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上海徠同生物科技有限公司
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細胞劃痕實驗原理介紹2021/11/23
細胞劃痕實驗細胞劃痕實驗技術服務介紹細胞劃痕(修復)法是一種簡捷的測定細胞遷移運動與修復能力的方法,類似體外傷口愈合模型。在體外培養皿或平板培養的單層貼壁細胞上,用微量槍頭或其他硬物在細胞生長的中央區域劃線,去除中央的細胞,然后繼續培養細胞至設定時間(采用無血清或低血清(排除細胞增殖的影響),取出培養板,觀察周邊細胞是否生長(修復)至中央劃痕區,以此判斷細胞的生長遷移能力。通常設定正常對照組與實驗組,實驗組中添加某些處理因素或藥物、外源性基因等,通過不同分組之間的細胞對于劃痕區的修復能力,判斷比
MTT檢測細胞增殖檢測2021/11/23
MTT檢測細胞增殖檢測技術服務介紹MTT比色法,是一種檢測細胞存活和生長的方法。其檢測原理為活細胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍紫色結晶甲瓚并沉積在細胞中,而死細胞無此功能。二甲基亞砜能溶解細胞中的甲瓚,用酶聯免疫檢測儀在特定波長處測定其光吸收值,可間接反映活細胞數量。CCK-8檢測試劑盒是應用WST-8取代MTT被還原,WST-8是一種類似于MTT的化合物,在電子耦合試劑存在的情況下,可以被線粒體內的一些脫氫酶還原生成橙黃色的甲瓚。WST-8產生的甲瓚比XTT和MTS
TUNEL細胞凋亡檢測實驗2021/11/23
TUNEL細胞凋亡檢測TUNEL細胞凋亡檢測技術服務介紹TUNEL細胞凋亡檢測(TUNELApoptosisAssay)是一種高靈敏度又快速簡便的細胞凋亡檢測方法。對于待檢測的細胞或組織樣品,經過生物素標記和后續的DAB顯色等步驟,即可在普通光學顯微鏡下觀察到凋亡細胞。TUNEL細胞凋亡檢測技術服務內容服務內容結果內容石蠟切片檢測報告,照片冰凍切片細胞爬片實驗結果展示TUNEL細胞凋亡檢測客戶須知樣本要求:取材保持組織新鮮(組織塊以小于2cm×1.5cm×0.3cm為宜),立即放入固定液中(固定
同位素標記定量實驗2021/11/22
同位素標記定量iTRAQ(isobaricTagsforRelativeandAbsoluteQuantitation)&TMT(TandemMassTags)分別由ABSciex公司和Thermo公司研發的多肽體外標記定量技術,利用多種同位素試劑標記蛋白多肽N末端或者賴氨酸側鏈基團,不同分子量的試劑對不同來源的樣品進行標記從而實現不同樣品間蛋白質組的比較。iTRAQ/TMT試劑由三部分組成:報告基團、平衡基團和反應基團。反應基團形成2-10種等質量同位素標簽。iTRAQ/TMT試劑標記酶解后的
瓊脂糖凝膠電泳原理2021/11/22
瓊脂糖凝膠電泳脂糖凝膠電泳原理脂糖凝膠電泳的分析原理與其他支持物電泳最主要區別是:它兼有“分子篩”和“電泳”的雙重作用。瓊脂糖凝膠具有網絡結構,物質分子通過時會受到阻力,大分子物質在涌動時受到的阻力大,因此在凝膠電泳中,帶電顆粒的分離不僅取決于凈電荷的性質和數量,而且還取決于分子大小,這就大大提高了分辨能力。現廣泛應用于核酸的研究中。核酸會根據pH不同帶有不同電荷,在電場中受力大小不同,因此跑的速度不同,根據這個原理可將其分開。實驗步驟1.制膠:使用電泳緩沖液在制膠器上配制1.0%的瓊脂糖凝膠2
酶聯免疫吸附測定(ELISA)2021/11/22
酶聯免疫吸附測定(ELISA)ELISA的基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性,酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性,又保留酶的活性。在測定時,受檢標本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與液體中的其他物質分開。再加入酶標記的抗原或抗體,也通過反應而結合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。加入酶反應的底物后,底物被酶催化成為有色產物,產物的量與標
免疫印跡(WB)2021/11/22
