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上海申知心生物科技有限公司
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旋轉圓筒睡眠剝奪法2019/03/15
旋轉圓筒睡眠剝奪法(1)復制方法設備主要由一柱形圓筒及一小型慢速馬達構成,圓筒直徑30cm、高30cm,圓筒底由PVC(聚氯乙烯)構成,側壁由直徑為1.04cm的PVC桿圍成,桿的長度為30cm,桿之間間隔為1.55cm。圓筒與小型馬達相連,馬達轉速為1圈/45s。至少在實驗前2d,每天將大鼠放入圓筒中適應環境1次,適應時間不少于3h。實驗時將馬達按1圈/45s進行勻速轉動,通過圓筒的轉動帶動大鼠不停運動而達到睡眠剝奪的目的。在此類方法的基礎上發展出多種變化,Marcos等在進行新生大鼠睡眠剝奪
脊髓壓迫損傷模型2019/03/07
脊髓壓迫損傷模型脊髓壓迫是導致脊髓損傷的重要原因之一,該損傷模型主要為模擬椎管內占位性病變造成的脊髓損傷,可分為急性壓迫傷和慢性壓迫傷。一般是通過異物植入的方式造成壓迫,如植入膨脹的球囊、不銹鋼螺釘、腫瘤細胞、硅膠片等。急性壓迫的病理生理過程與脊髓撞擊模型較為相似;慢性脊髓壓迫為非瞬間損傷,便于進行神經功能和代謝改變的檢測。根據擠壓或者壓迫方式和持續時間的不同,脊髓壓迫又可以分為很多種,如腹側和背側壓迫損傷模型、靜力性的壓迫和動力性的壓迫等。壓迫的力量可通過氣囊、液囊、動脈鉗夾、重物壓迫、鑷子擠
脊髓挫傷模型2019/03/07
脊髓挫傷模型脊髓挫傷(contusioninjury),運用重物墜落的方法復制脊髓挫傷模型,具體方法是用具有一定質量的重錘沿一套管垂直落下,并打擊特定脊髓節段而導致的損傷。此方法可以通過調節重物下落的高度、重物的質量等因素來調節、控制下墜撞擊力的大小,或者限定受到撞擊的脊髓節段,從而復制出不同程度、不同類型的脊髓挫傷模型。目前研究認為,該方法具有以下特點。(1)保持了硬脊膜的完整性,可以有效防止外源性成分侵入損傷區域,同時防止脊髓外露及腦脊液外漏。該種模型較接近人類脊髓損傷的病理生理特點及變化規
震顫素和氧化震顫素致顫模型2019/03/01
震顫素和氧化震顫素致顫模型(1)復制方法選用雄性小鼠,體重為18~22g。按0.5mg/kg體重的劑量經皮下注射氧化震顫素可引起震顫,潛伏期約5min,持續時間2~3h。標準對照藥可選用阿托品或東莨菪堿。在給氧化震顫紊前、給藥后1,2和3h各測定肛溫一次。(2)評分標準震顫程度:給予氧化震顫素后15,30,60min和2h對震顫進行評分。0級:無震顫;1級:輕度;2級:中度;3級:重度。流涎和流淚:給予氧化震顫素后15和30min對流涎和流淚進行評分。0級:無涎流淚;1級:輕度;2級:中度;3級
轉基因動物模型2019/03/01
轉基因動物模型(1)復制方法主要采用轉基因技術建立該模型。(2)模型特點目前已制備成功的PD遺傳模型主要有α-synuclein轉基因小鼠和轉基因果蠅。高表達人類α-synuclein的轉基因小鼠具有PD的部分特征,如紋狀體DA神經末梢丟失,在胞漿有α-synuclein和ubiquitin陽性的包涵體形成,運動功能障礙。這些轉基因小鼠包涵體與人類Lewy小體有差別,主要表現在缺乏纖維樣結構特征。有時在細胞核內也可見到包涵體,這與人類PD明顯不同。一些轉基因小鼠只有包涵體形成和運動功能障礙但無D
