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不規(guī)則抗體檢查的臨床意義2014/12/18
不規(guī)則抗體檢查的臨床意義不規(guī)則抗體檢查也稱紅細胞抗體檢查,是指不符合ABO血型系統(tǒng)的血型抗體,即抗A、抗B以外的血型抗體。ABO系中的亞型,變異型抗A1或某種抗B等抗體,也稱為不規(guī)則抗體,多數(shù)為IgG抗體。主要是經(jīng)輸血或妊娠等免疫刺激產(chǎn)生,在鹽水介質(zhì)中不能凝集而只能致敏相應抗原的紅細胞,必須通過特殊介質(zhì)(酶、抗人球蛋白、聚凝胺等,才能使致敏紅細胞出現(xiàn)凝集反應。臨床上所稱的“同型血”實際上是指ABO血型系統(tǒng)和Rh血型系統(tǒng)相同,其它紅細胞血型系統(tǒng)未必相同。如果交叉配血不仔細,或只用鹽水介質(zhì)配血,則有
Abcam 抗體如何保存?2014/12/18
Abcam抗體如何保存?抗體保存與運輸?shù)卯斉c否,直接決定了抗體的活性和使用效果!如果抗體保存得當,大部分抗體活性都可以維持數(shù)月甚至數(shù)年。一.收到抗后請務(wù)必在12000rpm離心1分鐘后再打開管蓋進行分裝和保存(如果抗體體積小于50ul,請延長離心時間至5分鐘,以保證全部抗體均離心下來)!Abcam的抗體使用非常特殊的儲存管,只有在12000rpm離心1分鐘才能將附著在管壁或蓋內(nèi)的抗體全部離心下來。即使是在10000rpm離心也會導致離心不*,導致出現(xiàn)抗體的量不足的現(xiàn)象!二.對于abcam大部分抗
黑膠蟲抑制劑2014/12/17
黑膠蟲抑制劑“黑膠蟲”是近十幾年才發(fā)現(xiàn)的一種細胞污染物,“黑膠蟲”的分類目前尚無鑒定確認。“黑膠蟲”可寄生于動物細胞,也可以生存于培養(yǎng)基中,依靠細胞和培養(yǎng)基中的營養(yǎng)為生,并隨細胞傳代而傳代。“黑膠蟲”與細胞競爭性生長,開始時對細胞并沒有什么影響,但當黑膠蟲的數(shù)量多到一定程度的時候,細胞生長就會受到影響直至死亡,嚴重影響了科研活動的開展和進行。所以“黑膠蟲”的污染常在培養(yǎng)條件改變、細胞接種密度降低、細胞狀態(tài)不佳時顯現(xiàn)并使實驗中斷,尤其在凍存細胞復蘇時可造成大量細胞死亡。目前比較*的觀點認為“黑膠蟲
抗體重排2014/12/16
抗體多樣性的產(chǎn)生—基因重排基因重排的分子機制早在50年代,人們就認識到抗體分子的每一條鏈都是由高度多變的V區(qū)和相對不變的C區(qū)組成的,V區(qū)賦予抗體分子對抗原的特異性。抗體分子V區(qū)的多樣性和C區(qū)的穩(wěn)定性顯然是矛盾的。Dreyer和Bennett于1965年提出假設(shè),認為每條抗體鏈實際上至少由兩個基因所編碼,其中一個是恒定的,一個是可變的。1983年,Tonegawa(Nature,302:575-581)在對產(chǎn)生抗體的骨髓瘤及漿細胞瘤進行研究時發(fā)現(xiàn),產(chǎn)生抗體的細胞中Ig基因結(jié)構(gòu)與其它不合成抗體分子的
培養(yǎng)基分類2014/12/16
一.微生物分類:選擇性培養(yǎng)基:一類根據(jù)某微生物的特殊營養(yǎng)要求或其對某化學、物理因素的抗性而設(shè)計的培養(yǎng)基,具有使混合菌樣中的劣勢菌變成優(yōu)勢菌的功能,廣泛用于菌種篩選等領(lǐng)域。鑒別培養(yǎng)基:一類在成分中加有能與目的菌的無色代謝產(chǎn)物發(fā)生顯色反應的指示劑,從而達到只須用肉眼辨別顏色就能方便的從近似菌落中找出目的菌菌落的培養(yǎng)基。例如,伊紅美藍乳糖培養(yǎng)基(EMB)。二.化學分類:1.天然培養(yǎng)基,指一類利用動、植物或微生物體包括其提取物制成的培養(yǎng)基。如牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基、麥芽汁培養(yǎng)基等。2.組合培養(yǎng)基,又稱為合成