免疫印跡(WB)免疫印跡是根據抗原抗體的特異性結合檢測復雜樣品中的某種蛋白的方法。實驗意義WB用于鑒定能夠被特異性抗體識別的大分子抗原(通常是蛋白質),并測定抗原的分子量。實驗步驟1.蛋白樣品制備2.電泳分離3.電轉移4.免疫印跡顯色:ECL顯色系統結果展示實驗完成周期及交付標準1.實驗周期:2-3周2.交付標準:黑白顯色圖、內參、灰度值分析、柱狀圖、實驗報告(實驗步驟、試劑、儀器等)需確認的信息1.樣本種屬及類型,是組織還是細胞。2.需要檢測目標蛋白。3.檢測分樣本數及分組,每張膜的上樣順序。
COIP免疫共沉淀實驗原理2021/11/18
COIP免疫共沉淀實驗原理COIP免疫共沉淀實驗原理免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation)是以抗體和抗原之間的專一性作用為基礎的用于研究蛋白質相互作用的經典方法。這是確定兩種蛋白質在完整細胞內生理性相互作用的有效方法。其原理是:當細胞在非變性條件下被裂解時,完整細胞內存在的許多蛋白質-蛋白質間的相互作用就被保留了下來。假如用蛋白質X的抗體免疫沉淀X,那么與X在體內結合的蛋白質Y也能沉淀下來。目前多用精制的proreinA預先結合固化在argarose的beads上,使之與含有
CHIP免疫沉淀2021/11/18
CHIP免疫沉淀染色質免疫沉淀(ChIP)是一種用于表觀遺傳學研究的技術,可以快速反映蛋白質-DNA相互作用。想要獲得理想的結果,選擇適合的抗體固然很關鍵,ChIP流程中所有步驟也很重要。該技術利用了多種分子生物學和蛋白質組學方法。CHIP免疫沉淀實驗原理:染色質免疫沉淀技術的原理是:在生理狀態下把細胞內的DNA與蛋白質交聯在一起,通過超聲或酶處理將染色質切為小片段后,利用抗原抗體的特異性識別反應,將與目的蛋白相結合的DNA片段沉淀下來。染色質免疫沉淀技術一般包括細胞固定,染色質斷裂,染色質免疫
裸鼠成瘤實驗2021/11/17
實驗簡介從體外細胞試驗到動物水平體內試驗,是基因功能研究的重要飛躍。動物實驗,由于其更能模擬人類的生理和病理條件,在腫瘤研究中,最常規的動物實驗就是裸鼠成瘤實驗。由于大部分腫瘤研究使用的是人類細胞,所以由于異種排斥的存在,我們需要免疫缺陷型小鼠來作為移植瘤模型的載體,通過對該小鼠的注射腫瘤細胞,使其成瘤,觀察流體的生長來判斷其生物學變化。藥物對人癌細胞裸鼠移植瘤的抑制實驗,裸鼠是先天性胸腺缺陷的突變小鼠,主要表現為無毛以及缺乏正常胸腺。由于裸鼠的免疫缺陷,在一定情況下,不排斥來自異種動物的組織移
IP-MS:蛋白質互作/后修飾原理2021/11/17
免疫沉淀串聯質譜分析(IP-MS)原理介紹:蛋白質相互作用(Protein-ProteinInteractions,PPIs)和翻譯后修飾(Post-TranslationalModifications,PTMs)的數據是能顯著提高基礎類研究文章檔次的內容。篩選和發現目的蛋白(target)在細胞中新的互作蛋白或者新的后修飾,免疫沉淀(IP,Immunoprecipitation)結合LC-MS(液相色譜-質譜連用,蛋白質組學研究的核心工具)是目前的主流技術方案(IP-MS)。通過一次IP-MS
CCK-8法檢測不同濃度化合物對細胞增殖活性影響2021/11/16
CCK-8法檢測不同濃度化合物對細胞增殖活性影響實驗儀器與試劑表格一:實驗儀器儀器細胞培養箱酶標儀表格二:試劑試劑廠家MEM培養液(MCF-7細胞)HycloneRPMI1640培養液(GES-1細胞)Hyclone胎牛血清GibcoCCK-8試劑Biosharp一、實驗步驟1、細胞消化、計數、配制成濃度為5×104個/mL的細胞懸液,96孔細胞培養板中每孔加入100μL細胞懸液(每孔5×103個細胞);2、將細胞培養板置于37℃,5%CO2培養箱中培養過夜;3、使用*培養液(90%培養液+10
掃描電鏡的原理及特點2021/11/16
掃描電鏡在觀察生物樣品時,而能否獲得真實、清晰、理想的掃描電鏡觀察結果,樣品的制備過程是關鍵。下面介紹一下掃描電鏡的原理和掃描電鏡的特點。掃描電鏡的原理掃描電鏡從原理上講就是利用聚焦得非常細的高能電子束在試樣上掃描,激發出各種物理信息。通過對這些信息的接受、放大和顯示成像,獲得測試試樣表面形貌的觀察。當一束極細的高能入射電子轟擊掃描樣品表面時,被激發的區域將產生二次電子、俄歇電子、特征x射線和連續譜X射線、背散射電子、透射電子,以及在可見、紫外、紅外光區域產生的電磁輻射。同時可產生電子-空穴對、
U937細胞效率轉染條件分享2021/09/08