強迫運動睡眠剝奪法2019/03/01
強迫運動睡眠剝奪法此類睡眠剝奪方法形式多樣,在腦電監護情況下可行“全部的睡眠剝奪”(totalsleepdeprivation,TSD)和“選擇性的睡眠剝奪”(selectivesleepdeprivation,SSD),其共同特點是通過動力裝置“迫使大鼠不停地運動”從而達到睡眠剝奪的目的。此類方法的優點是睡眠剝奪效果明顯,睡眠剝奪的時間及強度易于掌握,重復性好,無須實驗人員隨時觀察實驗情況,減輕了實驗人員的工作強度。缺點是長時間運動引起機體的一系列應激反應,可能干擾睡眠剝奪的實驗結果。
家兔常用品系2019/03/01
家兔常用品系目前,在上實驗用兔多達數十個品種,但主要品種是新西蘭白兔(NewZealandwhite)和弗萊密希兔(Flemishgiant)等品種。雖然,在上培育成功并保存有一部分近交品系,但并不都是用兄妹交配20代以上的方法培育成功的。我國比較常用的實驗家兔品種有日本大耳白兔、新西蘭白兔、青紫藍兔和中國白兔四個品種。1983年,衛生部確定日本大耳白兔和新西蘭白兔為全國衛生系統通用的實驗家兔品種。另外有些地區和單位還使用青紫蘭兔和中國白兔作為實驗動物。(一)日本大耳白兔原產日本,用中國兔與日本
蒙古沙土鼠遺傳性癲癎模型2019/02/22
蒙古沙土鼠遺傳性癲癎模型(1)復制方法將發作敏感的蒙古沙土鼠單個分籠飼養,自由飲食飲水。室內除一般衛生條件要求外,應保持安靜,給予飲食時不要造成噪聲或移動籠子,以免引起驚厥發作。每周測定一次發作強度,測定時,只要將籠子拿起,輕輕搖動或將其由籠拿出放在桌面上,就可引起發作,記錄發作程度。一次發作后有一為期3~5d的潛伏期,此時給予任何刺激也不引起發作。(2)模型特點動物的發作程度可分為6個等級:0級,無發作,活動正常;1級,鼻毛和眼瞼抽動,耳伏背上,活動停止;2級,動物身體下伏,前肢輕度陣攣,時而
聽源性發作癲癎模型2019/02/22
聽源性發作癲癎模型聽源性發作主要是一些聽源發作敏感的嚙齒類動物在受到鈴聲刺激時,產生的一種典型的運動性發作。目前常用的聽源發作敏感小鼠有DBA/2J,A/J和隊LB/L3個純種,國內應用較少。國內有P77-PMC聽源性發作敏感大鼠,發作率達80%以上,其特點是生后2~3周開始發作,性成熟時達高峰,以后維持終生,反復發作也不死亡。在國內現已廣泛用于抗癲癎藥物和癲癎發病原理等的研究。(1)復制方法實驗裝置是由雙層有機玻璃圓筒制成的聽源性發作儀,其外筒直徑為50cm,高65cm,內筒可以自由移動,直徑
點燃引起的慢性實驗性癲癎模型2019/02/22
點燃引起的慢性實驗性癲癎模型(1)復制方法健康雄性大鼠,體重為250~300g。以水合氯醛(按350~400mg/kg體重的劑量)(按50~60mg/kg體重的劑量)經腹腔注射麻醉后,固定在立體定位儀上。剪去頭頂部毛發,手術區域皮膚消毒。無菌條件下沿正中線將皮膚切開1cm,按大鼠立體定位圖譜標好杏仁核立體坐標位置(坐標定位:AP2mm,ML2mm,DVR8.5mm)。用小型牙鉆鉆透骨面,將長度為8.5mm的杏仁核刺激電極徐徐插入杏仁核。同時在顱骨正中線左右各旁開4mm,前后各10mm處安放4個皮
