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上海申知心生物科技有限公司
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大鼠腦血管痙攣模型2018/11/02
大鼠腦血管痙攣模型(1)復(fù)制方法采用經(jīng)額蛛網(wǎng)膜下腔插管直達(dá)大腦動脈(Willis)環(huán)處2次注血制成大白鼠蛛網(wǎng)膜下腔出血后DCV模型。健康大鼠，體重為200～250g，雌雄不拘，經(jīng)腹腔注射水合氯醛(按350～400mg/kg體重的劑量)或戊丨巴丨比丨妥丨鈉(按50～60mg/kg體重的劑量)麻醉大鼠，剃除頭頂部毛發(fā)，手術(shù)區(qū)域皮膚消毒。切開頭頂部中線皮膚，鈍性分離肌肉及骨膜。距前囟前5mm、中線旁3mm處用電動牙科鉆鉆孔達(dá)腦膜，此骨孔恰好在前顱窩底與額極交接處。適當(dāng)擴(kuò)大骨孔，在手術(shù)顯微鏡下小心挑破腦
小鼠腦血管痙攣模型2018/11/02
小鼠腦血管痙攣模型(1)復(fù)制方法雄性小鼠，體重為25～30g。1)SAH的復(fù)制經(jīng)腹腔注射戊丨巴丨比丨妥丨鈉(60mg/kg體重)麻醉，手術(shù)區(qū)域皮膚消毒。切開分離右側(cè)股動脈并插管，以備抽取60μl自體血進(jìn)行顱內(nèi)注射用(在顱內(nèi)注射60μl的量時外漏少，且鼠死亡率低)。小鼠頭部前傾30°，頭頂后部正中切口，暴露頭骨。選用30號穿刺針從腦后下部中線向左向下45°穿刺進(jìn)入枕大池。由股動脈抽取60μl自體血(隨后腹腔注射60μl生理鹽水以補(bǔ)充正常體液量)緩慢注入枕大池，持續(xù)時間約1min。當(dāng)注入20μl時，
肺挫傷動物模型2018/10/26
肺挫傷動物模型(1)復(fù)制方法體重為200g左右成年大鼠，經(jīng)尾靜脈按30mg/kg體重的劑量注射戊丨巴丨比妥鈉麻醉后，將大鼠左側(cè)臥位固定于胸部撞擊器(由撞桿、撞盤、動物固定器及高度調(diào)節(jié)器組成)固定臺上。作大鼠頸動脈插管，連接壓力傳感器及生理記錄儀，記錄大鼠的呼吸、血壓、心率，監(jiān)測血?dú)?。采用自由落體砝碼使撞擊胸壁初速度為10m/s，調(diào)節(jié)胸壁位移為15mm，使砝碼撞擊撞盤即可造成大鼠急性肺挫傷。(2)模型特點(diǎn)本模型復(fù)制原理主要是應(yīng)用強(qiáng)大的暴力作用胸壁使胸腔縮小，胸內(nèi)壓力增高并壓迫肺臟，引發(fā)肺組織內(nèi)水腫
子宮胎盤缺血動物模型2018/10/26
子宮胎盤缺血模型(1)復(fù)制方法目前各種動物模型研究主要使用孕犬、孕兔及妊娠獼猴、狒狒等實(shí)驗(yàn)動物。將孕兔(犬)等實(shí)驗(yàn)動物經(jīng)靜脈按30mg/kg體重的劑量注射戊丨巴丨比妥鈉麻醉，麻醉后將動物仰臥固定于手術(shù)臺上，常規(guī)消毒腹部手術(shù)區(qū)域并去毛，沿腹正中線作下腹部切口，進(jìn)腹腔后分離腹主動脈，然后用動脈夾鉗夾腹主動脈，當(dāng)子宮胎盤灌注壓下降時，外周血壓迅速升高并維持至腹主動脈阻斷結(jié)束。在孕兔模型中發(fā)現(xiàn)夾閉腹主動脈后，血壓可于次日升高，并一直能維持至妊娠終止；同時孕兔出現(xiàn)蛋白尿、腎小球內(nèi)皮炎和毛細(xì)血管內(nèi)纖維素沉積