U937細胞效率轉染條件分享轉染材料準備1、轉染試劑用量:10ul2、DNA/siRNA濃度:電訊3、細胞密度:1*106-1*1054、轉染用培養板:6孔板5、轉染試劑:AD600025AdvancedDNARNA轉染試劑6、轉染時間:15小時7、細胞培養胎牛血清:Z7181FBS-500胎牛血清8、細胞凍存液:L0100無血清細胞凍存液操作過程:1.提前1天接種細胞:細胞匯合度在60-80%左右,再進行轉染。2.核酸復合物制備:將核酸與轉染試劑按照比例關系直接混合,用移液器吹打、混勻,室溫靜
Thp-1細胞高效率轉染條件分享2021/09/08
轉染材料準備:1、轉染試劑用量:10ul2、siRNA濃度:20um/L3、細胞密度:1*106-1*1054、轉染用培養板:6孔板5、轉染試劑:AdvancedDNARNA轉染試劑;貨號:AD6000256、轉染時間:48小時7、細胞培養胎牛血清:Z7180FBS-500超低內毒素胎牛血清8、細胞凍存液:L0100無血清細胞凍存液注意:本細胞轉染用量條件不適合lipo使用。操作過程:1.提前1天接種細胞:細胞匯合度在60-80%左右,再進行轉染。2.核酸復合物制備:將核酸與轉染試劑按照比例關系
2.5L微需氧產氣袋AnaeroPack C-2安寧包2021/08/13
產品名稱:2.5L微需氧產氣袋產品貨號:C-2包裝規格:10只/包產品用途:配合密封罐使用,用于微需氧微生物的培養。本品可吸收容器中的O2,使其濃度變為8-9%,CO2濃度變為7-8%。每一個鋁塑包裝中含有一片紙袋(微需氧產氣袋)。產品特點:操作簡便——不用加水、不用催化劑,只需把藥劑(產氣袋)外袋剪開放入容器內,密封后即可形成適宜的厭氧、微需氧、二氧化碳培養環境。適用廣泛——培養容器內不會產生壓差,不會產生高溫。同型號的培養容器可通用,廢棄物處理方便,不污染環境。高效經濟——無須使用昂貴且占空
日本三菱MGC厭氧產氣袋工作原理2021/07/28
日本三菱MGC厭氧產氣袋工作原理厭氧產氣袋AnaeroPack——是由日本三菱瓦斯化學株式會社發明的系列一類產品,其基本原理是將密閉空間中的氧氣*或者部分吸收掉,然后產生二氧化碳氣體。產品名稱:2.5L厭氧產氣袋國內貨號:C-1包裝規格:10只/包產品用途:配合密封罐使用,用于厭氧微生物的培養。本品可吸收容器中的全部O2,同時產生約21%的CO2。每一個鋁塑包裝中含有一片紙袋(厭氧產氣袋)。產品特點:操作簡便——不用加水、不用催化劑,只需把藥劑(產氣袋)外袋剪開放入容器內,密封后即可形成適宜的厭
三菱厭氧產氣袋2.5L厭氧產氣包使用方法C-12021/07/28
三菱厭氧產氣袋2.5L厭氧產氣包使用方法1、將鋁塑包裝上側剪開,取出紙袋,紙袋不需要打開。2、立即將紙袋放入密封罐中,將密封罐蓋上。接觸空氣后將即刻吸收O2,產生CO2。不需要加水或使用催化劑。3、每袋AnaeroPackTM-Anaero用于2.5升培養罐,對于大于2.5升的培養罐,根據培養罐的體積用2~3包,當使用多袋AnaeroPackTM-Anaero時,不要疊放在一起。4、用完的厭氧產氣袋可能會因為剩余反應而產生熱量,請等它們變冷以后再丟棄。且不要跟易燃物丟在一起。5、AnaeroPa
英國MAST公司CRYOBANK菌種保藏管/菌種保存管上海代理*2021/07/22
英國MAST公司CRYOBANK菌種保藏管/菌種保存管上海代理*英國MAST-Cryobank菌種保存管品牌:英國MAST貨號:CRYO/M規格:64支/盒,4種顏色各16支貨號:CRYO80/M,新產品,80支/盒每支含有25顆磁珠英國MAST-Cryobank菌種保存管品牌介紹及主要特點:MAST公司成立于1957年,總部位于英國布特爾,在德國、法國擁有子公司,研發生產微生物、感染性疾病及自身免疫診斷等系列產品。CRYOBANK菌種保存管簡單易用,含多孔小珠及冷凍保存液。該方法由英國Felt
高效率轉染原代破骨細胞前體細胞,在已發表文章中的轉染經驗介紹2021/07/22
高效率轉染原代破骨細胞前體細胞,在已發表文章中的轉染經驗介紹西部戰區總醫院藥學部,在2021年發表文章到CellCommunicationandSignaling的學術期刊中科研者使用美國invigentech轉染試劑,高效率轉染原代破骨細胞前體細胞(Osteoclastprecursorcells),具體轉染原代破骨細胞前體細胞方法經驗如下:(注意:本文轉染實驗中使用的細胞數量、試劑用量和操作方法不適用于傳統lipo3000轉染試劑或類似產品)。CellcultureSortedprimary
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