黑膠蟲概況2014/12/15
1、黑膠蟲概況:在細胞培養(yǎng)的時候,有時會在400倍顯微鏡下看到小黑點在動,小黑點有時呈點狀,有時呈小的片狀,運動形式為在原地振動(類似布朗運動),這種小黑點既不是細菌、霉菌,也不是支原體(我們曾經(jīng)請周守長用血平板培養(yǎng)過,沒有菌落出現(xiàn)),目前業(yè)內(nèi)人士稱其為“黑膠蟲”。黑膠蟲到底是否為生物?這個一直是業(yè)內(nèi)人士的疑惑。黑膠蟲一般是存在血清里的,而血清通常是經(jīng)過0.1μm濾膜過濾的,所以血清里不可能存在細菌、霉菌及支原體等微生物。如果說黑膠蟲不是生物,它會不斷增多,達到一定數(shù)量時會與細胞競爭性生長,與細
細胞生物學的特點2014/12/15
細胞生物學的特點在未來的時代細胞生物學仍然是生命科學的領(lǐng)頭學科,是支撐生物技術(shù)發(fā)展的基礎(chǔ)科學。盡管發(fā)現(xiàn)細胞已經(jīng)300多年了,但人類目前對細胞在整體層次上(哪怕是“簡單的”細菌)的工作機理并未獲得一個完整清晰的認識。細胞生物學在如下領(lǐng)域內(nèi)的發(fā)現(xiàn)將為生物技術(shù)帶來新的發(fā)展動力。①對干細胞生長和分化的控制機制的認識或許會帶來治療應用方面的重大突破;②對遺傳基因和生化途徑調(diào)控機制的認識將催生更先進的遺傳修飾方法;③理解細胞感知環(huán)境的機理會有助于研發(fā)具有廣泛應用前景的生物傳感器;④了解細胞骨架和分子馬達的協(xié)
單克隆抗體的種類2014/12/12
單克隆抗體的種類抗體是由B淋巴細胞分化形成的漿細胞合成、分泌的。每一個B淋巴細胞在成熟的過程中通過隨機重排只產(chǎn)生識別一個抗原的抗原受體基因。動物脾臟有上百萬種不同的B淋巴細胞系,重排后具有不同基因不同的B淋巴細胞合成不同的抗體。當機體受抗原刺激時,抗原分子上的許多決定簇分別激活各個具有不同基因的B細胞。被激活的B細胞分裂增殖形成效應B細胞(漿細胞)和記憶B細胞,大量的漿細胞克隆合成和分泌大量的抗體分子分布到血液、體液中。如果能選出一個制造一種專一抗體的漿細胞進行培養(yǎng),就可得到由單細胞經(jīng)分裂增殖而
牛血清白蛋白殘留量測定法2014/12/12
牛血清白蛋白殘留量測定法本法系用酶聯(lián)免疫法測定供試品中牛血清白蛋白(BSA)含量量,以判斷供試品中BSA殘殘留量是否符合規(guī)定的檢測方法。以牛血清白蛋白標準品為標準,采用直線回歸方法計算供試品中牛血清白蛋白含量。供試品溶液的制備供試品如為凍干劑型,檢測前應按標示量復溶后震蕩混勻,室溫靜置30分鐘,檢測前應再次震蕩混勻。供試品如為液體劑型可直接用于檢測。采用試劑盒提供的供試品稀釋液稀釋供試品,供試品應至少進行兩個稀釋度測定,每個稀釋度做雙孔平行測定。測定BSA含量的容器具應,防止實驗室中BSA污染。
新生小牛血清制備2014/12/10
新生小牛血清制備一、目的:為了保障新生小牛血清產(chǎn)品質(zhì)量的均一性和穩(wěn)定性,制定以下操作方法,以規(guī)范新生小牛血清生產(chǎn)制備。二、操作方法:(一)采血挑選出生在48小時以內(nèi)的新生小牛,空腹8小時以上,以便排空腹內(nèi)母乳。將小牛清洗干凈后,側(cè)放在萬級潔凈房間內(nèi)的采血臺上,固定四肢及頭部。用來蘇水清洗小牛頸部,刮去頸部牛毛,露出頸部一側(cè)皮膚,用2%碘酒擦拭消毒。在脖頸處切開一道10~20厘米的切口,避免切到血管,取出血管,用止血鉗夾住血管近心端,在遠心端除去血管包膜,分離出動脈血管,先用2%碘酒消毒,再用75