Pristane誘導(dǎo)BALB/c狼瘡鼠模型2018/10/26
Pristane誘導(dǎo)BALB/c狼瘡鼠模型(1)復(fù)制方法10周齡雌性BALB/c小鼠，經(jīng)其腹腔一次性注射降植烷(2,6,10,14-tetramethylpentadecane,Pristane,)0.5ml，然后小鼠常規(guī)飼養(yǎng)，自由飲水和進(jìn)食。在小鼠注射Pristane前及注射后每月作一次小鼠尿蛋白測定，依據(jù)反應(yīng)區(qū)顯色程度判斷尿蛋白陰性(－)：0mg/L；(±)：150～300mg/L；(+)：300mg/L；(++)：1000mg/L)；(+++)：3000mg/L；(++++)；20000m
慢性移植物抗宿主病狼瘡小鼠動物模型2018/10/26
慢性移植物抗宿主病狼瘡小鼠模型(1)復(fù)制方法體重為16g左右、年齡為6～8周齡的(雌性DBA/2×雄性C57BL/6J)F1代小鼠，通過尾靜脈注射其母鼠DBA/2淋巴細(xì)胞誘導(dǎo)模型，觀察12周。先麻醉處死DBA/2小鼠，無菌分離其脾臟、胸腺、淋巴結(jié)，比例為3：2：1，將所取組織在生理鹽水中研磨，過150μm和70μm尼龍篩，鏡下觀察細(xì)胞存活狀況，并計(jì)算細(xì)胞數(shù)量。將制備好的淋巴液活細(xì)胞經(jīng)F1代鼠尾靜脈注入體內(nèi)，注射劑量為每只鼠50×1000000個淋巴液活細(xì)胞，注射時間分別為0、3、7及10d，觀察
犬門靜脈內(nèi)注射PVA血管阻塞物致門靜脈高壓模型2018/10/18
犬門靜脈內(nèi)注射PVA血管阻塞物致門靜脈高壓模型(1)復(fù)制方法體重為9～15kg成年實(shí)驗(yàn)犬，常規(guī)方法麻醉后作腹部正中切口，尋找腸系膜上靜脈分支，置埋入式多用途藥泵導(dǎo)管至門靜脈主干，聚乙烯醇(PVA，顆粒大小為100～400μm)按10mg/kg體重經(jīng)藥泵注入門靜脈，每次增加5mg/kg體重，每周1次。共12次。實(shí)驗(yàn)前和實(shí)驗(yàn)期間分別在麻醉狀態(tài)下做胃鏡檢查、經(jīng)藥泵行門靜脈造影和食管鋇餐X線檢查。并在門靜脈高壓形成前后，分別開腹經(jīng)胃網(wǎng)膜右靜脈間接測定門脈壓力，并做肝活切病理學(xué)檢查，同時做肝功能化驗(yàn)。3個
兔門靜脈內(nèi)注射白芨粉栓致門靜脈高壓模型2018/10/18
兔門靜脈內(nèi)注射白芨粉栓致門靜脈高壓模型(1)復(fù)制方法雄性新西蘭兔，常規(guī)方法麻醉后，從劍突下正中切口進(jìn)入腹腔，以靜脈留置針穿刺門靜脈主干近端，經(jīng)留置針套管測門靜脈壓，并做數(shù)字減影血管造影。將白芨與生理鹽水混懸液緩慢注入門靜脈內(nèi)，劑量4ml，濃度為0.4％，再次測門脈壓和做數(shù)字減影血管造影。術(shù)后3～4周采取同法測門靜脈壓，觀察肝臟體積變化及腹水情況，并做肝活檢病理切片，對部分肝臟做門靜脈血管鑄型。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，4周后門靜脈壓平均升高40％，肝臟縮小約20％，栓塞部位呈暗紅色，病理切片見栓塞區(qū)肝細(xì)胞呈
