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白細胞介素2(IL-2)的位點特異性聚乙二醇化通過持續激活調節性T細胞2024/04/01
白介素2(IL-2)選擇性結合調節性T細胞(Treg)上的三聚體IL-2受體(IL-2R),優先激活Treg細胞,使IL2成為有前景的治療自身免疫性疾病的細胞因子。然而,IL-2的治療窗口窄且半衰期短。在這篇研究中,協和醫院張烜教授及合作團隊通過無銅點擊反應在位點摻入含疊氮化物的氨基酸,將細胞因子與聚乙二醇(PEG)部分正交結合而得到藥代動力學和半衰期都大大提高的IL-2(如上圖所示),尤其是在Tyr31和Thr51位點均被20kDaPEG化的IL-2優先結合IL-2α亞基而不是β亞基,從而持續
逐典重組胰蛋白酶消化液 — 細胞解離更優選擇2024/04/01
胰蛋白酶是一種絲氨酸蛋白酶,可特異切割賴氨酸及精氨酸C末端肽鍵。傳統的胰蛋白酶由豬、牛和羊等動物的胰臟提取獲得,曾被廣泛應用于生物制品的生產。動物來源的胰蛋白酶有引入外源性病毒的風險,例如在上世紀60年代,曾發生脊髓灰質炎疫苗、減毒黃熱活疫苗檢出SV40病毒和禽白血病病毒的事件,2010年,某廠家的輪狀病毒疫苗檢出了豬圓環病毒序列。中國藥典2020版三部指出:“生物制品的原材料及輔料……應盡可能選擇無病毒安全性風險或低風險的原材料和輔料用于生物制品生產,如選擇采用重組技術生產的生物材料替代動物源
重組胰蛋白酶:特點解析及其在疫苗中的應用價值2024/03/29
一,什么是重組胰蛋白酶?重組胰蛋白酶是指利用基因重組技術生產的胰蛋白酶Trypsin(Parenzyme),它是絲氨酸蛋白水解酶家族成員之一,屬肽鏈內切酶,國際酶學編號為:EC3.4.4.4。二,胰蛋白酶的來源及水解特異性最初發現并使用的胰蛋白酶是從牛、羊、豬的胰臟提取的,其廣泛存在于在脊椎動物和微生物中,不同來源其最適溫度有所不同,其中哺乳動物源胰蛋白酶與人體最為相近。胰臟是胰蛋白酶的前體胰蛋白酶原合成場所,合成后作為胰液的成分而分泌,經腸激酶或胰蛋白酶切去前導肽而形成具有活性的胰蛋白酶,為肽
CAR-T療法:“治愈”自身免疫的下一道光2024/03/29
背景目前,自身免疫性疾病主要由廣泛的免疫抑制劑和阻斷抗體治療,這些藥物可以控制疾病,但通常不能治愈。CAR-T療法是針對某些類型血癌的成熟治療方法,靶向CD19的嵌合抗原受體(CAR)T細胞在B細胞惡性腫瘤中非常有效。同時,CD19CART細胞也靶向觸發自身免疫性疾?。ˋID)的自身反應性B細胞,包括系統性紅斑狼瘡(SLE)、特發性炎癥性肌炎(IIM)和系統性硬化癥(SSc)。CAR-T細胞療法的下一個應用會用于治療自身免疫性疾病嗎?或許在近期德國的一項相關性研究中能找到答案。如圖,B細胞在自身
帶您認識“表皮細胞生長因子”— EGF2024/03/28
一,EGF簡介EGF的發現是由蒙塔爾奇尼(Montalcini)和科恩(Cohen)教授在純化小鼠頜下腺神經生長因子(NGF)時發現一種可促進新生小鼠提早開眼、長牙及對熱穩定的多肽類物質,此多肽物具有抑制胃酸分泌作用,稱為“抑胃素”,后發現“抑胃素”可直接促進表皮生長,因此命名為表皮生長因子(EGF)。兩位生物學家,也因此獲得1986年的諾貝爾醫學獎。1974年在人尿液中提純獲得人源表皮生長因子(hEGF),其基因定位于4q25,由53個氨基酸構成,分子量約6KDa,含有3個二硫鍵形成了3個分子
