Seahorse XF 細胞線粒體壓力測試

 Seahorse XF 細胞線粒體壓力測試全面了解線粒體功能

1、實驗背景

 安捷倫 SeahorseXF 細胞線粒體壓力測試通過在 Seahorse XFe 和 XF 細胞外流量分析儀上直接測量細胞的氧消耗速率（OCR）來表征線粒體功能的關鍵參數。它是基于培養板的活細胞實驗，能夠實時監測 OCR。   

   實驗使用 XF 傳感器探針板內置的加藥孔在實驗過中將呼吸作用的調節劑加入細胞孔中，從而得到反映線粒體功能的關鍵參數。實驗試劑盒里的調節劑為寡霉素（Oligomycin），羰基氰-4（三氟甲氧基）苯腙（Carbonyl cyanide-4 (trifluoromethoxy)Phenylhydrazone，FCCP），魚藤酮（Rotenone）。

Seahorse XF 細胞線粒體壓力測試詞匯表：

• 基礎呼吸（Basal respiration）：用來滿足細胞ATP需求和線粒體質子滲漏的氧消耗。表示細胞在基礎條件下的能量需求。

• ATP產生（ATP Production）：加入ATP合酶抑制劑寡霉素后減少的氧氣消耗速率，代表基礎呼吸中被用來驅動ATP產生的部分。表示用來滿足細胞能量需求的線粒體ATP產生。

• H+（質子）滲漏（H+ (Proton) leak）：與 ATP產生不偶聯的基礎呼吸的剩余部分。質子滲漏可以被看作是線粒體損傷的標志，也可被看作是一種調節線粒體ATP產生的機制。

• 最大呼吸（Maximal respiration）：加入解偶聯劑FCCP之后獲得的最大氧氣消耗速率。FCCP通過刺激呼吸鏈以最大能力運轉模擬生理的“能量需求”，導致底物（糖，脂肪和氨基酸）的快速氧化以應對這一代謝挑戰。顯示細胞能夠達到的最大呼吸速率。

• 備用呼吸能力（Spare respiratory      capacity）：這個測量指標表示細胞應對能量需求的能力以及細胞呼吸與其理論最大值的差距。細胞應對能量需求的能力可作為細胞適應性或靈活性的一個指標。

• 非線粒體呼吸（Nonmitochondrial      respiration）：加入魚藤酮后，由于一部分細胞中的酶繼續消耗氧而存留的氧消耗。這對于線粒體呼吸的準確測量很重要。

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