其他基因敲除和轉基因動物模型2019/02/16
其他基因敲除和轉基因動物模型(1)進行性肌陣攣癲癎(PME)綜合征模型即CystatinB基因敲除小鼠模型。CystatinB基因編碼一種Cystatin蛋白激酶的抑制劑——CystatinB,基因敲除則CystatinB不能表達,而U-L型PME患者均有此基因的突變及功能缺失。Cystatin敲除小鼠與U-L型PME患者的神經表型有特殊的重疊。(2)Sharker型延遲整流鉀通道基因敲除小鼠模型根據K+通道阻斷可以導致癲癎而設計的基因敲除模型,此型動物出現嚴重的強直-陣攣發作,易導致早期死亡。
神經系統疾病動物模型2019/02/16
神經系統疾病動物模型人類疾病的發展十分復雜,以人本身作為實驗對象來深入探討疾病發生機制,推動醫藥學的發展之過程緩慢,臨床積累的經驗不僅在時間和空間上都存在局限性,而且許多實驗在道義上和方法上也受到限制。而借助于動物模型的間接研究,可以有意識地改變那些在自然條件下不可能或不易排除的因素,以便更準確地觀察模型的實驗結果,并與人類疾病進行比較研究,有助于更方便、更有效地認識人類疾病的發生、發展規律,研究防治措施。人類疾病動物模型(animalmodelofhumandisease)是指各種醫學科學研究
藥物代謝基因人源化小鼠2019/01/17
藥物代謝基因人源化小鼠小鼠是目前開展藥物臨床前評估常用的實驗動物,然而小鼠實驗結果與臨床試驗結果存在著不少的差異,限制了小鼠試驗結果的前瞻性與可比性,其主要原因是藥物代謝酶存在明顯的種屬差異。改進藥物實驗用的小鼠動物模型的主要途徑為藥物代謝基因人源化小鼠。在小鼠體內轉入人的藥物代謝基因細胞色素酶P450家族的CYP3A基因組大片段和人藥物誘導基因孕烷X受體(pregnaneXreceptor,PXR)基因組片段,實現CYP3A在酶活性、表達模式及誘導表達活性的人源化,創制新一代CYP3A人源化小
小鼠作人類疾病動物模型的優勢2019/01/17
小鼠作人類疾病動物模型的優勢小鼠作人類疾病動物模型的優勢在沒有特別理由的情況下,小鼠為復制人類疾病動物模型和研究基因功能的模式動物。小鼠作為模式生物的優點有:小鼠有許多近交系、突變系;小鼠ES細胞技術相當成熟;用基因修飾技術能非常有效地修飾小鼠基因組;基因修飾小鼠品系種類繁多,使小鼠成為模式生物之一;廣泛用于發育生物學、功能基因組學和疾病機制的研究領域。1.小鼠基因組與人類基因組高度同源從進化的角度上來看,小鼠作為哺乳動物的代表,有其不可動搖的地位。除了小鼠以外的其他4種模式動物(斑馬魚、爪蟾、
局灶性腦缺血動物模型2019/01/17
局灶性腦缺血動物模型大腦中動脈(Middlecerebralartery,MCA)是人類腦卒中的多發部位,大腦中動脈閉塞(Middlecerebralarteryocclusion,MCAO)模型被普遍認為是局灶性腦缺血的標準動物模型,主要方法有線栓法、電凝法、光化學法和血栓栓塞法。1線栓法(threadocclusionofthemiddlecerebralartery)(1)復制方法雄性SD大鼠,體重為250~300g。經腹腔注射水合氯醛(350~400mg/kg體重的劑量)或戊丨巴丨比丨妥
腦缺血耐受動物模型2019/01/17
