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Revvity 影像技術助力抗腫瘤藥物研發(fā)2024/05/16

今年我們非常榮幸請到圣裘德兒童研究醫(yī)院Dr.JessicaWagner和福克斯詹士癌癥中心的Dr.HarveyHensley為大家分享:使用分子影像技術在體內和體外水平揭示小分子藥物ONC201的抗腫瘤活性和免疫刺激作用。以下是報告的精彩內容：ONC201背景介紹在2013年以前，美國濱州州立大學(PennStateUniversity)和濱州赫爾歇醫(yī)療中心(PennStateHersheyMedicalCenter)的研究人員，通過篩選NCI的免費分子庫得到是一種高效的抗癌分子，即ONC201

小動物活體成像技術在外泌體研究中的進展2024/05/16

Exosome(外泌體)1983年于綿羊網織紅細胞中被發(fā)現，是活細胞分泌的直徑約為30-150nm的膜性囊泡，包含多種活性分子，如蛋白質、脂肪和核酸（mRNA、miRNA及其它非編碼RNA）等，能作為信號分子傳遞給靶細胞，從而介導細胞間的物質傳遞與信息交流。天然存在于體液中，包括血液、唾液、尿液和母乳等。外泌體miRNA通過循環(huán)囊泡傳遞信息，被認為是細胞間信號交流的第三種途徑。除了miRNA外，研究表明外泌體中的circRNA、lncRNA和蛋白質也參與細胞內的信號調控。2013年，發(fā)現細胞囊泡

小動物活體光學成像技術在感染性疾病研究中的應（三）2024/05/15

（接上篇）三.抗生素及疫苗等抗感染藥物研發(fā)應用傳統方式對抗生素、疫苗等抗感染藥物在活體水平的研發(fā)篩選，需要在給藥后處死小鼠，取出感染部位，再通過PCR、菌落計數、切片觀察等方法對藥物治療效果進行評價。這些方式需要耗費大量實驗動物、進行繁瑣的實驗操作，很難實現高通量篩選，且不能利用同一只動物從頭到尾的獲取實驗數據，因此很難獲取準確的重復性數據。小動物活體光學成像技術是一種非侵入式活體觀測技術，無需在實驗過程中處死老鼠，并且可以使用同一批老鼠完成不同時間點的觀測，因此已廣泛應用于抗感染藥物的研發(fā)。抗

小動物活體光學成像技術在感染性疾病研究中的應（二）2024/05/15

（接上期）二.監(jiān)測抗感染免疫反應在利用小動物活體光學成像技術觀測病原體在動物體內感染情況的同時，還可應用該技術觀測機體對病原體入侵的免疫反應。此類應用可以通過三種方式實現：1、利用報告基因標記在免疫細胞中特異性表達的基因啟動子而構建轉基因動物，以該轉基因動物為實驗模型，用經光學標記的病原體對其進行感染，觀測病原體感染而引發(fā)的免疫細胞應答；2、利用報告基因標記目的基因的啟動子構建轉基因動物，觀測病原體感染后該基因的表達情況，了解免疫應答的分子機理；3、利用某種免疫相關基因被敲除的基因敲除鼠作為實驗

熒光素酶報告基因檢測常見問題解惑答疑2024/05/15

Q：熒光素酶報告基因檢測主要有哪些用途？a.啟動子結構分析，將啟動子區(qū)域序列（通常2k左右）進行分段截短，或對特定位點進行突變，再分別構建入luciferase報告載體，檢測其啟動子活性。b.啟動子SNP分析，一些基因的啟動子區(qū)域存在單核苷酸多態(tài)性，可運用熒光素酶報告系統分析其相對活性。c.驗證特定轉錄因子同其調控序列的作用，將該序列（通常為啟動子區(qū)域）插入報告基因載體，同時在實驗細胞中共轉過表達該轉錄因子，可分析轉錄因子過表達是否提高熒光素酶活性。d.可以分析信號通路是否激活，將該信號通路的下

