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皮膚光老化動物模型2019/01/17: 由環(huán)境因素引起的皮膚老化稱為時(shí)程性老化或自然老化。在環(huán)境因素中又以紫外線的作用大，所以又稱光老化。(1)復(fù)制方法BALB/c無毛小鼠按性別飼養(yǎng)于籠盒內(nèi)，用40W中波紫外線燈管高度為40cm照射。*周隔日照射一次，每次照射2h，后10周每周照射5d，每次2h。總劑量為5.9J/cm2。(2)模型特點(diǎn)實(shí)驗(yàn)小鼠出現(xiàn)皮膚粗糙、紋理加深加寬。光鏡見皮膚明顯增厚。表皮增生伴有角化過度及角化不全；部分區(qū)域呈乳頭樣增生，上皮角下延；皮淺層疏松水腫，毛細(xì)血管及纖維母細(xì)胞增生，附屬器明顯增生，可見局灶性及彌漫性單核

皮膚壓力潰瘍動物模型2019/01/17: 皮膚壓力潰瘍動物模型(1)復(fù)制方法8月齡貴州香豬，按30mg/kg體重的劑量經(jīng)腹腔注射戊丨巴丨比丨妥丨鈉麻醉，動物麻醉后取腹臥位固定于手術(shù)臺上；動物背部備皮作常規(guī)無菌消毒，于背部兩側(cè)作與身體長軸平行長約50mm深達(dá)肌層深面的皮膚切口，然后采用自制的壓傷裝置，置入鈦板，在皮膚表面以螺釘為中心自下而上分別安置另一鈦板、彈簧、第三鈦板并固定于鈦板，縫合皮膚切口。調(diào)節(jié)加力螺母產(chǎn)生不同壓力，通過控制受壓面積的壓力及時(shí)間模擬皮膚組織不同程度的壓力潰瘍創(chuàng)面，并考察創(chuàng)面愈合情況及收縮率。術(shù)后動物常規(guī)條件下飼養(yǎng)，

帶血管胸腺移植動物模型2019/01/17: 帶血管胸腺移植動物模型(1)復(fù)制方法供體組大鼠體重150～180g，受體組大鼠體重220～250g，按40mg/kg體重的劑量經(jīng)腹腔注射戊丨巴丨比丨妥丨鈉麻醉，麻醉后動物仰臥固定于手術(shù)板上，常規(guī)消毒腹部手術(shù)區(qū)域并去毛。供體大鼠手術(shù)：作肋弓下1.0cm橫行切口人腹，經(jīng)門靜脈內(nèi)注入肝素鈉250U。切開膈肌，沿胸廓兩側(cè)向上翻起。游離升主動脈至降主動脈并分離主動脈弓上3條分支，結(jié)扎兩側(cè)頸總動脈及弓下血管分支，在兩側(cè)鎖骨下動脈分叉點(diǎn)處結(jié)扎切斷。于主動脈瓣遠(yuǎn)端結(jié)扎升主動脈，向遠(yuǎn)端灌注乳酸林格氏液10ml，切

溶血性貧血動物模型2019/01/17: 溶血性貧血動物模型溶血性貧血是由于紅細(xì)胞破壞增多、增速，超過造血代償能力時(shí)所發(fā)生的一組貧血。紅細(xì)胞的平均壽命為15～20d，紅細(xì)胞破壞速度遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過骨髓的代償潛力時(shí)，則出現(xiàn)貧血。溶血性貧血發(fā)病的基本問題是紅細(xì)胞壽命縮短，易于破壞。主要通過以下三方面的機(jī)制：紅細(xì)胞膜的異常變化；血紅蛋白的異常；機(jī)械性因素。1乙酰苯肼誘發(fā)的溶血性貧血大鼠模型(1)復(fù)制方法體重為180～250g的雄性大鼠，大鼠常規(guī)飼養(yǎng)，自由飲水和進(jìn)食。分別于造模的1,4,7日經(jīng)腹腔注射2％乙酰苯肼(Acetylphenylhydrazi

