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賽爾瑞成(北京)生命科學技術有限公司
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重組人Flt3配體在哪些組織中可以表達2021/05/22
重組人Flt3配體屬于Ⅲ型受體酪氨酸激酶家族成員。該家族的成員還包括c-KIT受體、血小板源生長因子受體和c-FMS受體等,該家族各成員的基因間具有較高的同源性。FLTS含有5個免疫球蛋白楊結構組成的胞外配體結合區,1個跨膜結構域,1個胞內近膜結構域,2個被插入結構域分開的激酶結構域和一個C端-結構域。重組人Flt3配體在肝臟、脾臟、淋巴、腦、胎盤等組織中均有表達,在造血干細胞、前提B細胞、樹突狀細胞的增殖、分化和凋亡中起重要作用。另外,研究發現急性髓系白血病的發病往往伴隨著FLT3的異常活化,
重組人Flt3L表達出來的蛋白為什么比實際要小2021/05/10
重組人Flt3L是一種膜蛋白,能夠刺激早期造血的細胞因子。在體、離體試驗均證實,可調節非紅系造血干/祖細胞的增殖和分化,與多種細胞因子協同,可促進前B淋巴細胞、樹突狀細胞、自然殺傷細胞、細胞毒T淋巴細胞的增殖、分化和成熟,從而具有重要的抗腫瘤作用。本產品由真核細胞表達的重組蛋白,是將蛋白基因接入穩定表達載體,轉化CHO-K1細胞,經克隆篩選,質量驗證,挑選的穩定表達株,由化學成分確定的培養基發酵制備,工藝穩定,保證了產品質量及批次間的一致性。重組人Flt3L表達出來的蛋白比實際要小是因為:1、蛋
重組人BAFF在使用時需注意的一些因素2021/04/20
重組人BAFF也稱生長因子,活性生長因子,活性細胞因子,是一類通過與特異的、高親和的細胞膜受體結合,調節細胞生長與其他細胞功能等多效應的多肽類物質。這款細胞活性因子,可有效去除細胞分泌的錯誤折疊蛋白以及細胞表面的大分子顆粒物。經濟實惠、方便快捷、逐步恢復細胞活性狀態。重組人BAFF對環境的要求很高,高濃度的生物活性因子在常溫下保存很容易失去活性,為了確保這些成分的特殊活性與功能,只能采取生物凍干工藝,在無菌環境下采用-80度的極速超低溫真空凍干技術,使生物活性因子進入休眠狀態,達到完整的保存其生
哺乳動物細胞真核表達系統的優勢有人想知道嗎2021/04/14
哺乳動物細胞真核表達系統則是通過脂質體或者是PEI的等轉染試劑在體外通過和質粒形成復合體,將質粒導入細胞后進行瞬時表達。稱為瞬時表達的原因是因為質粒在真核細胞中不能擴增。并且不斷被細胞所降解,這種表達在一定的時間后就會消失。除非質粒被整合進入細胞的基因組,通過質粒上帶的篩選標記,通過篩選得到一株穩定表達你的目的蛋白的細胞克隆。但是這種細胞克隆的表達量相比瞬時表達會非常低甚至于檢測不到。真核表達的特點是所表達的蛋白一旦表達即擁有相應的生物學活性,因此真核瞬時轉染往往用于研究單個基因在細胞中的功能。
重組人白細胞介素2主治功能和禁忌事項詳細解答2021/03/18
重組人白細胞介素2所屬藥物之一,本品是一種淋巴因子,可使細胞毒性T細胞、自然殺傷細胞和淋巴因子活化的殺傷細胞增殖,并使其殺傷活性增強,還可以促進淋巴細胞分泌抗體和干擾素,具有促進機體免疫反應等作用。重組人白細胞介素2功能主治:1.用于腎細胞癌、黑色素瘤、乳腺癌、膀胱癌、肝癌、直腸癌、淋巴癌、肺癌等惡性腫瘤的治療,用于癌性胸腹水的控制,也可以用于淋巴因子激活的殺傷細胞的培養。2.用于手術、放療及化療后的腫瘤患者的治療,可增強機體免疫功能。3.用于先天或后天免疫缺陷癥的治療,提高病人細胞免疫功能和抗