耐酸性IL-2：高TME活性和低全身毒性2024/05/15

IL-2具有免疫激活和免疫抑制雙重作用，具體發(fā)揮哪種取決于其受體不同鏈的相應信號。IL-2受體包括α、β、γ三條鏈，其中α鏈（IL-2Rα，CD25）在Treg細胞和內皮細胞組成性表達，使用低劑量IL-2藥物會優(yōu)先激活Treg細胞而非CD8+T細胞，而高劑量IL-2藥物會帶來嚴重的全身毒性，這是開發(fā)IL-2的腫瘤治療藥物中一直困擾著人們的難題。NatRevImmunol.2022Oct;22(10):614-628.多家企業(yè)已經將IL-2的研發(fā)轉向抗炎藥物方向（參考：不死磕“腫瘤”，IL-2轉向

小動物活體光學成像技術在感染性疾病研究中的應用2024/05/14

Revvity小動物活體光學成像技術已在生命科學基礎研究、臨床前醫(yī)學研究及藥物研發(fā)等領域得到廣泛應用。在眾多應用領域中，感染性疾病研究是活體光學成像技術的應用熱點之一。在應用活體光學成像技術進行感染性疾病研究中，常用的標記方法及應用領域包括：1、利用螢火蟲熒光素酶基因、海腎熒光素酶基因或細菌熒光素酶基因標記細菌、病毒、真菌、寄生蟲等病原體，在活體水平觀測這些病原體在動物體內的感染情況及抗生素、疫苗等藥物的治療效果；2、通過熒光素酶基因或熒光蛋白基因標記免疫細胞，以及利用特定基因-熒光素酶基因轉基

應用小動物活體成像技術研究 生物藥劑學和藥代動力學2024/05/14

小動物活體光學成像技術是將分子及細胞生物學技術從體外研究水平發(fā)展到活體動物研究水平的前沿性臨床前分子影像技術，該技術通過采用生物發(fā)光與熒光探針標記研究對象，借助靈敏的光學檢測儀器，直接在活體動物水平監(jiān)測疾病的發(fā)展變化并開展相關藥物的臨床前研發(fā)。小動物活體光學成像目前已廣泛應用于生物藥劑學及藥物動力學相關研究：以藥物為直接觀測對象，借助熒光探針直接標記藥物本身，通過追蹤熒光信號而反映藥物在體內的分布、靶向及代謝情況。如在研究抗體或多肽類藥物是否能夠有效靶向腫瘤的實驗中，可以利用熒光染料通過化學鍵的

靶向性納米金載體增加順鉑化療敏感性2024/05/14

納米載體.傳統化藥.精準治療（從分子機制－細胞分析－活體動物－組織切片等多角度，研究納米金載體通過增加順鉑化療藥物靶向性，改善順鉑化療耐藥性，加快精準治療研究進程。）在上期推送中，我們介紹了順鉑作為一線化療藥物，在治療過程中會出現耐藥性，且耐藥機制不明。而納米載體可通過“特洛伊木馬”效應，通過抗體偶聯、控制釋放時間/環(huán)境和多靶標聯合治療等方式，增加藥物靶向性及治療效果。案例一納米金聯合順鉑改善三陰性乳腺癌放療效果[1]2017年LeiCui等人在RadiationResearch雜志上發(fā)表文章，

IL-6三條信號通路的差異和意義2024/05/14

IL-6作為細胞因子風暴的主要成分，被認為是促進炎癥的核心分子。但是，IL-6也有拮抗炎癥，維持機體免疫穩(wěn)態(tài)的作用，只是需要通過不同的受體，不同的信號傳導通路。F1000Research2020IL-6簡述1986年，IL-6被鑒定B細胞刺激因子，促進效應B細胞分化為產生抗體的細胞。IL-6也稱為IFN-β2，肝細胞刺激因子和雜交瘤/漿細胞瘤生長因子，是一種由184個氨基酸組成的25-kDa分泌糖肽單核細胞和巨噬細胞是IL-6的主要生產者。T細胞、B細胞、肝細胞、內皮細胞、成纖維細胞、角質形成細