急性脊髓損傷動物模型2019/01/16: 急性脊髓損傷動物模型1脊髓背側(cè)損傷模型(1)復(fù)制方法Allen于1911年采用重物墜落撞擊脊髓背側(cè)，開創(chuàng)了脊髓損傷的標(biāo)準(zhǔn)化實(shí)驗(yàn)研究。其方法是背部正中切開，切除椎板，顯露脊髓硬膜。將重量重物從某一高度自由墜落，打擊于脊髓上，致脊髓損傷，其沖擊量以勢能克厘米gel(gram-cmforce)表示。(2)模型特點(diǎn)WD法的優(yōu)點(diǎn)為：①與人類脊髓損傷的性質(zhì)相近。②脊髓損傷節(jié)段可以通過手術(shù)限度，撞擊力可以定量。③硬脊膜仍完整，可防止結(jié)締組織、組織間液或其他外源成分侵入脊髓損傷區(qū)。WD法也存在不足之處：①尚不能

（EAE）動物模型2019/01/16: 反應(yīng)性腦脊髓炎(EAE)動物模型反應(yīng)性腦脊髓炎動物的癥狀、病理改變及免疫學(xué)特征與人類的脫髓鞘疾病如：多發(fā)性硬化癥(multiplesclerosis,MS)、急性播散性腦脊髓炎相似，常被看作是這類疾病的動物模型。Rivers等于1933年采用多次肌肉注射兔腦提取物的方法，次成功建立了反應(yīng)腦脊髓炎(experimentalallergicencephalomyelitis,EAE)模型。隨后Morgan和Kabat又把福氏佐劑(Freundadjuvant,FA)引入到EAE的建立過程中，即把抗原

大鼠不同程度腦損傷模型2019/01/16: 大鼠不同程度腦損傷模型(1)復(fù)制方法健康雄性大鼠，體重為230～260g。采用改進(jìn)的Feeney自由落體硬膜外撞擊方法。損傷裝置由底板、固定支架、垂直導(dǎo)桿、下落擊錘和聚乙烯撞擊圓錐組成。撞擊圓錐頭端直徑為4mm、高為2.5mm。經(jīng)腹腔注射水合氯醛(按350～400mg/kg體重的劑量)或戊丨巴丨比丨妥丨鈉(按50～60mg/kg體重的劑量)麻醉。將其頭部固定于立體定向儀上，剪去頂部毛發(fā)，手術(shù)區(qū)域皮膚消毒。沿中線左側(cè)切開頭皮，分離骨膜，用牙科鉆于中線旁2mm、緊挨冠狀縫后開一直徑5mm的圓形窗，硬

高質(zhì)量RNA提取條件之二2019/01/16: 1.選擇好的RNA分離方法現(xiàn)有眾多的RNA分離方法也許令人難以取舍。目前簡單也是安全的方法是柱式分離，如RNApure因?yàn)椴僮骱唵危瑫r(shí)間短，純度高而受到大家的喜愛，RNApure不需要DNA酶消化DNA，節(jié)省了時(shí)間，避免RNA的降解，從而提高了產(chǎn)量；相對非柱式分離（如TRIZOL），去除蛋白及其他雜質(zhì)干凈，提高了純度，對于細(xì)胞、組織、一般植物均非常適合。植物RNA的提取比較難抉擇，植物RNA提取受酚、多糖、蛋白雜質(zhì)、次生代謝物含量的影響，一般用TRIZOL提取純度不高，而且很多植物用TRIZOL

科研中的miRNA研究方法總結(jié)2019/01/16: 科研中的miRNA研究方法總結(jié)microRNA(miRNA)是一類長度在22nt左右的內(nèi)源非編碼小RNA，廣泛存在于動物、植物、病毒等多種有機(jī)體中。1993年，Lee等人在秀麗新小桿線蟲(C.elegans)中發(fā)現(xiàn)了控制著線蟲時(shí)序性發(fā)育的lin-4。2000年，Reinhart等發(fā)現(xiàn)了另一個(gè)具有轉(zhuǎn)錄后調(diào)節(jié)功能的小分子RNA：let-7。隨后的幾年時(shí)間里，許多研究人員相繼發(fā)現(xiàn)了這類RNA，并將這些具有時(shí)空表達(dá)特異性的非編碼小分子RNA命名為microRNA(miRNA)。從長的初級miRNA(pr