縮窄門靜脈主干加絲線致慢性犬門靜脈高壓癥模型2018/10/18
縮窄門靜脈主干加絲線致慢性犬門靜脈高壓癥模型(1)復(fù)制方法成年實(shí)驗(yàn)犬，術(shù)前禁食后麻醉。右肋緣下斜切口進(jìn)腹，游離門靜脈主干，用無損傷鉗暫時阻斷，采用“插管水沖法”(管內(nèi)事先裝有10號絲線1根)分別于門靜脈主干→左側(cè)干→左外支及門靜脈主干→右側(cè)干→右前或右后支各放置長度12～16cm及9～12cm的絲線1根，放線同時，逐漸退出插管，后將門靜脈破口縫合并固定絲線尾端。此時門靜脈內(nèi)有10號絲線2根，其前端分別延伸至左、右肝葉的門靜脈支內(nèi)?？p扎門靜脈主干使直徑縮窄1/2。取除門靜脈阻斷鉗。門靜脈的放線及縮
月桂酸致大鼠閉塞性脈管炎動物模型2018/10/18
月桂酸致大鼠閉塞性脈管炎動物模型(1)復(fù)制方法體重為280～320g雄性Wistar大鼠，按35mg/kg體重的劑量腹腔注射3％的戊丨巴丨比妥丨鈉麻醉。動物仰臥固定分離右股動脈，并用動脈夾于股動脈中段阻斷血液。然后注入月桂酸，注入的總體積為0.2ml。先在動脈夾的下方1.0cm處近心端方向注入月桂酸，然后再向股動脈遠(yuǎn)心端方向注入余下的月桂酸。注入的標(biāo)準(zhǔn)為血管明顯充盈，略顯白色而無明顯腫脹時，注入結(jié)束時注射器的取出動作要輕柔。注入月桂酸15min后打開動脈夾，復(fù)通血流，并觀察出血和止血情況。待動物
腦動靜脈畸形動物模型2018/10/12
腦動靜脈畸形動物模型以往的腦動靜脈畸形動物模型為動靜脈瘺，沒有真正的畸形團(tuán)結(jié)構(gòu)。Massoud等于1994年利用豬，通過外科血管吻合和血管內(nèi)閉塞技術(shù)，次建立了含有畸形團(tuán)結(jié)構(gòu)的腦動靜脈畸形動物模型。(1)復(fù)制方法選用3～4月齡、體重為20～40kg的豬，雌雄不拘。按100mg/kg體重的劑量肌內(nèi)注射氯丨胺丨酮麻醉，經(jīng)股動脈插管行血管造影。右下頜骨向下做旁正中直切口約10cm，分離并暴露右側(cè)頸總動脈和頸內(nèi)或頸外靜脈。用9-0縫合線行右側(cè)頸總動脈一頸內(nèi)或頸外靜脈端端吻合，將頸總動脈近心端和靜脈遠(yuǎn)心端的
腦血栓形成動物模型2018/10/12
腦血栓形成動物模型1自體血血栓注入法(autologousbloodemboli)(1)復(fù)制方法大鼠，體重為280～300g，雌雄不拘。準(zhǔn)備一個PE-50導(dǎo)管(外徑0.3mm，內(nèi)徑0.2mm)經(jīng)一軟管接微量加樣器，手術(shù)前充滿凝血酶(1×1000000U/L)。經(jīng)腹腔注射戊丨巴丨比丨妥丨鈉(按50～60mg/kg體重的劑量)或水合氯醛(按350～400mg/kg體重的劑量)麻醉后使動物仰臥位固定于手術(shù)臺上，剃除頸部毛發(fā)，手術(shù)區(qū)域消毒。取頸部正中切口，鈍性分離頸部肌肉，游離出雙側(cè)頸總動脈(OCA)、
腔隙性腦梗死（CLL）動物模型2018/10/12
