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上海徠同生物科技有限公司
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心血管相關(guān)疾病之高血壓模型實驗研究2021/11/29
高血壓模型實驗研究項目介紹通過微滲透泵在體灌注血管緊張素Ⅱ（AngⅡ）誘導(dǎo)高血壓血管重塑模型具有操作簡單、成功率高、易復(fù)制、穩(wěn)定可靠、造模時間短等特點，可以廣泛應(yīng)用于高血壓發(fā)病機(jī)制研究和抗高血壓藥物的篩選。C57小鼠皮下埋植微滲透泵在體灌注AngⅡ400ng/（kg·min），共28天；0,1,2,3,7,14,21和28天監(jiān)測收縮壓、舒張壓及平均動脈壓變化。案例展示
心血管動脈粥樣硬化模型研究2021/11/29
動脈粥樣硬化模型研究項目介紹ApoE基因敲除的純合小鼠（ApoE-/-）可正常存活和繁殖，當(dāng)給予適當(dāng)?shù)母咧嬍硶r，可導(dǎo)致各種高脂蛋白血癥，形成動脈粥樣硬化病變小鼠模型，該模型可為下游的藥物篩選、基因治療以及動脈粥樣硬化機(jī)理的體內(nèi)研究提供理想的試驗材料，是動脈硬化研究的常用工具。案例展示
裸鼠皮下成瘤實驗介紹2021/11/29
裸鼠腫瘤模型無胸腺裸鼠（NudeMouse，簡稱裸鼠）目前已成為醫(yī)學(xué)生物學(xué)研究領(lǐng)域中*的實驗動物模型，它是先天性胸腺缺陷的突變小鼠，裸鼠接種成活的腫瘤對化療藥物的敏感性與臨床所見十分相近。根據(jù)腫瘤細(xì)胞的特性和接種細(xì)胞的量，一般皮下成瘤的周期為1-2個月。腫瘤大小測量一般為1周兩次，游標(biāo)卡尺測量腫瘤最長和最短部位，腫瘤不宜生長過大，一般不要超過1000mm3。裸鼠腫瘤模型實驗步驟1、細(xì)胞的狀態(tài)是成瘤實驗的關(guān)鍵，所以細(xì)胞生長狀態(tài)一定要好，取處于對數(shù)生長期的細(xì)胞，細(xì)胞達(dá)80-90%左右密度為宜。收集細(xì)
原位雜交FISH實驗介紹2021/11/26
原位雜交（FISH）原位雜交原理介紹應(yīng)用熒光染料標(biāo)記探針DNA，變性成單鏈后與變性后的染色體或細(xì)胞核靶DNA按照堿基互補的原則進(jìn)行雜交，形成可被檢測的雜交雙鏈核酸，在熒光顯微鏡下觀察記錄結(jié)果。實驗步驟1.組織固定脫水//切片2.石蠟切片脫蠟至水3.消化4.預(yù)雜交5.雜交6.DAPI復(fù)染核7.鏡檢拍照結(jié)果展示實驗周期及交付標(biāo)準(zhǔn)1.實驗周期：3-5周左右2.交付標(biāo)準(zhǔn)：切片、熒光圖片、實驗報告（實驗步驟、試劑、儀器等）需確認(rèn)的信息1.目的基因及種屬2.樣本種屬及類型（細(xì)胞還是組織）3.樣本數(shù)量4.拍照
蛋白修飾位點分析介紹2021/11/26
蛋白修飾位點分析實驗原理先通過IP得到目的蛋白，再通過SDS-PAGE對目的蛋白進(jìn)行分離純化，將膠條上目的蛋白對應(yīng)的條帶切下進(jìn)行膠內(nèi)酶解和高靈敏度的液質(zhì)聯(lián)用分析(LC-MS/MS)，通過數(shù)據(jù)庫檢索得到蛋白上的修飾位點。蛋白分析的應(yīng)用1.磷酸化：信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、細(xì)胞周期、生長發(fā)育及癌癥機(jī)理等；2.糖基化：蛋白質(zhì)折疊、更新以及免疫應(yīng)答等；3.乙?；夯虮磉_(dá)調(diào)控、細(xì)胞凋亡、細(xì)胞代謝、蛋白質(zhì)穩(wěn)定性以及神經(jīng)退行性病變等；4.泛素化：細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡、轉(zhuǎn)錄調(diào)控、DNA修復(fù)以及信號轉(zhuǎn)導(dǎo)等；5.甲基化：染色質(zhì)結(jié)構(gòu)
免疫共沉淀Co-IP實驗介紹2021/11/26