一文解鎖酶消化法，輕松搞定組織獲取原代細胞分離2024/05/14

一，酶功能及適用范圍介紹細胞作為生物的基本結構單元（病毒除外），在生命活動過程中扮演著重要角色，在生物醫(yī)藥領域經常被用于基因和藥物研究的工具。實驗使用到的細胞主要是細胞系（Cellline）和原代細胞（Primarycells），這兩種細胞各有優(yōu)缺點，例如原代細胞能夠很好地模擬生物體內的環(huán)境但是重復性差；細胞系雖然重復性好，但是不能很好地模擬生物體內的環(huán)境。因此，很多時候在實驗會需要進行原代細胞的分離，對于原代細胞的分離主要是酶消化法，參與消化的酶因組織差異而存在不同，下邊就介紹一下實驗室常用的

Quantum GX與Spectrum 聯用應用舉例2024/05/13

QuantumGX小動物活體X射線斷層成像系統是將分子及細胞生物學技術從體外研究水平發(fā)展到活體動物研究水平的前沿性臨床前分子影像技術平臺，該技術通過采用X射線成像技術，借助靈敏的光學檢測儀器，直接在活體動物水平監(jiān)測疾病的發(fā)展變化并開展相關藥物的臨床前研發(fā)。該技術已被越來越廣泛地應用于臨床前疾病研究的各個領域，包括癌癥研究、心血管疾病研究、神經疾病研究、炎癥疾病研究、免疫學及干細胞研究等。在新藥的臨床前研發(fā)階段，藥企都已將小動物活體斷層成像技術應用于藥效和安全性評價研究、藥物的靶向及生物分布研究、

IVIS 活體光學成像技術概述2024/05/13

以IVIS系統為代表的小動物活體光學成像系統可應用于各類生物學研究、疾病模型和相關的藥物研發(fā)過程，包括腫瘤（腫瘤的發(fā)展和轉移/腫瘤分子靶向/抗腫瘤藥物/腫瘤相關分子機制等）、免疫及炎癥（免疫性疾病如哮喘、關節(jié)炎、過敏性腹瀉等）、干細胞（干細胞示蹤和存活/腫瘤干細胞）、神經（神經膠質瘤及其藥物靶向/中樞神經損傷/髓鞘損傷和修復等/斑馬魚發(fā)育等）、材料學（納米材料的代謝和在體分布/納米材料毒理學等）。IVISSpectrum小動物活體光學成像系統是目前先進的小動物光學活體成像系統，該系統不僅具備最高

核酸酶殘留控制，生物醫(yī)藥制品的雜質之一2024/05/13

近年來隨著生物醫(yī)藥行業(yè)的蓬勃發(fā)展，越來越多的生物制品，如抗體藥物、細胞治療技術、基因編輯技術、mRNA疫苗、以及基于病毒載體改造的疫苗等，被廣泛用于遺傳疾病、腫瘤疾病等的預防與治療。新技術在臨床醫(yī)療中獲得了深入研究與應用，為嚴重和難治性疾病提供了新的治療理念和方法，同時，應用生物技術方式于生產的醫(yī)藥產品的質量和安全性也成為備受關注的一點。為了保證生物制品的安全性，相關管理部門也一直在加強各項法規(guī)政策，其中生物制品雜質殘留的控制至關重要。《中華人民共和國藥典2020年版》中就《人用疫苗總論》、《人

細胞消化的關鍵點！2024/05/13

一，細胞潤洗次數絕大部分細胞用胰酶潤洗一次即可胰酶是一種蛋白酶，酶切位點是肽鏈的Lys或Arg兩個殘基的羧基端肽鏈，通過在特定位置上降解蛋白，使細胞膜上與培養(yǎng)皿壁結合處蛋白降解，從而使兩者分離。這時，細胞由于自身內部細胞骨架的張力以及培養(yǎng)液表面張力可成為球形。由于在細胞培養(yǎng)中，胰蛋白酶的作用是使細胞間的蛋白質水解從而使細胞離散。胰酶作用時間過長、作用次數過多，都容易破壞細胞表面結構。在吸去培養(yǎng)基后，用37℃預熱過的PBS潤洗細胞表面1-2次，隨后加入適量胰酶，以能夠平鋪在器皿底部一層，略蓋過細胞