生物界的“小燈泡”— 熒光素酶的應用!2024/03/28
在實驗中大家經常遇到這些問題:1.通過各種在線軟件進行預測獲得miRNA靶向基因,但miRNA對靶基因的實際作用不清楚;2.又或者預測到轉錄因子對基因的表達起抑制或增強的作用,而具體活性以及結合位點仍然需驗證;3.lncRNA或者circRNA吸附miRNA效果如何還未知。這個時候就需要用到熒光素酶(Luciferase)實驗。熒光素(Luciferase)是自然界中能夠產生生物發光的酶的統稱,其中最有代表性的是來自螢火蟲體內(Fire?y)和海腎(Renilla)體內的兩類螢光素酶,分別命名為
單細胞功能蛋白組學助力凱特和Carl June團隊的Car-T研究2024/03/27
細胞治療臨床研究方案IsoPlexis單細胞功能蛋白質組技術將單細胞技術和功能性蛋白質組學結合起來采用微流控微室反應和抗體條碼技術在單細胞水平對分泌的多種細胞因子和胞內磷酸化蛋白組等在活細胞狀態下進行高靈敏多重檢測分析,對功能蛋白進行定性、定量,以此洞察單細胞功能異質性。通過簡單易用的生信分析軟件對單細胞數據進行自動分析,得到具有指導性的結果,幫助下一步決策。CD19CAR-T治療NHL臨床療效相關生物標志物發表文章:Preinfusionpolyfunctionalanti-CD19chime
使用Revvity VICTOR Nivo進行細胞水平的HTRF檢測2024/03/27
在藥物研發過程中常用細胞學分析,來揭示化合物在體外誘導的效應。本文中,我們將介紹使用VICTORNivo進行細胞水平的HTRF檢測,分析α-微管蛋白乙?;?K40水平。在人類神經系統疾病中,常發生微管蛋白乙?;?,因而被廣泛研究。αβ-微管蛋白異二聚體形成微管,微管是細胞骨架中的基本聚合物。通過翻譯后修飾(PTMs),細胞調節微管結構和功能。α-微管蛋白在K40上的乙?;谄渌鸓TMs中起關鍵作用。已知抑制HDAC6(組蛋白去乙?;?)后,會使微管蛋白乙酰化上調,我們采用了小鼠成纖維細胞(NIH
去除核酸污染逐典生物耐高鹽全能核酸酶在150-900mM鹽濃度內均保持高酶活2024/03/26
一,宿主DNA殘留控制的法規要求隨著生物醫藥行業的快速發展,越來越多的生物制品開始服務于人類健康,治療性抗體藥物、細胞治療、病毒載體疫苗等需求日益龐大。不同于傳統口服類藥物,大量生物制品通過注射等給藥方式直接進入體內,因此更需要嚴格的質量監管來保證生物制品的安全性和有效性。宿主核酸的殘留因其可能帶來的傳染性或者致瘤的風,險而被作為生物制品安全監管中的重要一項。WHO及世界各國對宿主核酸的殘留都有嚴格的規定如疫苗及治療類生物制品的DNA殘留量通??刂圃?00pg/劑量以下,部分產品甚至要求DNA殘
白介素2(IL-2)如何助力腫瘤治療,你了解嗎?2024/03/26
白細胞介素-2(interleukin2),簡稱白介素-2(IL-2),在趨化因子家族中扮演著重要的角色,參與機體免疫反應的表達和調節,已廣泛應用于腫瘤治療的佐劑。一,IL-2家族和分類白介素是由多種細胞產生并作用于多種細胞的一類細胞因子(Cytokine),最初由白細胞產生又在白細胞間發揮作用,由此得名。1979年,第二屆國際淋巴因子專題會議將免疫應答過程中白細胞間相互作用的細胞因子統一命名為白介素(Interleukin,IL),根據新確定的因子依次命名,例如IL-1、IL-2……。目前至少
Barkey細胞治療干式復蘇儀,你值得擁有!2024/03/26
