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細胞培養基本要求2015/03/20
1.實驗進行前,無菌室及無菌操作臺(laminarflow)以紫外燈照射30-60分鐘滅菌,以70%ethanol擦拭無菌操作抬面,并開啟無菌操作臺風扇運轉10分鐘后,才開始實驗操作。每次操作只處理一株細胞株,且即使培養基相同亦不共享培養基,以避免失誤混淆或細胞間污染。實驗完畢后,將實驗物品帶出工作臺,以70%ethanol擦拭無菌操作抬面。操作間隔應讓無菌操作臺運轉10分鐘以上后,再進行下一個細胞株之操作。2.無菌操作工作區域應保持清潔及寬敞,必要物品,例如試管架、吸管吸取器或吸管盒等可以暫時
細胞血清培養基和無血清培養基的配制以及區別2015/03/18
細胞血清培養基和無血清培養基的配制以及區別細胞培養基是如何配制的?培養細胞的*培養基由基礎培養基和添加劑(如血清或無血清培養用的某些確定的激素及生長因子)組成,培養基的配方一直在改進,其中包括抗生素和抗有絲分裂劑等等。基礎培養基絕大多數培養基是建立在平衡鹽溶液基礎上,添加了氨基酸、維生素和其它與血清中濃度相似的營養物質。zui廣泛應用的培養基是邁健基礎培養基和邁健培養基營養添加物的混合物,其中含有13種必須氨基酸、8種維生素。而邁健培養基也包括非必須氨基酸,維生素的范圍亦很廣,另外常規含有無機鹽
試劑銷售淺談血清與血漿的差異2015/03/16
在維持機體內環境穩態中,循環血液起著關鍵作用。血液成份的變化在疾病診斷與療效判斷中十分重要。因此,采用血清、血漿或全血,是一個涉及臨床醫療與科研質量的重要問題。WHO于2002年邀請41位專家進行專題研討,并發表了一個報告,比較詳盡地評述了血清、不同抗凝劑制備的血漿和全血在常用臨床檢驗中的應用,并介紹了各種血標本相關指標的穩定條件。近20年來,許多學者在這一領域已進行了大量工作。雖然我國也有人開始注意這一問題,但還不夠重視。例如,血糖測定,WHO推薦使用EDTA抗凝全血,肝素抗凝全血需謹慎應用;
活性25-(OH)維生素D2D3檢測2015/03/13
活性25-(OH)維生素D2D3檢測維生素D——決定人體體質情況的重要指標,衡量體內鈣吸收的重要標準。人體內存在十多種維生素D主要存在維生素D2D3兩種形式,在肝臟和腎臟轉化成為有生物活性的25-羥基維生素D和1,25-二羥基維生素D。由于25-羥基維生素D是人體內維生素D的主要儲存形式,因此,通過檢測25-羥基維生素D可以確定總體維生素D的情況,評價鈣吸收水平,較好協助臨床疾病的診斷和監測,并確定鈣和維生素D的補充方案。隨時監測人體內維生素D遠離各種維D缺乏癥D缺乏尤顯嚴重,可能引發各種疾病,
關于血球計數板的使用及問題討論2015/03/12
關于血球計數板的使用及問題討論一、血球計數板的使用原理顯微鏡直接計數法是將小量待測樣品的懸浮液置于一種特別的具有確定面積和容積的載玻片上(又稱計菌器),于顯微鏡下直接計數,然后推算出含菌數的一種方法。血球計數板是常用的計菌器之一。血球計數板是一種專門用于計算較大單細胞微生物的一種儀器,由一塊比普通載玻片厚的特制玻片制成的玻片中有四條下凹的槽,構成三個平臺。中間的平臺較寬,其中間又被一短橫槽隔為兩半,每半邊上面刻有一個方格網。方格網上刻有9個大方格,其中只有中間的一個大方格為計數室。這一大方格的長
H446(人小細胞肺癌細胞)2015/03/10
H446(人小細胞肺癌細胞)詳細介紹:小細胞肺癌(SCLC)是肺癌的一個未分化癌分型,在肺癌中病發比例約為20~25%。小細胞肺癌分為局限期和廣泛期,大多數小細胞肺癌診斷時已為廣泛期,局限期zui多占1/3。該病男性多發于女性;患病位置以大支氣管(中心型)居多。臨床特點為:腫瘤細胞倍增時間短,進展快,常伴內分泌異常或類癌綜合征。小細胞肺癌一般起源于較大支氣管,大多為中央型肺癌。小細胞癌分化程度低,生長快,較早出現淋巴道轉移和侵入血管經血道廣泛轉移到身體遠處器官組織,因此在各類肺癌中,小細胞癌的預
大鼠不對稱二甲基精氨酸(ADMA)Elisa試劑盒2015/03/10
大鼠不對稱二甲基精氨酸(ADMA)Elisa試劑盒本試劑僅供研究使用目的:本試劑盒用于測定大鼠血清,血漿及相關液體樣本中不對稱二甲基精氨酸(ADMA)的含量。實驗原理:本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中大鼠不對稱二甲基精氨酸(ADMA)水平。用純化的大鼠不對稱二甲基精氨酸(ADMA)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入不對稱二甲基精氨酸(ADMA),再與HRP標記的羊抗鼠抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色