小牛血清去蛋白注射液2014/12/10
小牛血清去蛋白注射液【藥品名稱】通用名稱:小牛血清去蛋白注射液商品名稱:奧德金英文名稱:DeproteinisdCalfBloodSerumInjection【成份】本品為小牛血清去蛋白提取物、精制而得,內(nèi)含多種游離氨基酸和肽。【性狀】本品為淡黃色的澄明液體。【適應癥】1、改善腦部血液循環(huán)和營養(yǎng)障礙性疾病(缺血性損害、顱腦外傷)所引起的神經(jīng)功能缺損。2、末稍動脈、靜脈循環(huán)障礙及其引起的動脈血管病,腿部潰瘍。3、皮膚移植術(shù);皮膚燒傷、燙傷、糜爛;愈合傷口(創(chuàng)傷、褥瘡);放射所致的皮膚、粘膜損傷。【
透析液的成分有哪些?2014/12/09
透析液的成分有哪些?透析液中各種成分的濃度不是一成不變的,可以根據(jù)透析過程中病人的血漿電解質(zhì)水平及臨床表現(xiàn)作相應調(diào)整。主要成分有鉀、鈉、鈣、鎂、氯、醋酸鹽及碳酸氫鹽、葡萄糖。(l)鈉:是細胞外液中的主要陽離子,是維持血清滲透壓和血容量的主要成分。透析液中的鈉離子是決定透析液滲透壓的主要陽離子,對透析病人的血清鈉濃度和滲透壓有直接影響,通常鈉的濃度為130一150mm0l/L。鈉濃度小于13Omm0l/L的透析液稱為低鈉透析液,而大于150mmoFL的透析液稱為高鈉透析液。在特殊情況下,如糾正高鈉
RPMI1640*培養(yǎng)基2014/12/09
RPMI1640*培養(yǎng)基產(chǎn)品貨號BW12014產(chǎn)品內(nèi)容名稱規(guī)格保質(zhì)期貯藏條件運輸RPMI1640500ml12個月2-8℃避光保存冰袋運輸胎牛血清(FBS)50ml60個月-20℃避光保存青霉素/鏈霉素溶液(P/S)5ml12個月-20℃避光保存使用注意事項1.在配制*培養(yǎng)基前,請把胎牛血清(FBS)、青霉素-鏈霉素(P/S)放到2-8℃冰箱一夜解凍。2.在使用*培養(yǎng)基前,需要把培養(yǎng)基放到37℃恒溫水浴中預熱,注意溫度不要超過37℃。3.請把配制好的*培養(yǎng)基放在4℃冰箱避光保存,并盡量在一個月內(nèi)
牛血清白蛋白的分離純化2014/12/08
牛血清白蛋白的分離純化【實驗目的】掌握牛血清白蛋白分離純化各步驟(分段鹽析、離子交換層析)原理及操作方法。【實驗原理】鹽析法是一種利用蛋白質(zhì)在不同濃度鹽溶液中溶解度不同而分離的方法。通過將鹽類加入到蛋白質(zhì)溶液中,使蛋白質(zhì)表面電荷被中和,水化膜被破壞,導致蛋白質(zhì)在水溶液中的穩(wěn)定性因素去除而沉淀。分段改變鹽類濃度達到分離目的的方法叫分段鹽析法。DEAE-纖維素是一種應用廣泛的陰離子交換劑,它本身帶有正電荷,能不同程度地吸附溶液中的陰離子。層析時使用不同強度或不同PH值的緩沖溶液進行分段洗脫,含負電荷
新生牛血清檢測要求2014/12/08
新生牛血清檢測要求本品系從出生14小時內(nèi)未進食的新生牛采血分離血清,經(jīng)除菌過濾后制成。牛血清生產(chǎn)過程中不得任意添加其他物質(zhì)成分。新生牛血清用于生產(chǎn)前應逐批進行以下檢查,并應符合規(guī)定。蛋白質(zhì)含量應為3.5%~5.0%。血紅蛋白用氰化高鐵法或其他適宜的方法測定。應不高于0.02%。大腸桿菌噬菌體采用噬斑法和增殖法檢測。不得有噬菌體污染。摩爾滲透壓(指標待定)無菌檢查依法檢查,應符合規(guī)定。支原體檢查依法檢查,應符合規(guī)定。細菌內(nèi)毒素檢查應不高于10EU/ml(附錄ⅫE凝膠*試驗)。病毒檢查1.細胞培養(yǎng)法
細胞培養(yǎng)的基本條件2014/12/05
