需自備的儀器和用品：

可見分光光度計、臺式離心機、可調式移液器、1 mL玻璃比色皿、丙酮 60mL、濃鹽酸 10mL、

研缽和冰。

試劑的組成和配制：

試劑一：丙酮 60mL×1 瓶，4℃保存；（自備）

試劑二：粉劑×1 瓶，4℃保存；臨用前加入10mL濃鹽酸充分溶解備用。用不完的試劑4℃

保存；(溶解時間較長，約30min，務必提前準備)

試劑三：15mL×1 瓶，4℃保存；

試劑四：60mL×1 瓶，4℃保存；

H₂O₂ 提?。?/span>

1、細菌或細胞樣品的制備：收集細菌或細胞到離心管內，離心后棄上清；按照細菌或細胞數量（10⁴個）：試劑一體積（mL）為 500~1000：1 的比例（建議500萬細菌或細胞加入1mL試劑一），超聲波破碎細菌或細胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復30次）；用試劑一定容至1mL；8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。

2. 組織樣品的制備：按照組織質量（g）：試劑一體積(mL)為 1：5~10 的比例（建議稱取約0.1g 組織，加入1mL試劑一）進行冰浴勻漿；轉移至 EP 管中，用試劑一定容至1mL，8000g 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測。

3、血清（漿）樣品：直接檢測。

測定步驟 ：

1、分光光度計預熱 30min 以上，調節波長至415nm，蒸餾水調零。

2、將試劑二、三和四 37℃（哺乳動物）或 25℃（其它物種）水浴10min 以上。

3、在 EP 管中按順序加入下列試劑

    加入試劑四溶解沉淀后，室溫靜置 5min，倒入比色皿中，測定415nm處吸光值 A。對照管只要做一次即可。計算 ΔA＝A測定-A對照。

注意事項：

1、由于試劑一易揮發，試劑一必須先預冷再加，研磨時必須在冰上研磨。

2、本試劑盒中試劑的揮發性較高，請帶一次性手套和口罩。