重組人干擾素α2b的作用機制和禁忌掌握了嗎2021/03/12
干擾素是一種很強大的藥劑,它被使用在醫學中的很多方面,特別是重組人干擾素,對于人體的很多疾病都有著很重大的作用。重組人干擾素α2b具有抗病毒、抗腫瘤和免疫調節作用,也是衛健委推薦的藥物之一。與機體內的細胞受體結合后,一方面誘導組織細胞分泌抗病毒蛋白,激活體內的一些酶,促使病毒mRNA降解,進而導致病毒蛋白合成受阻,抑制病毒復制;另一方面,通過促進CTL細胞增值、激活NK細胞殺傷功能、增強巨噬細胞吞噬能力,增強免疫清除能力,發揮清除病毒的作用。重組人干擾素α2b是一類具有廣譜抗病毒、抗增殖和免疫調
重組蛋白真核表達系統與原核表達系統的區別2021/03/03
重組蛋白真核表達采用原核表達系統進行研究,主要方法是將已克隆到目的基因DNA的片段的載體轉化到細菌中,通過IPTG誘導和終純化獲得所需的目的蛋白。其優點是可以在短時間內獲得基因表達產物,所需成本相對較低。目前的表達系統各有利弊,但一般理想的表達系統滿足以下幾點:一是特異性,不受其他內源性因素影響,只能通過外源性無毒物激活。二是不干擾,不干擾細胞通路。以及誘導劑的誘導性、生物利用度、可塑性和劑量依賴性。因此,在選擇表達系統時,必須充分考慮各種因素,如蛋白質性質、實驗條件、生產成本、表達水平和安全性
重組人BMP4重組蛋白和天然蛋白有什么區別2021/02/03
重組人BMP4蛋白分為凍干粉和溶液態兩種保存形式,原核細胞表達的重組蛋白為凍干粉狀態,真核細胞表達的重組蛋白為溶液態保存,這樣使得重組蛋白非常穩定,在-80℃條件下可保存數年。凍干粉在使用前需進行溶解,其中溶解的方法非常關鍵,因為溶解不好會降低蛋白的效用。溶液態保存的重組蛋白在凍融稀釋使用過程中也需要仔細注意。重組人BMP4的分泌表達優點:1、一些可被細胞內蛋白酶所降解的蛋白質分泌到周質或培養基中可增加其穩定性;2、有些在細胞內表達時無活性的蛋白分泌表達時能夠按適當的方式進行準確折疊,增加到蛋白
真核表達細胞常見表達載體有哪些2021/01/18
真核表達細胞表達產物在分子結構、理化特性和生物學功能方面更接近于天然的高等生物蛋白質分子。原核基因表達調控與真核存在很多共同之處。但因原核生物沒有細胞核,亞細胞結構及其基因組結構要比真核簡單得多。1.原核基因轉錄調節特點⑴σ因子識別特異啟動序列,不同的σ因子決定特異基因的轉錄激活,決定mRNA,rRNA和tRNA基因的轉錄。⑵除個別基因外,原核生物絕大多數基因按功能相關性成簇的串聯、密集于染色體上,共同組成一個轉錄單位——操縱子。一個操縱子只含一個啟動序列及數個可轉錄的編碼基因。2.真核細胞結構
哺乳動物瞬時表達重組蛋白服務技藝純熟,滿足制備需要2021/01/14
哺乳動物細胞自身具備蛋白折疊和翻譯后修飾的功能,其表達的重組蛋白在分子結構、理化性質和生物學功能方面接近于天然的高等生物蛋白質分子,更有可能獲得與天然分子相同的生物活性。哺乳動物瞬時表達重組蛋白服務系統能表達天然結構完整的重組蛋白,是廣泛應用的人類復雜糖基化蛋白的表達系統,生物活性接近于天然蛋白質,是活性蛋白因子及各類受體蛋白的表達系統,在生物制藥領域應用較廣,60%以上的的藥用蛋白產品由哺乳動物細胞表達系統獲得。哺乳動物細胞瞬時轉染能在短期內快速表達高活性蛋白,滿足蛋白制備的需求。哺乳動物瞬時
哺乳動物細胞真核表達系統為科學研究提供助力2021/01/06