作為中國生命科學行業,SinoBioTool(上海津禾生物科技有限公司)致力于促進與加速中國細胞治療,疫苗,干細胞行業的發展。上海津禾生物是丹麥Chemometec和德國Barkey中國區辦事處。2022年6月8日,Azenta,Inc.(納斯達克代碼:AZTA)宣布了一項最終協議,收購為醫療、生物技術和制藥行業提供可控速率解凍設備的供應商BarkeyHoldingGmbH及其子公司(以下簡稱:Barkey)。Barkey總部位于德國Leopoldshohe,在血漿、血液和干細胞的自動解凍方面有
Revvity VICTOR Nivo™ 為您提供一站式的細胞活性、毒性檢測2024/03/26
引言基于細胞活性和毒性檢測的實驗在基礎研究中有廣泛的應用,類似的實驗也用于臨床前研究,以表征化合物誘導的細胞毒性和副作用。相對于生物化學的方法,細胞實驗能夠提供更多的生理相關數據,如細胞增殖,形態和信號通路等。ATPlite1step化學發光實驗使用代謝活性細胞中的ATP作為細胞活力的標志物。利用細胞凋亡和壞死時ATP濃度降低這一方法監測化合物誘導的細胞毒性作用是非??焖俸挽`敏的方法。新面市的VICTORNivo™多功能酶標儀其整合了光吸收,化學發光,熒光強度,時間分辨熒光以及熒光偏正五種檢測模
Lonza 值得信賴的設備助力大規模儀器設備更新2024/03/25
2024年3月13日,國務院印發《推動大規模設備更新和消費品以舊換新行動方案》,實施設備更新、消費品以舊換新、回收循環利用、標準提升四大行動,推進重點行業設備更新改造,包括數字化轉型、智能化升級等重要方向,到2027年實現多個領域設備投資規模增長等目標。Lonza作為全球制藥和生物技術行業的開發和制造合作伙伴,通過數十年的技術沉淀與經驗累積,致力為生命科學的科研機構和研發企業帶來值得信賴的設備:384孔Nucleofector™高通量電轉染系統,助力AI制藥自動化4D-Nucleofector™
瑞孚迪全面助力國務院大規模儀器更新項目2024/03/25
隨著閉幕,國務院印發的《推動大規模設備更新和消費品以舊換新行動方案》正式出臺,提出三個堅持:堅持市場為主要,政府引導;堅持鼓勵先進,淘汰落后;堅持標準,有序提升??茖W、有序地實現設備更新,提升產業水平。這是繼2022年“2000億貼息項目”后的又一重大舉措,對國內重要領域,重要行業的設備優化、技術提升有重大意義。在瑞孚迪(Revvity),我們將“不可能”視為靈感,將“做不到”視為原動力。瑞孚迪提供健康科學解決方案、前沿技術和專業服務,業涵蓋科研探索、開發、診斷、治療的端到端全流程。依托在轉化多
應用分享 | 多文解讀 IL-2、IL-12、IL-15、IL-18、IL-21對NK細胞功能的影響2024/03/25
自然殺傷細胞(naturalkillercell,NK)是機體重要的免疫細胞,不僅與抗腫瘤、抗病毒感染和免疫調節有關,而且在某些情況下參與超敏反應和自身免疫性疾病的發生,能夠識別靶細胞、殺傷介質。白細胞介素,簡稱白介素,是指在白細胞或免疫細胞間相互作用的淋巴因子,它和血細胞生長因子同屬細胞因子。兩者相互協調,相互作用,共同完成造血和免疫調節功能。其中多數與NK細胞密切相關,或直接或間接參與其調控,白細胞介素例如IL-2、IL-15、IL-18作為NK細胞的刺激因子,常被用于其體外擴增,活化,參與
掌握這三點,胰蛋白酶區分不再是難點!2024/03/25
