月桂酸致大鼠閉塞性脈管炎動物模型

(1)復(fù)制方法  體重為280～320g雄性Wistar大鼠，按35mg/kg體重的劑量腹腔注射3％的戊丨巴丨比妥丨鈉麻醉。動物仰臥固定分離右股動脈，并用動脈夾于股動脈中段阻斷血液。然后注入月桂酸，注入的總體積為0.2ml。先在動脈夾的下方1.0cm處近心端方向注入月桂酸，然后再向股動脈遠(yuǎn)心端方向注入余下的月桂酸。注入的標(biāo)準(zhǔn)為血管明顯充盈，略顯白色而無明顯腫脹時，注入結(jié)束時注射器的取出動作要輕柔。注入月桂酸15min后打開動脈夾，復(fù)通血流，并觀察出血和止血情況。待動物止血、手術(shù)側(cè)肢體出現(xiàn)明顯改變后可將各層組織逐層縫合。大鼠股動脈注入月桂酸后約5min，患側(cè)足爪部皮膚溫度降低，皮膚顏色變蒼白繼而變青紫，動脈搏動減弱或消失，次日受累的足跖變黑，并逐漸向上發(fā)展，形成壞疽和木乃伊化。少數(shù)動物術(shù)后表現(xiàn)為患肢水腫，糜爛及炎癥反應(yīng)。大鼠手術(shù)后均有患肢疼痛、跛行和曳行現(xiàn)象，2周內(nèi)大鼠出現(xiàn)患肢壞疽部分脫落，脫落率為90％。病理檢查發(fā)現(xiàn)，大鼠患肢動脈內(nèi)均有不同程度的血栓形成，動脈內(nèi)皮出現(xiàn)不同程度的增生，中膜與外膜還出現(xiàn)了明顯的炎細(xì)胞浸潤。該模型的評價分為整體評價以及病理學(xué)評價：整體評價主要對患肢腫脹程度、壞疽和木乃伊化病變程度以及范圍進(jìn)行分級評定(0級：正常；1級：病變局限于趾甲部；2級：病變局限于趾部；3級：病變局限于足爪部；4級：病變局限于膝關(guān)節(jié)以下；5級：病變局限于膝關(guān)節(jié)以上)；在病理評價方面，將模型致殘大鼠整個右下肢取下后用10％的甲醛固定，3d后再用10％的硝酸脫鈣。將足趾、踝關(guān)節(jié)上、下及股部4個部位進(jìn)行橫斷切片，HE染色，每個標(biāo)本分別取4張四部位切片放在一個病理切片上，然后在顯微鏡下對動脈血栓情況進(jìn)行分級(0級：無血栓；1級：1個血栓；2級：2～3個血栓；4級：4個以上血栓)，同時分別對動脈壁炎性細(xì)胞浸潤、纖維增生及血栓肌化與再通等情況進(jìn)行觀察。

(2)模型特點  本模型通過動脈內(nèi)直接注射月桂酸造模，因此模型的成功率較高，方法簡單，重復(fù)性和穩(wěn)定性都很好，試劑價廉易得，尤其是通過這種多部位、半定量的統(tǒng)計學(xué)檢查，提高了實驗數(shù)據(jù)的科學(xué)性，結(jié)果可靠。

(3)比較醫(yī)學(xué)  本模型與采用ZT醫(yī)用膠造模方法相比，造模后術(shù)區(qū)感染率低，切口延期愈合率低，避免了ZT膠這種異體抗原本身的刺激反應(yīng)及其所引起的各種異體抗原炎性反應(yīng)直接造成的對股動脈的壓迫。此模型復(fù)制的動物，符合人體TAO病理狀態(tài)下的血管閉塞機(jī)理，其癥狀、體征及病理組織學(xué)改變與臨床TA0患者的改變基本吻合。