促進T細胞耗竭的4種細胞因子2024/05/11

細胞因子和炎癥環(huán)境在塑造T細胞活化和分化中起主要作用。在急性感染期間，高度促炎的環(huán)境促進效應T細胞（包括KLRG-1+短壽命效應細胞）發(fā)育，而記憶前體和記憶T細胞在低促炎環(huán)境中發(fā)育。在慢性感染和癌癥期間，高水平促炎細胞因子可以誘導陰性調節(jié)細胞因子的釋放，這些細胞因子都會促進T細胞耗竭。一，IL-10IL-10是一種STAT-3誘導細胞因子，通常與減弱T細胞活化有關。IL-10通常在慢性感染和癌癥中誘導產生，阻斷IL-10可以預防和/或逆轉T細胞衰竭。多種免疫細胞類型，包括樹突狀細胞（DC）、B細

逐典全能核酸酶：高效、安全、高比酶活—生物蛋白藥生產的得力助手！2024/05/11

全能核酸酶可以降解所有形式的DNA和RNA，將它們消化成3-8個堿基長度的5-單磷酸寡核苷酸，且不具有堿基識別特異性。在生物技術和生物制藥領域中扮演著重要的角色，尤其是在生物蛋白藥的生產過程中，科研中常用于在蛋白樣品制備和純化工藝的改善、提高蛋白產量等方面；隨著生物藥的快速發(fā)展和應用，全能核酸酶廣泛應用于去除疫苗樣品、細胞和基因治療病毒樣品及重組蛋白藥物中的核酸污染，降低核酸殘留毒性風險，提高產品安全性。在生物蛋白藥的生產過程中，全能核酸酶主要用于以下幾個方面：1，基因克隆與表達：全能核酸酶被用

IL-2實體瘤治療新思路：腫瘤局部合成2024/05/10

高濃度的IL-2是提高TME浸潤、逆轉腫瘤免疫抑制的重要炎癥細胞因子。如何在保證IL-2起效的同時降低IL-2的全身毒性是眾多實體瘤免疫療法開發(fā)的重要研究方向。2022年12月加州大學舊金山分校的研究團隊在Science上展示了他們的方案。該臨床前試驗選擇通過在T細胞上搭載合成細胞因子的通路，在體內驅動，使細胞自主產生IL-2，盡可能使IL-2僅在目標腫瘤TME中產生作用，降低全身毒性。局部合成IL-2的機制與效果為了讓IL-2不在全身擴散，自主合成細胞因子回路需要在腫瘤TME的免疫抑制環(huán)境中依

干貨 | 小動物活體成像之生物發(fā)光精華篇2024/05/09

小動物活體成像技術，是在1999年美國哈佛大學Weisslede提出的一項技術，該技術是指應用影像學方法,對活體狀態(tài)下的生物過程進行組織、細胞和分子水平的定性和定量研究。傳統的動物實驗需要在多個時間點分批處死動物以獲取實驗數據，而小動物活體成像技術可同時觀測多個實驗動物、對同一研究個體可進行持續(xù)、反復跟蹤成像，避免動物而造成的組間差異，節(jié)省動物成本，被廣泛應用于生命科學研究領域。其中小動物活體光學成像是通過一定方式對小動物進行光學標記，再通過成像技術及設備(如RevvityIVIS小動物活體光學

Lonza一體化端到端內毒素自動化檢測方案2024/05/09

內毒素檢查是注射劑安全性檢查中的重要檢查項目，我們接受過的每一針注射劑都已經過內毒素污染檢測。隨著生物制藥的發(fā)展，內毒素的檢測需求也日益增加，實驗室需要更高效、更精準的檢測方案來應對日益增長的檢測需求。然而，傳統的手動檢測方法存在諸多局限，如操作繁瑣、易出錯、費人工等，這些問題限制了實驗室的效率和檢測通量的提升。Lonza作為擁有幾十年內毒素檢測經驗的廠家，新近推出一體化端到端內毒素自動化檢測方案，不僅僅通過PyroTecPro™內毒素自動化工作流程解決測試過程中遇到的問題，還將MODA-EM™