科研有六重境界，你到第幾重了？2019/01/16: 臨淵羨魚階組里的前輩們看起來個(gè)個(gè)都是牛人，各有各的事業(yè)，可是喂~誰來提挈小生則個(gè)！導(dǎo)師：“在咱們這個(gè)組的大框架下自己找個(gè)坑填上去~”——坑在哪？師姐：“問我問題之前不能先自己查一下嘛？你這個(gè)問題明明有現(xiàn)成答案呀~”——上哪查師兄：“去去去，小孩子一邊看文獻(xiàn)去！”——看不懂~_看什么文獻(xiàn)，怎么看？專業(yè)術(shù)語不懂怎么辦？好吧，大不了啃字典，先把組里發(fā)過的文章都過一遍好了。終于有一天組會討論時(shí)，哇我居然聽懂了躍躍欲試階已經(jīng)能相當(dāng)熟練地在知網(wǎng)、NCBI等數(shù)據(jù)庫上查到自己想要的信息了，儀器不用會時(shí)也會查說明

八臂迷宮實(shí)驗(yàn)2019/01/16: 一、八臂迷宮實(shí)驗(yàn)原理八臂迷宮（8-ArmMaze）用來檢測藥物或大腦受損狀態(tài)下學(xué)習(xí)和記憶方面的表現(xiàn)，它由八個(gè)相同的臂組成，這些臂從一個(gè)平臺放射出來，所以又被稱為放射迷宮（RadialMaze）。每個(gè)臂盡頭有食物提供裝置，根據(jù)分析動物取食的策略即進(jìn)入每臂的次數(shù)、時(shí)間、正確次數(shù)、錯(cuò)誤次數(shù)、路線等參數(shù)可以反映出實(shí)驗(yàn)動物的空間記憶能力。相對而言，八臂迷宮操作簡便、可行，而且能區(qū)分短期的工作記憶和長期的參考記憶，現(xiàn)已被用于學(xué)習(xí)記憶認(rèn)知實(shí)驗(yàn)功能評價(jià)。二、八臂迷宮實(shí)驗(yàn)方法及應(yīng)用1)動物適應(yīng)實(shí)驗(yàn)環(huán)境1周后，稱重

Y迷宮實(shí)驗(yàn)2019/01/16: 一、Y迷宮實(shí)驗(yàn)（Y-Maze）原理Y-迷宮由DelluF等發(fā)明，被應(yīng)用于功能減退、趨向性、空間工作記憶等研究領(lǐng)域。Y迷宮主要用于研究嚙齒類動空間工作記憶，其是利用實(shí)驗(yàn)動物對新異環(huán)境探索的天性，由于動物每次轉(zhuǎn)換探索方向時(shí)都需要記住前一次探索過的方向，因此Y型迷宮實(shí)驗(yàn)?zāi)軌蛴行У販y定動物的空間工作能力。二、Y迷宮實(shí)驗(yàn)介紹Y形迷宮（Ymaze）即為三等分輻射式迷宮，由三個(gè)支臂一個(gè)連接區(qū)組成，三臂相互夾角為120°，每臂末部鋪以食物槽，用以盛放食物。各臂可依次分為起步區(qū)、錯(cuò)誤臂以及正確臂。一般將動物經(jīng)訓(xùn)練