免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation,Co-IP）：蛋白質(zhì)是細(xì)胞活性和功能的執(zhí)行者，且蛋白質(zhì)是依靠蛋白間相互作用執(zhí)行功能的，因而研究蛋白的相互作用對于研究細(xì)胞活性和功能、解釋生命過程和現(xiàn)象具有重要意義。實驗原理免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation，CoIP）是研究蛋白-蛋白間相互作用的經(jīng)典方法，屬于免疫沉淀技術(shù)的一類，常被用于鑒定特定蛋白復(fù)合物的中未知蛋白組分。免疫共沉淀的設(shè)計理念是，假設(shè)一種已知蛋白是某個大的蛋白復(fù)合物的組成成員，那么利用這種蛋白的特異性
細(xì)胞寄送注意事項2021/11/26
細(xì)胞寄送注意事項細(xì)胞寄送方式可選擇冷凍儲存運輸和充液法常溫運輸(1)冷凍儲存運輸：干冰運輸凍存細(xì)胞，外地寄送根據(jù)溫度和寄送時間，一般約需要5-10kg干冰。(2)充液法常溫運輸：一般選擇生長良好的細(xì)胞，以生長1/3～1/2瓶底壁為宜，去掉舊培養(yǎng)液，補充新的培養(yǎng)液至瓶頸部，保留微量空氣，擰緊瓶蓋，并用封口膜密封，放在一運送盒內(nèi)，用棉花等做防震防壓處理。運輸總時長不超過4天，運輸過程中低氣溫在0度以上，到達(dá)目的地后倒出多余的培養(yǎng)液，只需保留維持生長所需的培養(yǎng)液置37℃培養(yǎng)，次日傳代。
細(xì)胞收樣注意事項2021/11/26
客戶提供細(xì)胞需滿足以下要求：(1)需要我公司進(jìn)行傳代培養(yǎng)的細(xì)胞，需告知細(xì)胞名稱、培養(yǎng)條件等信息，目前我公司對無細(xì)胞名稱的細(xì)胞將不提供凍存服務(wù)，無培養(yǎng)條件的細(xì)胞將無法提供及時的傳代培養(yǎng)等操作，敬請知曉；(2)客戶提供的可直接進(jìn)行實驗的細(xì)胞，需保證細(xì)胞量，具體細(xì)胞量可根據(jù)實驗咨詢技術(shù)人員，流式檢測樣品需提供熒光信息；(3)寄送凍存細(xì)胞需用液氮或者干冰保存運輸；(4)寄送培養(yǎng)細(xì)胞需擰緊培養(yǎng)瓶，封口膜封好，常溫運輸，嚴(yán)禁冰凍，長途運輸需裝滿培養(yǎng)基；(5)客戶提供的細(xì)胞需保證細(xì)胞的生長狀態(tài)，細(xì)胞狀態(tài)以我公
實驗外包的優(yōu)勢有哪些2021/11/25
1.省時實驗耗時是非常多的，換句話說周期很長，占用了大量的工作及生活時間。實驗外包可以節(jié)省大量時間，可以讓SCI論文在短時間內(nèi)獲得寫作素材，讓課題迅速完成。通過實驗外包可以用有限資源完成更多的項目，不必從簡單耗時得工作做起，讓您把更多的時間投入到專業(yè)的工作中，使工作更有效率。2.省錢實驗所需的儀器太貴，買不起，借不來，如seq，芯片等。實驗外包可以節(jié)省購買儀器的成本，不會造成實驗器材得浪費?？傮w而言，實驗外包服務(wù)的價格其實比不算貴，花錢買時間是為了讓自己的時間更值錢。3.專業(yè)一些需要專業(yè)操作，或
常見實驗項目樣本收集、保存、運輸要求2021/11/25
一、分子生物學(xué)平臺1.熒光定量PCR樣本收集運輸A.細(xì)胞：a.貼壁細(xì)胞以6孔板培養(yǎng)的細(xì)胞為例，吸掉培養(yǎng)基，用PBS洗一次，吸掉PBS，加1mlTrizol，將底部細(xì)胞吹打起來，轉(zhuǎn)入1.5mlEP管，裂解細(xì)胞。-80度凍存，干冰運輸。b.懸浮細(xì)胞將培養(yǎng)基及細(xì)胞轉(zhuǎn)入1.5mLEP管，5000轉(zhuǎn)3min離心，離心完吸掉上清，加1mLTrizol，吹打混勻，裂解細(xì)胞。-80度凍存，干冰運輸。c.貼壁細(xì)胞和懸浮細(xì)胞混合將底部細(xì)胞吹打起來，轉(zhuǎn)入1.5mLEP管，5000轉(zhuǎn)3min離心，離心完吸掉上清，加1m
Western-blot樣品處理注意事項2021/11/25