腦缺血耐受動物模型腦缺血耐受現象(ischemictolerancephenomenon,ITP)是指預先使腦產生亞致死性缺血。使得大腦神經元增加對隨后發生的致死性缺血的耐受,從而阻止了腦缺血后遲發性神經元死亡的發生,對腦缺血的損害產生保護作用。Kitagawa等于1990年在沙土鼠前腦缺血模型中發現,將雙側頸動脈血流阻斷5min,即可引起海馬CA1區神經元恒定的遲發性壞死。如提前2d給予2min短暫的、非致命性腦缺血,可對1~7d后的嚴重致命性腦缺血產生部分保護作用;如間隔1d,給予2次2mi
不開胸制備兔縮窄性心包炎模型2019/01/17
不開胸制備兔縮窄性心包炎模型(1)復制方法體重為1.5~2.0kg新西蘭兔,動物行仰臥固定,用2%普魯卡因局部浸潤麻醉。在其上腹部正中作一個小切口,取0.5g左右肝組織檢查肝臟含水量。然后,胸前正中切口約2cm,緊貼胸骨和左旁肋骨推開胸前肌至胸骨旁1.5cm,將肋間肌切開處上下肋骨向兩側拉開,避開胸膜,顯露心包裸區;用7號腰穿針于劍突下經皮向心尖方向水平位穿刺,由心包膈面進入心包腔。按1ml/kg體重注入誘導劑(誘導劑配制為:無菌滑石粉4g、四環素粉1g,加入1.5%碘酊20ml中,制成混懸液)
電刺激犬冠狀動脈引起的心肌梗死模型2019/01/17
電刺激犬冠狀動脈引起的心肌梗死模型(1)復制方法實驗犬稱重后用3%戊丨巴丨比丨妥丨鈉按30mg/kg的劑量靜脈注射麻醉,插入氣管導管。動物行右臥位固定,分離股動脈和股靜脈,分別用于測定外周動脈壓和給受試樣品以及補充麻醉[3%戊丨巴丨比丨妥丨鈉10ml加入500ml生理鹽水,以5ml/(kg·h)的速度給予]。分離右頸靜脈插管用于靜脈滴注肝素。從4、5肋間開胸,剪開心包,暴露心臟,分離左旋支(LCX),從根部到主分支,其余的小分支均結扎,分離長度近2cm,鉤上合適的電磁流量計探頭(2mm左右),連
化膿性心包炎動物模型2019/01/17
化膿性心包炎動物模型(1)復制方法體重為2.0~2.5kg新西蘭兔,將動物仰臥位固定后,用1%鹽酸普魯卡因局部浸潤麻醉,無菌手術作胸正中切口,橫斷肋骨,牽拉結扎線,顯露心包裸區。用7號針在劍突下經皮向心尖方向刺入心包腔,注入1000000000個/ml青霉素敏感金葡菌溶液或生理鹽水1ml/kg。縫合切口。全部動物于術后21d麻醉放血處死。取心尖部的右室全層心肌3塊,肝、肺組織各1塊,心包1塊作病理學檢查。心包化膿粘連增厚程度的制定標準及量化。按心表面分為四區:心尖部、左心部(左心房及左心室),右
皮膚過敏動物模型2019/01/17
皮膚過敏動物模型(1)復制方法體重為200~250g,4~5周齡的白色豚鼠,造模1和8日各進行1次致敏接觸,第15日進行激發。模型動物皮內注射5%三氯乙烯橄欖油溶液,涂皮誘導濃度為40%,激發濃度為20%。于激發后24h觀察和記錄模型動物皮膚反應情況,隨后麻醉動物并采血,無菌取皮膚固定后作常規組織切片,染色后光鏡下觀察。(2)模型特點模型動物血清總IgG含量明顯升高,大多數豚鼠皮膚可出現紅斑及水腫反應;鏡下病理組織學觀察結果顯示,模型動物表皮棘細胞層增厚,內毛細血管擴張并可見水腫,同時有嗜酸粒細
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