哺乳動物細胞真核表達系統是哺乳動物細胞經過翻譯和再加工后產生的外源蛋白,在活性上遠優于原核表達系統和酵母、昆蟲細胞等真核表達系統,更接近天然蛋白。哺乳動物細胞表達系統可以提供較接近自然狀態的重組人蛋白的翻譯后修飾。在蛋白質表達過程中,會形成接近天然蛋白質的蛋白質折疊和聚合,具有活性蛋白質所必需的空間結構和修飾。哺乳動物細胞經過翻譯和再加工后產生的外源蛋白比原核表達系統和真核表達系統如酵母和昆蟲細胞要好得多,更接近天然蛋白。這一特性使得哺乳動物細胞表達系統廣泛應用于重組蛋白藥物,特別是治療性重組單
化學感受態細胞基礎操作方法2020/12/25
化學感受態細胞該菌株衍生自大腸桿菌菌株B,具有lon和ompT蛋白酶缺陷的優點,是目前應用廣泛的表達宿主菌之一,其操作方法如下:1、化學感受態細胞從-80℃拿出,迅速插入冰中,6分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA(質粒或連接產物)并用手滑動EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。2、42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰上并靜置5分鐘,晃動會降低轉化效率。3、向離心管中加入0.9mL室溫S.O.C.(S.O.C.營養豐富,可提高轉化效率)或LB培養基。4、30℃,250rpm復蘇60分鐘。當
重組人干擾素α2b用法用量,僅供參考2020/12/22
藥物是不能亂吃的,需要在醫生的指導下服用!重組人干擾素α2b又叫長生扶康,是一種微黃色或白色疏松體,溶解后為澄明液體,無肉眼可見的不溶物。重組人干擾素α2b通過肌肉或皮下注射,血液濃度達峰時間為3.5~8小時,消除半衰期為4~12小時。腎臟分解代謝為干擾素主要消除途徑,而膽汁分泌與肝臟代謝的消除是重要途徑。肌內注射或皮下注射的吸收超過80%。重組人干擾素α2b用法用量1.慢性乙型肝炎:皮下或肌內注射,3~6×106IU/日,連用四周后改為3次/周,連用16周以上。2.慢性粒細胞白血病:3~5×1
哺乳動物細胞真核表達產物接近于天然高等生物蛋白質分子2020/12/15
哺乳動物細胞真核表達系統在表達過程中有翻譯后修飾和折疊的功能,這一特點使其蛋白更接近天然蛋白,具備天然蛋白必須的空間結構和修飾,與天然蛋白有相同的生物活性,哺乳動物細胞表達系統在功能蛋白、抗體生產、臨床疫苗的研發和生產中應用較為廣泛。原核表達系統具有表達水平高、操作簡單、周期短、易于大規模高密度培養、成本低等優點,而對于全抗體和糖蛋白類生物藥物來說,表達產物多肽鏈的折疊、二硫鍵的形成、糖基化的有無以及糖基化的類型常常影響表達產物的合成分泌、生物活性、體內穩定性以及免疫原性等特性。由于原核細胞缺少
重組蛋白真核表達系統技術平臺的特色2020/12/11
重組蛋白作為生物制藥在醫學中作用顯著,一般用轉基因動物的乳腺產生。重組蛋白真核表達包括酵母表達系統、桿狀病毒-昆蟲細胞表達系統、腺病毒表達系統等。一般可以正確折疊,包含各種修改。但是價格高,周期長。重組蛋白真核表達系統技術平臺的特色快速、highly-stringent篩選:只篩選到高表達穩定株;4~5個月獲得穩定高表達細胞株(常規方法要9~12個月)高效表達:*啟動子和*分泌信號肽,很容易達到30p/c/d/以上(傳統方法需要用藥物篩選9~11輪以上才能達到)穩定表達:表達質粒上的AGE穩定子
