細(xì)胞轉(zhuǎn)染可分為瞬時轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染
細(xì)胞轉(zhuǎn)染是指將外源分子(如DNA,RNA等)導(dǎo)入(真核)細(xì)胞的實驗技術(shù)之一。隨著分子生物學(xué)和細(xì)胞生物學(xué)研究的不斷發(fā)展,轉(zhuǎn)染已經(jīng)成為研究和控制真核細(xì)胞基因功能的常規(guī)工具。
細(xì)胞轉(zhuǎn)染可分為瞬時轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染,
瞬時轉(zhuǎn)染指外源DNA/RNA不整合到宿主染色體中,通常只持續(xù)幾天,在轉(zhuǎn)染后24-72小時內(nèi)分析結(jié)果,多用于啟動子和其他調(diào)控元件的分析。
穩(wěn)定轉(zhuǎn)染指外緣DNA既可以整合到宿主染色體中。通常需要通過一些選擇性標(biāo)記來篩選以得到穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的細(xì)胞系。根據(jù)轉(zhuǎn)染方法可以分為物理介導(dǎo)、化學(xué)介導(dǎo)和生物介導(dǎo)。
我們常用的細(xì)胞轉(zhuǎn)染方法有電穿孔法、顯微注射、脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染,磷酸鈣共沉淀法、原生質(zhì)體轉(zhuǎn)染、病毒介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染。
4D-Nucleofector細(xì)胞核轉(zhuǎn)染包含兩個溶液:Nucleofector溶液和添加劑。兩者都是針對每個細(xì)胞類型來特異開發(fā)的。它們在核轉(zhuǎn)染過程中提供了細(xì)胞友好的環(huán)境,支持DNA直接到達(dá)細(xì)胞核。Nucleofector溶液只與Nucleofector裝置共同使用時,才能發(fā)揮作用。
在Nucleofector核酸轉(zhuǎn)染儀的幫助下,您可以在腫瘤研究、免疫學(xué)、組織工程學(xué)及心血管疾病研究領(lǐng)域中輕而易舉地獲得大于90%的高效率基因轉(zhuǎn)染率。Nucleofector核酸轉(zhuǎn)染技術(shù)特別適用于轉(zhuǎn)染原代細(xì)胞和難以轉(zhuǎn)染的細(xì)胞系,如T細(xì)胞及PC-12細(xì)胞系等。
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