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SGM輻照滅菌芽孢條產品說明2013/03/19

SGMStrip®輻照滅菌芽孢條引言SGMStrip是一種用于監測輻射滅菌周期功效的生物指示劑，SGMStrip含短小芽孢桿菌ATCC271421的孢子。儲存SGMStrip應在室溫下保存。芽孢條不應放置在消毒劑或其他化學品附近，保質期為24個月。防止脫水。培養胰蛋白胨大豆肉湯可以作為孢子的營養培養基。使用1.通過標注相關步驟以及荷載點位置對孢子條做標識。將孢子條放入滅菌產品內部或產品包裝內，并放置在zui難滅菌的點。請參考滅菌器制造商的操作指引手冊。2.在需要消毒的空間放置足夠數量的孢子條。注

Microbiologics公司推薦的各菌種的生長條件2013/03/09

推薦生長條件（適用于KWKK-STIK和LYFODISK產品）如何選擇的菌種生長條件1.zui初的生長是在非選擇性瓊脂培養基上。除非特殊情況或特別推薦，zui初的生長一般不考慮液體培養基。這是由于在液體培養基中獲得凍干菌株的純種比較困難，污染所帶來的雜菌可能會過度生長，影響得到目標菌株的純種。2.以下列出可供選擇的瓊脂培養基和相應的生長條件，供各實驗室培養菌種時參考。方法1ü胰蛋白胨大豆瓊脂，非選擇性羊血瓊脂，標準計數平板，或營養瓊脂-----35℃，正常環境，24-48小時。方法2ü非選擇性羊

PH7.2磷酸鹽緩沖液配制方法2013/03/09

Microbiologics公司的部分菌株產品有自帶的稀釋液，有些就需要自制的PH7.2磷酸鹽緩沖液，實驗室也有很多地方會用到該緩沖液，其配制方法如下：StockSolution—Dissolve34gofmonobasicpotassiumphosphateinabout500mLofwatercontainedina1000-mLvolumetricflask.AdjusttopH7.2±0.1bytheadditionofsodiumhydroxideTS（about175mL）,addw

常見細菌中英文名對照表2013/03/09

Abiotrophiaadjacens毗鄰貧養菌Abiotrophiadefectiva軟弱貧養菌Achromobacterspp無色桿菌屬某些種Acinetobacter/Pseudomonasspp不動桿菌/假單胞菌屬某些種Acinetobacterbaumannii鮑氏不動桿菌Acinetobactercalcoaceticus醋酸鈣不動桿菌Acinetobacterhaemolyticus溶血不動桿菌Acinetobacterjohnsonii約氏不動桿菌Acinetobacterjun

枯草芽孢桿菌感受態細胞的制備實驗2013/03/02

標簽：枯草芽孢桿菌感受態細胞制備枯草芽孢桿菌感受態細胞的制備可以：（1）用于建立枯草芽孢桿菌轉化體系；（2）用于其基因改造；（3）用于提高枯草芽孢桿菌生產性能相關研究。實驗方法化學法化學改進法實驗材料枯草芽孢桿菌168試劑、試劑盒SPI培養基EGTASPII培養基檸檬酸鈉EGTA氫氧化鈉KH2PO4K2HPO4MgCl2MgSO4葡萄糖酵母膏（NH4）2SO4儀器、耗材培養箱培養皿錐形瓶紫外分光光度計接種環離心管實驗步驟一、試劑配制1.SP鹽0.2%（NH4）2SO4，1.4%K2HPO4，0.

酵母感受態細胞制備實驗2013/03/02

標簽：酵母感受態細胞制備酵母感受態細胞制備可以：（1）用于建立酵母轉化體系；（2）用于酵母表達系統構建；（3）用于酵母其他分子生物學研究。實驗方法化學法試劑盒制備法實驗材料釀酒酵母試劑、試劑盒YPDA液體培養基蒸餾水甘油二甲基亞砜儀器、耗材培養皿離心機離心管冰箱實驗步驟一、試劑與耗材1.試劑細菌用-酵母提取物（Fisher）、細菌用-蛋白胨（Fisher）、葡萄糖（Fisher）、細菌用-瓊脂粉、去離子水、甘油（Sigma）、二甲基亞砜（Sigma）、聚乙二醇3350（Sigma）、醋酸鋰（Si

農桿菌感受態細胞制備實驗2013/03/02

氯化鈣法電轉農桿菌感受態實驗方法原理在基因工程操作中，感受態細胞的制備和質粒的轉化是一項基本技術。感受態是細菌細胞具有的能夠接受外源DNA的一種特殊生理狀態。農桿菌的感受態可用CaCl2處理而誘導產生。將正在生長的農桿菌細胞加入到低滲的CaCl2溶液中，0℃下處理便會使細菌細胞膜的透性發生改變，此時的細胞呈現出感受態。制備好的農桿菌感受態細胞迅速冷凍于-70℃可保存相當一段時間而不會對其轉化效率有太大的影響。實驗材料土壤農桿菌LBA4404菌株試劑、試劑盒YEB液體培養基酵母提取物牛肉膏蛋白胨蔗

