞。在使用儀器時使用符合儀器需要的電壓，電壓不穩(wěn)定的則要使用穩(wěn)壓器，使輸入酶標(biāo)儀的電壓保持穩(wěn)定。對于多功能酶標(biāo)儀使用方法通常分為4個步驟：1

簡單高效利用龍沙Nucleofector電轉(zhuǎn)技術(shù)重編程產(chǎn)生 iPSC2022/08/03

誘導(dǎo)多能干細胞(iPSC)是通過人工將干細胞特異性轉(zhuǎn)錄因子引入預(yù)成熟或成熟的體細胞，從已經(jīng)分化的細胞類型中衍生的多能干細胞。由于其類似ESC的功能，iPSC已經(jīng)作為許多發(fā)育或疾病相關(guān)應(yīng)用的強大工具，幫助科學(xué)家進一步確定發(fā)展機制或疾病發(fā)病機制，或作為進行體外藥物篩選和毒性研究的新型人類疾病模型，并具有成為再生醫(yī)學(xué)新工具的巨大潛力。科學(xué)家通過病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)或非病毒轉(zhuǎn)染將干細胞特異性轉(zhuǎn)錄因子引入原代體細胞中，可以簡單地在實驗室中產(chǎn)生誘導(dǎo)的PSC。不同組合中使用的典型重編程因子是Oct4，Sox2，Klf4，

細胞轉(zhuǎn)染可分為瞬時轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染2022/08/03

細胞轉(zhuǎn)染是指將外源分子（如DNA，RNA等）導(dǎo)入（真核）細胞的實驗技術(shù)之一。隨著分子生物學(xué)和細胞生物學(xué)研究的不斷發(fā)展，轉(zhuǎn)染已經(jīng)成為研究和控制真核細胞基因功能的常規(guī)工具。細胞轉(zhuǎn)染可分為瞬時轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染，瞬時轉(zhuǎn)染指外源DNA/RNA不整合到宿主染色體中,通常只持續(xù)幾天，在轉(zhuǎn)染后24-72小時內(nèi)分析結(jié)果，多用于啟動子和其他調(diào)控元件的分析。穩(wěn)定轉(zhuǎn)染指外緣DNA既可以整合到宿主染色體中。通常需要通過一些選擇性標(biāo)記來篩選以得到穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的細胞系。根據(jù)轉(zhuǎn)染方法可以分為物理介導(dǎo)、化學(xué)介導(dǎo)和生物介導(dǎo)。我們常用的細

如何提高細胞轉(zhuǎn)染的轉(zhuǎn)染效率2022/08/02

細胞核轉(zhuǎn)染系統(tǒng)可用于免疫細胞、干細胞、神經(jīng)細胞、內(nèi)皮細胞等較難轉(zhuǎn)染的原代細胞和各類細胞系中，其不依賴于病毒感染、不依賴于細胞有絲分裂，可加快基因表達，已成功轉(zhuǎn)染1200余種細胞系、130余種原代細胞，多數(shù)細胞系轉(zhuǎn)染效率可高達50-70%，部分原代細胞轉(zhuǎn)染效率可超過90%。目前，LONZA4D-Nucleofector已應(yīng)用于CAR-T細胞的研究中。轉(zhuǎn)染效率高，在經(jīng)典的電穿孔技術(shù)上，配合高效率細胞轉(zhuǎn)染液，可實現(xiàn)無語倫比的細胞轉(zhuǎn)染效率，尤其是針對一些原代細胞、干細胞和難轉(zhuǎn)染的細胞系。可達99%，低在

瑋馳小課堂丨終用在臨床的細胞復(fù)蘇儀怎么選？Barkey來支招2022/08/02

隨著細胞治療藥物向GMP商業(yè)化生產(chǎn)的過度，再到臨床患者靜脈注射前關(guān)鍵的一步為解凍復(fù)蘇工藝，復(fù)蘇過程的標(biāo)準(zhǔn)化直接影響到細胞復(fù)蘇后活率工藝一致性。細胞治療藥物是有活力的細胞，細胞在回輸前，需要從-196℃的液氮環(huán)境中快速回溫37℃，然后再回輸給人體。為滿足細胞治療藥物復(fù)蘇工藝的一致性，細胞復(fù)蘇設(shè)備的選擇尤為重要。細胞治療市場迫切需要一款既符合醫(yī)療器械的管理要求，同時有簡便的標(biāo)準(zhǔn)操作流程，以及信息化數(shù)據(jù)管理的復(fù)蘇設(shè)備，以細胞治療藥物從研發(fā)到生產(chǎn)臨床順利回輸給病人。BarkeyPlasmatherm無水

提高手持式近紅外光譜儀的使用效率要注意哪些2022/08/02

手持式近紅外光譜儀是利用物質(zhì)對不同波長的紅外輻射的吸收特性，進行一系列精密分析的儀器。手持式近紅外光譜儀各項性能穩(wěn)定，數(shù)據(jù)具有良好再現(xiàn)性；功能齊全的化學(xué)計量學(xué)軟件；很好的支持建立模型和分析；并適用范圍足夠?qū)挼哪Ｐ汀Ｊ殖质浇t外光譜儀在使用過程中需要注意以下幾個事項：一、注意要符合規(guī)定的環(huán)境條件來使用，值得相信的紅外光譜儀廠家提醒要注意實驗室的溫度以及相對濕度都應(yīng)該在標(biāo)準(zhǔn)范圍以內(nèi)，所用電源應(yīng)配備有穩(wěn)壓裝置和接地線。為了更好的把關(guān)這些條件，紅外實驗室的面積不要太大，能放得下必須的儀器設(shè)備即可，但室內(nèi)

應(yīng)用案例 | 為什么支原體快檢要選 Lonza MycoAlert2022/08/01

細胞培養(yǎng)在科研和生物制藥中被廣泛應(yīng)用，支原體污染問題頻繁出現(xiàn)，污染會影響細胞的生長、形態(tài)、生化特點和遺傳特征。因此，為了提高生物制品的有效性和安全性，各國監(jiān)管機構(gòu)和法規(guī)都建議使用適當(dāng)?shù)臋z測方法對細胞進行檢測，以確保使用的細胞無支原體污染。迄今為止，已經(jīng)有多種支原體檢測方法，包括培養(yǎng)法、指示細胞法、基于核酸擴增（NAT）的方法和基于酶促反應(yīng)的方法（生化法），每種方法都有各自的特點和應(yīng)用范圍。培養(yǎng)法作為經(jīng)典方法，通過有無支原體生長進行判斷，直接，但是檢測時間是一個的挑戰(zhàn)；指示細胞法檢測時間稍微有所縮