樣品處理及保存1、懸浮細(xì)胞樣品：把細(xì)胞及培養(yǎng)液一起收集到15ml或者50ml離心管中，1500rpm離心3min，棄去上清；加入10ml冷PBS輕輕吹打，1500rpm，4℃離心3min，棄去上清；反復(fù)2次；第二次棄去上清后，用1ml冷PBS重懸細(xì)胞，移入1.5ml微型離心管，2500rpm（500g），4℃離心5分鐘，盡量去除所有殘留上清，于-80度或者液氮凍存待用。在避免凍融的情況下，一般保存1年，建議盡快檢測。2、貼壁細(xì)胞樣品：2.1胰酶消化：用胰酶將細(xì)胞消化后，含血清的培養(yǎng)基中和胰酶，吹
Western blot檢測樣本收集運送注意事項2021/11/25
樣本運輸條件及保存條件組織樣本:1.組織樣本應(yīng)立即放置-20℃。2.運輸過程采用液氮，干冰，市內(nèi)運輸可選用冰袋。3.樣本量不低于100mg。4.請告知組織種屬和類型，如肝,脾等。細(xì)胞樣本1.有嚴(yán)格時間節(jié)點的實驗需客戶自行裂解樣本，提取蛋白，采用干冰運輸。2.客戶離心搜集好的細(xì)胞、懸浮細(xì)胞、貼壁細(xì)胞都需用冰袋維持4℃運輸，不可使用干冰和液氮。3.所提供細(xì)胞量不低于106。特殊樣本1.全血采用冰袋維持4℃運輸，嚴(yán)禁用干冰和液氮運輸，血清和血漿可采用液氮，干冰，冰袋運輸。2.植物組織應(yīng)采用干冰或液氮運
常見問題解惑---慢病毒2021/11/25
常見問題解惑---慢病毒一、慢病毒是什么？慢病毒是逆轉(zhuǎn)錄病毒的一種，具有逆轉(zhuǎn)錄病毒的基本結(jié)構(gòu)和特性：整合入宿主細(xì)胞基因組，長期表達(dá)，可用于轉(zhuǎn)基因動物制備；但也有不同于逆轉(zhuǎn)錄病毒的組份和特性：比逆轉(zhuǎn)錄病毒具有更高的滴度，不僅可以感染分裂期細(xì)胞，更重要的，還能感染非分裂期的細(xì)胞。吉凱提供的慢病毒為“zx”性病毒，即病毒感染目的細(xì)胞后不會再感染其他細(xì)胞，也不會利用宿主細(xì)胞產(chǎn)生新的病毒顆粒。慢病毒中的毒性基因已經(jīng)被剔除并被外源性目的基因所取代，屬于假型病毒。但該病毒仍然具有可能的潛在的生物學(xué)危險二、慢病
細(xì)胞能量代謝服務(wù)Seahorse XF實驗中常見問題之三2021/11/24
Qustions&解答AnswersSeahorseXF實驗常見問題及解答29Seahorse數(shù)據(jù)分析軟件Wave可以免費下載安裝嗎？是的，可在安捷倫找到Wave軟件下載，并且免費下載安裝。30SeahorseXF儀器模板選項中沒有想檢測試劑盒的模板怎么辦？可在桌面板wave軟件中將相應(yīng)實驗?zāi)０逑葘?dǎo)出到U盤中，再導(dǎo)入XF儀器模板庫即可。31Seahorse數(shù)據(jù)分析軟件導(dǎo)出選項中沒有對應(yīng)的reportgenerator？當(dāng)軟件導(dǎo)出選項中無相應(yīng)的reportgenerator時，請移步到Agilen
細(xì)胞能量代謝服務(wù)Seahorse XF實驗中常見問題之二2021/11/24
Qustions&解答AnswersSeahorseXF實驗常見問題及解答16可以在Seahorse檢測液中加入血清嗎？不建議加入血清（如：FBS），因為其會影響檢測液的緩沖能力，并可能與進(jìn)行檢測的藥物/化合物發(fā)生非特異性結(jié)合而影響檢測效果，同時容易產(chǎn)生氣泡。另外，使用加入血清的檢測液溶解藥物加載至探針板加藥孔中進(jìn)行注射時，會出現(xiàn)漏藥或加藥注射失敗。17加入底物的檢測液在多長時間內(nèi)可保持穩(wěn)定？或可以提前配好檢測液和藥物嗎？Seahorse檢測液在實驗當(dāng)天現(xiàn)用現(xiàn)配。藥物也要現(xiàn)配現(xiàn)用，溶解后的藥物要
細(xì)胞能量代謝服務(wù)Seahorse XF實驗中常見問題之一2021/11/24