大腸桿菌感受態細胞制備、重組DNA的轉化、克隆篩選2013/03/02

1.實驗目的和要求通過本實驗學習氯化鈣法制備大腸桿菌感受態細胞和外源質粒DNA轉入受體菌細胞的技術以及篩選轉化體的技術。了解細胞轉化的概念及其在分子生物學研究中的意義。2.相關知識及原理感受態細胞（Competentcells）：受體細胞經過一些特殊方法（如：CaCl2，RuCl等化學試劑法）的處理后，細胞膜的通透性發生變化，成為能容許多有外源DNA的載體分子通過的感受態細胞（competentcell）。轉化（transformation）：是將異源DNA分子引入一細胞株系，使受體細胞獲得新的

細胞專題：細胞凍存和復蘇實驗2012/12/17

細胞凍存和復蘇實驗標簽：細胞凍存復蘇細胞凍存和復蘇可以：（1）用于生物學保種；（2）用于醫學上干細胞研究；（3）用于傳代培養。詳細實驗方法細胞凍存和復蘇實驗方法原理細胞凍存及復蘇的基本原則是慢凍快融，實驗證明這樣可以zui大限度的保存細胞活力。目前細胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護劑，這兩種物質能提高細胞膜對水的通透性，加上緩慢冷凍可使細胞內的水分滲出細胞外，減少細胞內冰晶的形成，從而減少由于冰晶形成造成的細胞損傷。復蘇細胞應采用快速融化的方法，這樣可以保證細胞外結晶在很短的時間內即融化，避免

蛋白專題：PAGE膠上蛋白質的銀染方法2012/12/17

PAGE膠上蛋白質的銀染方法有數百種，其原理相似，具體步驟各不相同。銀染為蛋白質的非特異性染色，呈“爆炸性”反應模式，用于蛋白定量時準確性差，但其敏感度高、簡便易行，仍被廣泛應用。下面列舉的這三種方法為常用的雙向電泳凝膠染色法，可與質譜兼容。其中方法1敏感性zui高，方法3背景zui低、對比度好。1.Blamsilverstainingprotocol（Modified）程序溶液時間固定40%ETOH10%HAC1小時漂洗30%ETOH2×20min致敏0.02%Na2S2O31min漂洗H2O

PCR專題：聚合酶鏈式反應（PCR）2012/12/16

PCR技術可用于：（1）檢驗感染性疾病是否處于隱性或亞臨床狀態；（2）有效檢測癌基因的突變，準確檢測癌基因的表達量；（3）臨床應用于檢測地中海貧血的基因突變。詳細實驗方法PCR技術實驗方法原理PCR技術的基本原理類似于DNA的天然復制過程，其特異性依賴于與靶序列兩端互補的寡核苷酸引物。PCR由變性--退火--延伸三個基本反應步驟構成：①模板DNA的變性：模板DNA經加熱至94℃左右一定時間后，使模板DNA雙鏈或經PCR擴增形成的雙鏈DNA解離，使之成為單鏈，以便它與引物結合，為下輪反應做準備；②

蛋白專題：蛋白質免疫印跡（Western Blot ）2012/12/16

蛋白質免疫印跡（WesternBlot）可以：（1）從蛋白質混合物中檢出目標蛋白質；（2）定量或定性確定細胞或組織中蛋白質的表達情況；（3）用于蛋白質-蛋白質、蛋白質-DNA、蛋白質-RNA相互作用后續分析。實驗方法底物化學發光ECL法實驗方法原理Western免疫印跡（WesternBlot）是將蛋白質轉移到膜上，然后利用抗體進行檢測的方法。對已知表達蛋白，可用相應抗體作為一抗進行檢測，對新基因的表達產物，可通過融合部分的抗體檢測。與Southern或Northern雜交方法類似，但Weste

HRM-遺傳變異分析的新技術2012/12/16

高分辨率熔解（HRM）是一種基于雙鏈DNA在升溫時的解鏈行為的差異來區分不同的PCR產物的新技術。HRM技術的高分辨率使其得以區分即使是單個堿基的差異，因此該技術得以廣泛應用于SNP分型、突變掃描、種屬鑒定和DNA甲基化分析，是目前經濟和快速的基因分型和突變篩查方法之一。該有聲視頻攝錄于2010年維也納qPCR論壇。主講人：AndreasMissel,Ph.D.AssociateDirector,R&D,QIAGENAndreasMissel博士在QIAGEN負責修飾與擴增技術與產品的開發，如用