胰蛋白酶,作為一種重要的消化酶,在生物體的消化過程中起著關鍵作用。根據其來源和生產方式的不同,胰蛋白酶大致可以分為兩大類:動物源性胰蛋白酶和非動物源性胰蛋白酶。傳統使用的動物源性的胰蛋白酶,普遍發現于脊椎動物消化系統,直接提取自?;蜇i的胰腺組織;非動物源性胰蛋白酶是利用基因重組技術生產的,也被稱為重組胰蛋白酶。通過基因重組技術,人們可以在特定的生物體(如細菌或酵母)中表達胰蛋白酶的基因,從而大量生產胰蛋白酶。一,應用區別胰蛋白酶理化性質胰蛋白酶是從牛、豬、羊的胰臟提取,通過多重結晶方式純化,并進
貼壁細胞的消化,你真的做對了嗎?2024/03/22
如何消化讓細胞生長的更好,養細胞關鍵還是在消化,以下介紹幾種細胞的消化方法一、酶消化法1、胰酶,這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。消化的時間根據細胞種類、操作手法,溫度等因素而變化,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶,37℃一般在消化單層貼壁的細胞一般1-5分鐘就足夠了,用血清或者含血清的培養基終止。2、膠原酶,一般用于原代細胞消化,這種方法作用溫和,對細胞損傷較小,消化的時間也略長,不推薦的原因是膠原酶有點小貴而且培養細胞株感覺沒有多大的必要。二、離子螯合劑不破壞細胞表面分子
解鎖白介素2(IL-2)之謎:剖析其結構、功能于來源!2024/03/22
IL-2家族是B細胞,T細胞以及NK細胞的發育和功能所必須的一類細胞因子,包括IL-2,IL-4,IL-7,IL-9,IL-15和IL-21等。白細胞介素2(IL-2)是一種多效細胞因子,可引起免疫原性和耐受性免疫反應。最初是由Gillis和Smith以及Morgan等人于上世紀70年代發現T淋巴細胞需要特定的生長因子,而這種介導T細胞增殖的淋巴細胞營養因子最初被稱為T細胞生長因子(TCGF),后來被命名為白細胞介素-2(IL-2)1,并在1992年作為一種腫瘤免疫治療藥物獲得美國食品和藥物管理
掌握D-螢光素鉀鹽使用方法,輕松提升實驗效果!2024/03/21
一.體外生物發光檢測1)用無菌蒸餾水溶解D-熒光素鉀鹽,配制成30mg/mL的儲存液(100-200×),混勻。立即使用,或分裝于-20℃避光保存,避免反復凍融。2)用預熱好的組織培養基將儲存液稀釋至0.15-0.3mg/mL的工作液濃度。3)去除細胞培養基。4)待圖像分析前,向細胞內添加熒光素工作液,37℃孵育5-10min,然后進行圖像分析。二.體內活體成像分析1)用無菌的DPBS(w/oMg2+、Ca2+)配制15mg/mL的熒光素的儲存液,混勻。2)用0.2µm濾膜過濾除菌。立即使用,或
Lonza FlashGel 核酸電泳的利器,5分鐘可分離32個樣品2024/03/21
聽說你做核酸電泳和DNA片段回收如此繁瑣?配電泳液→配瓊脂糖→加EB染料→等膠凝固→加樣→等跑膠→凝膠成像儀照膠→紫外燈下切膠→DNA片段回收試劑盒一頓操作猛如虎,一看濃度零點五,費時費力又傷身,還要重頭再來過。你身心疲憊的說沒有其他好辦法。什么?!比“閃電俠”還快的FlashGel閃膠系統你竟然不知道!閃速解決你的煩惱,讓你不再emo!FlashGel閃膠系統是一個快速分離DNA,不需要紫外光照射就可在跑膠的同時觀察DNA/RNA遷移的便捷電泳系統。這個革命性的工具在5分鐘之內分離多達32個樣
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