氧化系列蛋白質羰基測試盒
| 參考價 | ￥520.00-￥900.00 |
- 公司名稱 上海優選生物科技有限公司
- 品牌其他品牌
- 型號
- 所在地上海市
- 廠商性質生產廠家
- 更新時間2019/12/19 17:23:41
- 訪問次數 501
| 100管/48樣 | 900.00元 | 100 盒 可售 |
| 50管/24樣 | 520.00元 | 100 盒 可售 |
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| 供貨周期 | 現貨 | 規格 | 50管/24樣；100管/48樣 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | YX-C-A405 | 應用領域 | 生物產業 |
| 主要用途 | 科學研究 |
蛋白質羰基含量測定試劑盒
可見分光光度法
注意：正式測定之前選擇 2-3個預期差異大的樣本做預測定。
測定意義
蛋白質羰基是多種氨基酸在蛋白質的氧化修飾過程中的早期標志，其含量高低表明蛋白質氧化損傷程度的大小，是衡量蛋白質氧化損傷的主要指標。
測定原理
羰基與 2,4-二硝基苯肼反應生成紅色 2,4-二硝基苯腙，在370nm 處有特征吸收峰。
自備實驗用品及儀器
天平、恒溫水浴鍋、低溫離心機、漩渦震蕩儀、可見分光光度計、1 mL玻璃比色皿和蒸餾水，無水乙醇，乙酸乙酯。
試劑組成和配制
提取液：液體 50mL×1 瓶，4℃保存。
試劑一：粉劑 0.1g×5支，4℃避光保存。（使用前根據樣品數，每支加1mL 水溶解，每支為10 個樣品用量）
試劑二：液體 20mL×1 瓶，4℃避光保存。
試劑三：液體 20mL×1 瓶，4℃保存。
試劑四：液體 25mL×1 瓶，4℃保存。
試劑五：根據測定樣品量，將乙酸乙酯和無水乙醇等體積混合。
試劑六：液體 100mL×1 瓶，4℃保存。
樣品處理
1. 組織樣品：按照組織質量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g組織，加入1mL提取液）進行冰浴勻漿，于4℃，4000g 離心10min，取上清，加入 0.1mL試劑一，室溫放置 10min，4℃，10000g 離心 10min，取上清待測。
2. 細菌、真菌：按照細胞數量（104個）：提取液體積（mL）為 500~1000：1 的比例（建議 500 萬細胞加入 1mL 提取液），冰浴超聲波破碎細胞（功率300w，超聲3秒，間隔7秒，總時間 3min）；然后 10000g，4℃，離心 10min，取上清置于冰上待測。
3. 血清等液體樣本：直接測定。
測定步驟和操作表
| 對照管 | 測定管 |
樣品（mL） | 0.2 | 0.2 |
試劑二（mL） |
| 0.4 |
試劑三（mL） | 0.4 |
|
混勻，37℃避光反應 1h | ||
試劑四（mL） | 0.5 | 0.5 |
靜置 5min，4℃，12000rpm 離心 15min，棄上清，留沉淀 | ||
試劑五（mL） | 1.0 | 1.0 |
漩渦混勻，4℃，12000rpm 離心 10min，棄上清，留沉淀 | ||
試劑五（mL） | 1.0 | 1.0 |
漩渦混勻，4℃，12000rpm 離心 10min，棄上清，留沉淀 | ||
試劑五（mL） | 1.0 | 1.0 |
漩渦混勻，4℃，12000rpm 離心 10min，棄上清，留沉淀 | ||
試劑六（mL） | 1.0 | 1.0 |
漩渦混勻，37℃溫育 15min，沉淀全部溶解后，4℃，12000rpm 離心 15min，取上清，1mL 玻璃比色皿，試劑六調零，分別記錄370nm對照管和測定管在的吸光值，ΔA370 =A370 測定管－A370對照管 | ||
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