真核細胞培養時支原體污染表現以及解決方式2020/12/08
支原體是一種特殊的微生物,在哺乳動物(包括人類)、爬行動物、昆蟲和植物中廣泛分布。它是小、較為簡單的可自我復制的原核生物,大小僅為0.2-0.8um。支原體的基因組僅為0.58-2.20Mb,其自身生物合成能力有限,因此大部分營養物質都要依賴于宿主。在真核細胞培養過程中,支原體感染發生率達到63%,因而細胞培養過程中被支原體污染是一個世界性的難題。細胞培養中常遇見的有細菌污染、真菌污染、支原體污染、病毒污染等。說起支原體污染,估計細胞培養的同學就開始犯愁了,細胞培養的老手都知道,支原體污染非常不
化學感受態細胞的規范操作方法2020/12/04
化學感受態細胞是常規克隆和亞克隆實驗應用較為合適的解決方案。經氯化鈣處理,促進質粒DNA黏附于感受態細胞膜上。將感受態細胞通過水浴熱激,使細胞膜孔打開,從而質粒可以進入。操作方法:(以下操作均按無菌條件的標準進行)1、取感受態細胞置于冰浴中,如需分裝可將剛融化細胞懸液分裝到無菌預冷的離心管中,置于冰浴中。一次轉化感受態細胞的建議用量為50-100μl,可以根據實際情況分裝使用。應注意所用DNA體積不要超過感受態細胞懸液體積的十分之一。以下實驗以100μl感受態細胞為例。2、向感受態細胞懸液中加入
不管是從應用還是制備,多克隆抗體與單克隆抗體都有很大區別2020/11/26
多克隆抗體就是用一種包含多種抗原決定簇的抗原免疫動物,刺激機體多個B細胞克隆產生針對多種抗原表位的不同抗體后,所獲得的免疫血清實際上是含有多種抗體的混合物。由一種抗原決定簇刺激機體,由一個B淋巴細胞接受該抗原刺激所產生的抗體稱之為單克隆抗體。由多種抗原決定簇刺激機體,相應地就產生各種各樣的單克隆抗體,這些單克隆抗體混雜在一起就是多克隆抗體。多克隆抗體與單克隆抗體的應用比較(1)多克隆抗體的應用一種良好的多克隆抗血清含有抗某種抗原不同表位的多種抗體。由于多克隆抗血清通常包含抗某一抗原的不同表位的抗
M15化學感受態細胞操作方法看似簡單,細節很重要2020/11/24
M15化學感受態細胞是采用大腸桿菌M15菌株經特殊工藝處理得到的感受態細胞,可用于DNA的化學轉化。它能表達lac阻遏蛋白,抑制T5強啟動子的表達。同時,pREP4還賦予宿主菌株卡那霉素抗性。pREP4是從pACYC改造而來的,含有p15A復制子。它能夠與所有帶ColE1復制起點的質粒共存。主要特點使用pUC19質粒檢測,轉化效率可達108,-80℃保存幾個月轉化效率不發生改變。recA1和endA1突變阻止對克隆DNA的修飾或對宿主菌染色DNA的重組,提高純化質粒的產量和質量。M15化學感受態
重組人白介素-11藥物副反應(一般不良反應)2020/11/18
重組人白介素-11是由造血微環境基質細胞和部分間葉細胞產生的多效性細胞因子。IL-11通過與細胞表面特異性受體-配體結合鏈IL-11Rα結合,并連接到信號傳導鏈可溶性糖蛋白130(gp130)后發揮其生物學作用,可以直接作用于骨髓巨核系祖細胞、巨噬細胞、T細胞、上皮細胞和肝細胞,具有促進巨核細胞和血小板生成、調控免疫、抗炎和保護黏膜上皮等多種功能。IL-11的促造血功能主要表現在直接刺激造血干細胞和巨核系祖細胞的增殖,誘導巨核細胞分化成熟,促進高倍性巨核細胞生成,增加單個巨核細胞血小板的產量,從
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