曠場實(shí)驗(yàn)2019/01/16: 一、曠場實(shí)驗(yàn)介紹曠場實(shí)驗(yàn)是利用動物對新開闊環(huán)境的恐懼而主要在周邊區(qū)域活動，在區(qū)域活動較少，但動物的探究特性又促使其產(chǎn)生在區(qū)域活動的動機(jī)，也可觀察由此而產(chǎn)生的焦慮心理。藥物可以明顯增加自主的活動而減少探究行為，劑量的抗精神病藥物可以減少探究行為而不影響自主活動。二、曠場實(shí)驗(yàn)原理該實(shí)驗(yàn)（openfieldtest)又稱敞箱實(shí)驗(yàn)，是評價(jià)實(shí)驗(yàn)動物在新異環(huán)境中自主行為、探究行為與緊張度的一種方法。以實(shí)驗(yàn)動物在新奇環(huán)境之中某些行為的發(fā)生頻率和持續(xù)時(shí)間等，反應(yīng)實(shí)驗(yàn)動物在陌生環(huán)境中的自主行為與探究行為，以尿便次

采用D-半乳糖誘導(dǎo)白內(nèi)障模型2019/01/16: (1)復(fù)制方法將D-半乳糖用生理鹽水配制成50％注射液，常規(guī)滅菌后待用；復(fù)方托品酰胺滴眼劑供鏡檢前擴(kuò)瞳用。用3周齡體重25g左右大鼠，經(jīng)復(fù)方托品酰胺滴眼劑散瞳后，裂隙燈檢查晶狀體透明。造模大鼠均采用常規(guī)消毒，然后于頸背部每日經(jīng)皮下按30ml/kg體重的劑量注射50％半乳糖，每天1次，連續(xù)30d。于次注射后第7,14,21,30日分別以復(fù)方托品酰胺滴眼劑散瞳后用裂隙燈觀察晶狀體的動態(tài)變化。(2)模型特點(diǎn)注射D-半乳糖7d后，大鼠開始出現(xiàn)白內(nèi)障早期改變，即晶狀體周邊皮質(zhì)出現(xiàn)空泡；給藥14d、21d及

腎虛黃體抑制動物流產(chǎn)模型2019/01/16: (1)復(fù)制方法雌性成年大鼠與雄性大鼠隔夜同籠飼養(yǎng)交配，次日早晨觀察交配后陰栓脫落情況，將發(fā)現(xiàn)陰栓日定為妊娠1日，然后單籠常規(guī)飼養(yǎng)，自由飲水及進(jìn)食。妊娠1～10日，孕鼠每日按450mg/kg體重的劑量灌服羥基脲以造成腎虛模型，在妊娠10日按3.75mg/kg體重的劑量灌注米非司酮以造成流產(chǎn)模型。腎虛模型大鼠妊娠后出現(xiàn)納差、活動減少、反應(yīng)遲鈍、體重呈負(fù)增長。孕鼠體內(nèi)過氧化物歧化酶(SOD)減少，蛻膜孕激素受體表達(dá)下降。(2)模型特點(diǎn)羥基脲是核苷酸還原酶抑制劑，使用后使大鼠SOD明顯減少。有研究提示自

脾虛黃體抑制動物流產(chǎn)模型2019/01/16: (1)復(fù)制方法雌性成年大鼠與雄性大鼠隔夜同籠飼養(yǎng)交配，次日早晨觀察交配后陰栓脫落情況，將發(fā)現(xiàn)陰栓日定為妊娠1日，然后單籠常規(guī)飼養(yǎng)，自由飲水及進(jìn)食。妊娠1～10日，孕鼠每日按0.15mg/kg體重的劑量肌注利血平建立脾虛模型，在妊娠第10日按3.75mg/kg體重的劑量經(jīng)口灌注米非司酮以造成流產(chǎn)模型。脾虛大鼠造模第5日即出現(xiàn)納差、嗜睡、便軟、肛門污穢等脾虛癥候，形體消瘦，體重減輕，流產(chǎn)率增加。部分流產(chǎn)子宮內(nèi)見淤血，胎盤不完整；流產(chǎn)子宮呈竹節(jié)樣改變。光鏡下，流產(chǎn)模型子宮蛻膜組織壞死出血。卵巢黃體直徑