Qustions&解答AnswersSeahorseXF實驗常見問題及解答01可以使用超出保質(zhì)期的探針板或重復(fù)使用探針板嗎？Agilent無法保證因使用超出保質(zhì)期的探針板或重復(fù)使用探針板而得到的實驗數(shù)據(jù)質(zhì)量(有效性)，為得到最佳的、最真實的數(shù)據(jù)，請使用有效期內(nèi)的探針板及其它消耗品。02探針板水化超出水化時間怎么辦？Agilent建議將探針板放入37℃無CO2培養(yǎng)箱中水化過夜以得到*結(jié)果。最短水化時間是37℃水化12小時。探針板最長水化時間是37℃水化72小時，但由于液體蒸發(fā)需要補充(或更換)校準(zhǔn)
Seahorse XF實時ATP速率測定技術(shù)服務(wù)中常見問題2021/11/24
實驗背景細(xì)胞三磷酸腺苷(ATP)的產(chǎn)生速率是一種描述細(xì)胞代謝的信息含量很高的測量，因為ATP是細(xì)胞內(nèi)普遍存在的主要能量貨幣。細(xì)胞的代謝調(diào)控使細(xì)胞根據(jù)ATP需求的變化調(diào)整ATP產(chǎn)生的變化來維持總的細(xì)胞內(nèi)的ATP水平。安捷倫SeahorseXF實時ATP速率測定被設(shè)計用來測量活細(xì)胞總的ATP產(chǎn)生速率。更重要的是，這個實驗?zāi)軌騾^(qū)分哺乳動物細(xì)胞內(nèi)兩條主要的產(chǎn)生ATP的代謝途徑線粒體氧化磷酸化（OXPHOS）和糖酵解ATP的產(chǎn)生。常見問題如果檢測液中含有不同的氧化底物（不同的P/O值），mitoATP產(chǎn)生
Seahorse XF 細(xì)胞線粒體壓力測試技術(shù)服務(wù)2021/11/24
SeahorseXF細(xì)胞線粒體壓力測試SeahorseXF細(xì)胞線粒體壓力測試全面了解線粒體功能1、實驗背景安捷倫SeahorseXF細(xì)胞線粒體壓力測試通過在SeahorseXFe和XF細(xì)胞外流量分析儀上直接測量細(xì)胞的氧消耗速率（OCR）來表征線粒體功能的關(guān)鍵參數(shù)。它是基于培養(yǎng)板的活細(xì)胞實驗，能夠?qū)崟r監(jiān)測OCR。實驗使用XF傳感器探針板內(nèi)置的加藥孔在實驗過中將呼吸作用的調(diào)節(jié)劑加入細(xì)胞孔中，從而得到反映線粒體功能的關(guān)鍵參數(shù)。實驗試劑盒里的調(diào)節(jié)劑為寡霉素（Oligomycin），羰基氰-4（三氟甲氧基
細(xì)胞血管生成實驗原理2021/11/23
細(xì)胞血管生成實驗細(xì)胞血管生成技術(shù)服務(wù)介紹血管生成是腫瘤發(fā)生過程中新血管的形成。它是指源于已存在的毛細(xì)血管和毛細(xì)血管后微靜脈的新的毛細(xì)血管性血管的生長。腫瘤血管生成是一個極其復(fù)雜的過程，一般包括包括血管內(nèi)皮基質(zhì)降解、內(nèi)皮細(xì)胞移行、內(nèi)皮細(xì)胞增殖、內(nèi)皮細(xì)胞管道化分支形成血管環(huán)和形成新的基底膜等步驟。細(xì)胞血管生成客戶需知1）、客戶需提供生長狀態(tài)良好的實驗細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)條件；2）、客戶需準(zhǔn)確告知實驗設(shè)計內(nèi)容，如樣本濃度等。
Transwell測細(xì)胞遷移原理2021/11/23
Transwell測細(xì)胞遷移Transwell測細(xì)胞遷移技術(shù)服務(wù)介紹將培養(yǎng)細(xì)胞上層小室放入培養(yǎng)板中，上下層培養(yǎng)液以聚碳酸酯膜相隔，將研究的細(xì)胞種在上室內(nèi)，下層培養(yǎng)液中的成分可以影響到上室內(nèi)的細(xì)胞，應(yīng)用不同孔徑和經(jīng)過不同處理的聚碳酸酯膜，就可以進(jìn)行共培養(yǎng)、細(xì)胞趨化、細(xì)胞遷移、細(xì)胞侵襲等多種方面的研究。該實驗細(xì)分為如下4類：細(xì)胞共培養(yǎng)：兩種細(xì)胞聯(lián)合培養(yǎng)，研究其中一種細(xì)胞分泌的因子對另一細(xì)胞性能的影響，此時選擇小于3.0um孔徑，細(xì)胞不會遷移通過，將細(xì)胞A種于上室，細(xì)胞B種于下室，可以研究細(xì)胞B分泌或
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