腔隙性腦梗死(CLL)動物模型腔隙性腦梗死為缺血性腦卒中的重要一型，由腦部深穿動脈及其分支的特殊病變所至。采用腦內(nèi)大血管注射月桂酸鈉可選擇性損傷大鼠腦穿支動脈內(nèi)皮細(xì)胞，導(dǎo)致微小動脈內(nèi)原位血栓形成，從而建立大鼠腔隙性腦梗死模型。(1)復(fù)制方法雄性大鼠，體重為250～300g。經(jīng)腹腔注射戊巴妥鈉(按50～60mg/kg體重的劑量)或水合氯醛(按350～400mg/kg體重的劑量)麻醉后，剪除頸部毛發(fā)，手術(shù)區(qū)皮膚常規(guī)消毒。頸部切口，分離右側(cè)頸總、頸內(nèi)和頸外動脈，結(jié)扎同側(cè)枕動脈、甲狀腺上動脈、翼腭動脈及
輸尿管內(nèi)置管建立兔單側(cè)輸尿管梗阻腎小管間質(zhì)纖維化模型2018/09/29
輸尿管內(nèi)置管建立兔單側(cè)輸尿管梗阻腎小管間質(zhì)纖維化模型(1)復(fù)制方法體重2～3kg新西蘭兔，經(jīng)靜脈按30mg/kg體重的劑量注射戊丨巴丨比丨妥丨鈉麻醉，動物仰臥固定于手術(shù)臺上，腹部皮膚常規(guī)消毒、去毛。作臍下腹直肌外側(cè)旁直切口，切開腹外斜肌腱膜，暴露腹內(nèi)斜肌，分開腹橫肌，向內(nèi)側(cè)推開腹膜，鈍性分離腹膜，在髂血管前找到輸尿管，游離輸尿管，用艾利斯(Allis)鉗固定輸尿管，用剪刀剪開輸尿管1/3管徑(此處距離腎盂4～5cm)，將F2導(dǎo)管向輸尿管近端逆行插入2～3cm，可見到尿液經(jīng)導(dǎo)管流出，用1號絲線結(jié)扎
慶大霉素誘導(dǎo)腎小管間質(zhì)纖維化模型2018/09/29
慶大霉素誘導(dǎo)腎小管間質(zhì)纖維化模型(1)復(fù)制方法體重200～260g成年大鼠，每天分2次經(jīng)皮下按400mg/kg體重劑量注射慶大霉素(Gentamicin,GM)，連續(xù)2d。分別于次注射GM后2,5,8,11,15,22,29d收集大鼠尿液測24h尿量(UV)、尿肌酐(UCr)及尿鈉(UNa)，計(jì)算內(nèi)生肌酐清除率(CCr)和鈉排泄分?jǐn)?shù)(FENa)；采血測定血肌酐(SCr)、血尿素氮(BUN)、血鈉值(SNa)；麻醉處死動物分別留取腎臟，部分腎組織以10％甲醛固定，常規(guī)石蠟包埋，作連續(xù)組織切片，常規(guī)
單側(cè)腎靜脈結(jié)扎法腎小管間質(zhì)纖維化模型2018/09/29
單側(cè)腎靜脈結(jié)扎法腎小管間質(zhì)纖維化模型(1)復(fù)制方法體重200～250g大鼠，經(jīng)腹腔按0.1ml/kg體重的劑量注射8.5％水合氯醛麻醉，動物行仰臥固定，常規(guī)消毒腹部皮膚并取毛；沿腹中線作手術(shù)切口，依次切開皮膚和肌肉，游離左側(cè)腎臟，分離左腎靜脈，用4-0號手術(shù)縫線結(jié)扎，然后常規(guī)縫合肌肉和皮膚，關(guān)閉腹腔。術(shù)后動物常規(guī)單籠飼養(yǎng)觀察，自由飲水及進(jìn)食。于術(shù)后第5、10、15、20及25日動物麻醉后右股動脈放血處死，分離血清作血肌酐(SCr)含量測定；處死前1d在禁食不禁水的條件下，收集大鼠24h尿液測尿規(guī)
靜滴肌酐溶液制備高血肌酐動物模型2018/09/29