細胞培養(yǎng)基本條件1、合適的細胞培養(yǎng)基合適的細胞培養(yǎng)基是體外細胞生長增殖的zui重要的條件之一,培養(yǎng)基不僅提供細胞營養(yǎng)和促使細胞生長增殖的基礎(chǔ)物質(zhì),而且還提供培養(yǎng)細胞生長和繁殖的生存環(huán)境。2、血清目前,大多數(shù)合成培養(yǎng)基都需要添加血清。血清是細胞培養(yǎng)液中zui重要的成分之一,含有細胞生長所需的多種生長因子及其它營養(yǎng)成分。3、無菌無毒細胞培養(yǎng)環(huán)境無菌無毒的操作環(huán)境和培養(yǎng)環(huán)境是保證細胞在體外培養(yǎng)成功的首要條件。在體外培養(yǎng)的細胞由于缺乏對微生物和有毒物的防御能力,一旦被微生物或有毒物質(zhì)污染,或者自身代謝物
RPMI 1640細胞培養(yǎng)液的配制2014/12/04
RPMI1640細胞培養(yǎng)液的配制配制培養(yǎng)基使用新制備的三蒸水。一般在試驗前當天或前一天制備為好。調(diào)節(jié)pH值的酸堿溶液也應該使用這種水配制。制備培養(yǎng)基的器皿清洗要干凈,烤干后備用(濾器、濾膜、量筒、移液管及盛放培養(yǎng)基的小瓶等存放和轉(zhuǎn)移培養(yǎng)基液體的器具都應進行滅菌)。溶解培養(yǎng)基:將干粉培養(yǎng)基溶于總量1/3的水中,再用水洗包裝袋內(nèi)面兩次,倒入培養(yǎng)液中。振蕩或超聲助溶,一般不要加熱助溶。補加試劑:根據(jù)包裝袋說明和試驗需要加入NaHCO3(2.0g)、谷氨酰胺、丙酮酸鈉、HEPES等其他試劑。加抗生素:一
生物試劑2014/12/04
生物學中常用的試劑:1、斐林試劑:成分:0.1g/mlNaOH(甲液)和0.05g/mlCuSO4(乙液)。用法:將斐林試劑甲液和乙液等體積混合,再將混合后的斐林試劑倒入待測液,水浴加熱或直接加熱,如待測液中存在還原糖,則呈磚紅色。2、班氏糖定性試劑:為藍色溶液。和葡萄糖混合后沸水浴會出現(xiàn)磚紅色沉淀。用于尿糖的測定。3、雙縮脲試劑:成分:0.1g/mlNaOH(甲液)和0.01g/mlCuSO4(乙液)。用法:向待測液中先加入2ml甲液,搖勻,再向其中加入3~4滴乙液,搖勻。如待測中存在蛋白質(zhì),
重組純化蛋白2014/12/03
中文名稱重組純化蛋白A英文名稱RecombProteinA蛋白A是從A類Streptococci細菌中分離出來的胞壁蛋白,與多數(shù)哺乳動物的IgGFc段結(jié)合(包括:人、山羊、綿羊、兔、豚鼠、馬、豬、猴、小鼠等)。不與狗IgG結(jié)合、不結(jié)合人IgM、IgD、和IgA。重組蛋白G(RecombProteinG)已經(jīng)除去了與白蛋白及細胞表面結(jié)合位點,減少了交叉反應和非特異性結(jié)合。因此,它比天然蛋白G和蛋白A有更大的親和力。可以代替二抗,廣泛應用于免疫化學等領(lǐng)域。在親和力、穩(wěn)定性等方面好。蛋白A是從非致病性
抗血清鑒定2014/12/03
抗血清的質(zhì)量直接影響分析方法的特異性和靈敏度。用于鑒定抗血清質(zhì)量的參數(shù)主要有幾項:1.親和性(affinity)是指抗體分子上一個抗原結(jié)合部位與相應的抗原決定簇之間的結(jié)合強度,常用親和常數(shù)Ka表示。Ka是正/逆向反應速度常數(shù)的比值,單位為稀釋度單位(L/mol或LM-1),表示需將lmol抗體稀釋至多少升,才能使抗原—抗體結(jié)合下降50%;而Ka的倒數(shù)為解離常數(shù)(Kd),其單位為濃度單位(mol/L)。為提高放射免疫分析的靈敏度、精密度和準確度,需選用Ka值高(109一1012L/mo1)的抗血清
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