大腸桿菌感受態細胞的制備、重組DNA的轉化、克隆篩選2012/12/06

1.實驗目的和要求通過本實驗學習氯化鈣法制備大腸桿菌感受態細胞和外源質粒DNA轉入受體菌細胞的技術以及篩選轉化體的技術。了解細胞轉化的概念及其在分子生物學研究中的意義。2.相關知識及原理感受態細胞（Competentcells）：受體細胞經過一些特殊方法（如：CaCl2，RuCl等化學試劑法）的處理后，細胞膜的通透性發生變化，成為能容許多有外源DNA的載體分子通過的感受態細胞（competentcell）。轉化（transformation）：是將異源DNA分子引入一細胞株系，使受體細胞獲得新的

細胞轉染實驗步驟2012/12/05

一、實驗目的學習和掌握外源基因導入真核細胞的主要方法——脂質體介導的轉染。了解外源基因進入的一般性方法，觀測外源蛋白的表達（綠色熒光蛋白），為染色準備實驗材料。二、實驗原理上圖所示是脂質體介導轉染的示意圖，它顯示了外源質粒進入細胞的一般過程。外源基因進入細胞主要有四種方法：電擊法、磷酸鈣法和脂質體介導法和病毒介導法。電擊法是在細胞上短時間暫時性的穿孔讓外源質粒進入；磷酸鈣法和脂質體法是利用不同的載體物質攜帶質粒通過直接穿膜或者膜融合的方法使得外源基因進入細胞；病毒法是利用包裝了外源基因的病毒感染

RNA提取過程經驗分享2012/12/05

1.RNA提取的樣品很重要，包括樣品的質量，細胞數，雜質含量等等，建議：按照說明書的要求，每毫升TRIzol不超過100mg再低些在50mg左右;樣品的質量一定要控制好；研磨得時間不宜過長，成粉狀即可，液氮常加（研磨的意義主要是使細胞與TRIzol的作用更充分，如有團塊挑出取質舍量）；作用時間15分鐘；2.氯仿抽提，一定要混勻，劇烈些沒關系。但一定要充分作用；3.異丙醇沉淀，混勻，冰上操作會在一定程度上增加RNA產量；4.75%乙醇清洗一次即可，速度我一般選擇高速8000g-10000g之間的，

一舉兩得！同時提取RNA和蛋白！2012/12/05

具體的提取步驟如下:1.樣品加氯仿分層后,移去上層水相（該水相里就是RNA，可照常繼續進行RNA的提取）,加0.3ml乙醇沉淀中間層和有機相中的DNA，渦旋混合，室溫放置3分鐘，2-8℃不超過2000×g離心5分鐘。【注：這一步同時可以除去未*消化的殘渣】2.小心吸出沉淀后的上清，加1.5ml異丙醇沉淀蛋白質。室溫放置10分鐘，2-8℃12000×g離心10分鐘棄上清。3.加2ml含0.3M鹽酸胍的95%乙醇洗滌蛋白質沉淀。室溫放置20分鐘，2-8℃7500×g離心5分鐘，棄上清，重復兩次。【注

專題：找質粒,載體圖譜及序列的方法2012/12/03

找質粒,載體圖譜及序列的方法1.Vectorpedia：輸入質粒骨架，直接查詢，非常方便;http://www.addgene.org/pgvec1?f=v&cmd=listvecinfo2.google檢索式子：質粒名＋map質粒名＋sequence＋filetype:txtorfiletype:pdf或者：進入google，點擊"圖片搜索"，直接查找圖譜.3.googlescholar:http://scholar.google.com/有些質粒是經過改造的，所以通過上述方法不能查詢到相應信

原裝西班牙瓊脂糖Biowest aga技術參數2012/11/25

瓊脂（Agar），又名瓊膠、菜燕、凍粉，是一類從石花菜及其它紅藻類（Rhodophyceae）植物提取出來的藻膠（phycocottoid），在我國及日本已有三百多年（1658年）的歷史。瓊脂糖Agarose，縮寫為AG，是瓊脂中不帶電荷的中性組成成份，也譯為瓊膠素或瓊膠糖。瓊膠糖化學結構由β-D-吡喃半乳糖（1-4）連接3,6-脫水α-L-吡喃半乳糖基單位構成.用途:瓊脂、瓊脂糖因為有特殊的膠凝性質，尤其有顯著的穩固性、滯度和滯后性，并且易吸收水分，有特殊的穩定效應；已經廣泛使用于食用、醫藥、

英國OXOID 酵母粉LP0021技術參數2012/11/25

英國Oxoid-LP0021酵母粉|YeastExtract-英國Oxoid-LP0021500g酵母粉|YeastExtract干酵母的自溶產物,富含氨基氮和維生素,優其是水溶性維生素B復合物的含量豐富.它是許多培養基的組份之一,也常用于發酵肉湯以促進細菌的生長.當需要細菌快速,大量繁殖時,也推薦使用.成份分析（每批平均）:（%W/W）總氮:10.9氨氮:5.3氯化鈉:0.3pH（2%溶液）:7.0英國Oxoid-LP0021酵母粉YeastExtract英國Oxoid-LP0021酵母粉Ye