靜滴肌酐溶液制備高血肌酐動物模型(1)復(fù)制方法體重為2～3kg新西蘭雄性白兔，經(jīng)腹腔按30mg/kg體重的劑量注射3％戊丨巴丨比丨妥丨鈉溶液將實(shí)驗(yàn)兔麻醉后，仰臥固定于兔手術(shù)臺上，剪去頸部體毛并以碘酊嚴(yán)格消毒；沿實(shí)驗(yàn)兔頸部前正中切開皮膚5cm左右，分離肌肉，暴露并分離氣管，行氣管插管并穿線固定；同時分離頸動脈、靜脈并插管。動脈為收集血樣用，靜脈為持續(xù)滴注肌酐溶液用；并用導(dǎo)尿管導(dǎo)尿。第1次動脈采集動脈血樣2.5ml；隨后靜脈滴注0.5％肌酐溶液，控制在10滴/min；滿1h時第2次采動脈血樣2.5m
口腔接種細(xì)菌形成的牙周炎模型2018/09/20
口腔接種細(xì)菌形成的牙周炎模型(1)復(fù)制方法用牙齦卟啉菌口腔接種建立了牙周炎動物模型，體重250g的成年大鼠，實(shí)驗(yàn)前4d，按20mg/只的劑量經(jīng)大鼠肌肉注射卡那霉素或安芐霉素，1次/d，以便抑制不利于牙齦卟啉菌定居生長的內(nèi)源性細(xì)菌；給予抗生素3d后，取50g/L的低黏性碳氧甲基纖維素牙齦卟啉菌381懸液，經(jīng)管飼使細(xì)菌涂于齦緣乃至整個口腔，1次/d，共涂3d。(2)模型特點(diǎn)管飼牙齦卟啉菌懸液6周后發(fā)現(xiàn)，模型大鼠牙槽骨明顯喪失，尤其是在磨牙的鄰接面位置，表明本方法采用的單一牙齦卟啉菌口腔接種能夠誘導(dǎo)模
牙頸部結(jié)扎形成的牙周炎模型2018/09/20
牙頸部結(jié)扎形成的牙周炎模型(1)復(fù)制方法①用3.0絲線于雪貂實(shí)驗(yàn)牙牙頸部齦緣水平進(jìn)行結(jié)扎。14d后，動物牙齦發(fā)紅水腫，觸診易出血；28d后，其牙齦暗紅并有自發(fā)性出血，出現(xiàn)明顯的牙周炎。②用3.0絲線在成年實(shí)驗(yàn)猴下頜右側(cè)磨牙和前磨牙的釉牙骨質(zhì)界處結(jié)扎，2周后結(jié)扎牙均涂以從其他猴獲得的牙齦卟啉菌，間隔2周后重復(fù)1次。8周時結(jié)扎牙的PD、GI、PLI明顯升高，16周時牙骨密度喪失變化明顯，說明采用絲線結(jié)扎和涂菌可有效誘導(dǎo)猴發(fā)生牙周炎。③用牙線在成年小型豬實(shí)驗(yàn)牙(左右側(cè)前磨牙和磨牙)牙頸部進(jìn)行結(jié)扎，結(jié)扎
腦缺血的觀察及腦缺血模型的評價方法2018/09/20
腦缺血的觀察及腦缺血模型的評價方法缺血性腦血管疾病是一個復(fù)雜的病理生理過程，評價腦缺血的指標(biāo)各種各樣，研究中選取何種指標(biāo)評價腦缺血的程度及藥物的療效尤為重要，現(xiàn)將主要的參考觀察指標(biāo)綜述如下。1.神經(jīng)癥狀及體征的評價腦損傷后出現(xiàn)相應(yīng)的癥狀與體征，癥狀與體征的檢測又可以反映腦損傷與恢復(fù)的程度。常見的分級方法有：Bederson三級法、改良的Bederson、Zealonga5分制評分法、Tatlisumak6分制評分法等。常用的Bederson按受損程度分級，正常(0級)：①未見活動異常，大鼠被提尾
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