自身免疫性內(nèi)耳病動物模型2019/01/16: 自身免疫性內(nèi)耳病動物模型(1)復(fù)制方法取4周齡近交系雄性C57BL/6小鼠，以及體重為300～400g，經(jīng)檢查耳郭反射正常，無中耳感染的豚鼠。豚鼠麻醉后心臟灌注，斷頭取顳骨，在4℃無菌含1mg/L抑肽酶的10mmol/LTris緩沖液中剝離全部內(nèi)耳膜性組織，勻漿。勻漿液離心，取上清液-20℃凍存；沉淀在含0.5％十二烷基硫酸鈉、0.5％β-巰基乙醇、1％甘油、2mmol/L苯甲丨基丨磺丨酰丨氟、10mmol/LN-己基順丁烯二甲亞胺的50mmol/LTris緩沖液中勻漿，計(jì)算蛋白含量，-80℃分

神經(jīng)性耳聾動物模型2019/01/16: 神經(jīng)性耳聾動物模型(1)復(fù)制方法健康普通級雜色豚鼠，雌雄不拘，體重為400～500g，耳郭反射靈敏.耳鏡檢查排除外耳、中耳炎癥。方法①：G-菌內(nèi)毒素脂多糖1g/L,顯微鏡下實(shí)驗(yàn)組每只動物經(jīng)雙耳鼓膜注入大腸桿菌脂多糖；對照組注入等量生理鹽水做對照。方法②：經(jīng)肌肉注射卡那霉素(或慶大霉素)400mg/kg體重，1次/d，共7～10d。分別檢查造模前和造模后1d、10d耳郭聽力反射和腦干誘發(fā)電位。處死動物，解剖耳顳部組織，從圓窗及蝸尖分別灌注1％硝酸銀或3％戊二醛固定，作耳蝸鋪片及掃描電鏡觀察。(2)

骨關(guān)節(jié)炎動物模型2019/01/16: 骨關(guān)節(jié)炎(osteoarthritis,OA)是中老年人常見的一種慢性進(jìn)行性疾病。是由于關(guān)節(jié)軟骨退行性改變(退變)和關(guān)節(jié)表面邊緣形成新骨的退行性病變，其病因、分子生物學(xué)、早期診斷和治療均存在問題，需要進(jìn)一步研究。骨關(guān)節(jié)炎動物模型無疑是研究人類骨關(guān)節(jié)炎病理機(jī)制和防治方法的良好工具。骨關(guān)節(jié)炎動物模型有的是自發(fā)的，也可通過關(guān)節(jié)制動、手術(shù)改變關(guān)節(jié)應(yīng)力、破壞關(guān)節(jié)血液循環(huán)、關(guān)節(jié)內(nèi)藥物注射、關(guān)節(jié)內(nèi)植入軟骨碎片等方法建立。1自發(fā)性動物模型(1)C57BL小鼠自從20世紀(jì)40年代Silberberg先發(fā)現(xiàn)C57B

卵蛋白性關(guān)節(jié)炎模型2019/01/16: (1)復(fù)制方法將卵蛋白溶解于生理鹽水配成20g/L的溶液，然后與等量弗氏佐劑充分混合。動物背部皮下注射，1次/周，連續(xù)3周致敏，末次注射后2周于關(guān)節(jié)內(nèi)注入5mg溶解的卵蛋白。(2)模型特點(diǎn)注射后24h內(nèi)，模型動物注射部位關(guān)節(jié)出現(xiàn)紅腫熱痛等急性炎癥的表現(xiàn)。卵蛋白誘發(fā)的關(guān)節(jié)炎模型的病理改變有增生、血管翳形成和軟骨及骨破壞。*階段為關(guān)節(jié)內(nèi)注入抗原后24h關(guān)節(jié)腫脹。關(guān)節(jié)直徑可增加32％，病理表現(xiàn)為急性滑膜炎，大量滲出液。隨后關(guān)節(jié)腫脹有所減輕，但仍比正常關(guān)節(jié)腫大。第二階段為1～4周，關(guān)節(jié)滑膜明顯增生，血管

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