ELISA的基本原理和幾種方法2015/03/06
基本原理1971年Engvall和Perlmann發表了酶聯免疫吸附劑測定(enzymelinkedimmunosorbentassay,ELISA)用于IgG定量測定的文章,使得1966年開始用于抗原定位的酶標抗體技術發展成液體標本中微量物質的測定方法。這一方法的基本原理是:①使抗原或抗體結合到某種固相載體表面,并保持其免疫活性。②使抗原或抗體與某種酶連接成酶標抗原或抗體,這種酶標抗原或抗體既保留其免疫活性,又保留酶的活性。在測定時,把受檢標本(測定其中的抗體或抗原)和酶標抗原或抗體按不同的步
血清型和抗原抗體系統是什么意思?2015/03/05
血清型和抗原抗體系統是什么意思?血清型:蘇云金桿菌種下分類的一種血清學方法,根據菌體細胞鞭毛抗原(H抗原)的特異性和生理生化特性將蘇云金桿菌區分位同的血清型,向下再分為各個亞種。抗原,是指能夠刺激機體產生(特異性)免疫應答,并能與免疫應答產物抗體和致敏淋巴細胞在體內外結合,發生免疫效應(特異性反應)的物質。抗原的基本特性有兩種,一是誘導免疫應答的能力,也就是免疫原性,二是與免疫應答的產物發生反應,也就是抗原性。抗體指機體的免疫系統在抗原刺激下,由B淋巴細胞或記憶細胞增殖分化成的漿細胞所產生的、可
血清檢查IGG和IGM的區別2015/03/05
血清檢查IGG和IGM的區別IgG抗體是抗體中分子量zui小的一種,可通過胎盤輸給胎兒,保護了嬰兒zui初六個月內免受感染。該抗體產生晚,維持時間長,消失慢,濃度高。血中檢測到可作為遠期感染指標。IgM抗體是抗體中分子量zui大的一種,不能通過胎盤輸給胎兒。抗體產生zui早,一經感染,快速產生,在感染初期抗感染起作用。但維持時間短,消失快。當IgM消失,IgG才開始上升,血中檢測到可作為近期感染指標。你結果只說明曾經感染過,無近期感染。可要小寶寶。靈長類動物主要有四種免疫球蛋白IgG、IgM、I
檢測口蹄疫血清抗體的方法2015/03/04
檢測口蹄疫血清抗體的方法(一)口蹄疫正向間接紅細胞凝集試驗(間接血凝試驗)該試驗是以口蹄疫O、A、C、Asia-1型病毒和豬水泡病病毒的細胞培養物(細胞毒)經PEG濃縮,蔗糖密度梯度超離后純化的病毒抗原分別致敏戊二醛鞣酸處理的綿羊紅細胞,而制成的血凝抗原,用于快速檢測動物血清中的口蹄疫和豬水泡病特異抗體水平。該法簡易、快速、特異、直觀、是當前測抗的實用方法。1.試驗材料V型96孔110。醫用血凝滴定板、玻璃板(與血凝板大小相同)、微量移液器(10~100微升)、塑料咀、微量振蕩器、1毫升/5毫升
關于血清的一些討論2015/01/30
關于血清的一些討論1、血清的主要成分和功能牛血清在細胞培養中對細胞的生長增殖具有重要甚至是難以替代的作用,它含有豐富的細胞生長必須的營養成分。主要有以下成分和功能:A、血清中的主要物質—蛋白質如白蛋白等具有緩沖細胞培養液酸堿度、維持滲透壓的作用。B、轉鐵蛋白、甲狀腺素結合蛋白等結合蛋白,有識別維生素、脂類、金屬和其它激素等,并能與有毒金屬和熱原質結合,從而起到解毒作用。C、纖維粘連素、胎牛血清中的胎球蛋白、貼壁因子等能促進細胞貼壁、鋪展。D、多肽類如血小板促生長因子、成纖維細胞生長因子、表皮細胞
人雌二醇(E2)ELISA試劑盒說明書2015/01/30
人雌二醇(E2)ELISA試劑盒說明書本試劑僅供研究使用目的:本試劑盒用于測定人血清,血漿及相關液體樣本中雌二醇(E2)的含量。實驗原理:本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人雌二醇(E2)水平。用純化的人雌二醇(E2)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入雌二醇(E2),再與HRP標記的雌二醇(E2)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的雌二醇(E2)呈
一抗和二抗的選擇2015/01/29
一抗的選擇檢測任何目的靶蛋白都有不止一種抗體可供選擇,為縮小抗體的選擇范圍選中合適的抗體,需要考慮如下幾種因素:分析試驗應用的類型l樣本蛋白的結構性質l樣本的種屬l抗體宿主的種類l抗體的標記和檢測l1.分析試驗應用的類型一般抗體說明書都列出該抗體經試驗驗證過適用于何種分析類型,如:可以應用于WBIHCICCELASA分析等,如果抗體說明書沒有提及的應用類型,并不意味著該抗體不適用于此種分析應用類型,而僅是說明尚未經過此種分析試驗驗證,如果抗體不適用某些分析試驗,則會在抗體說明書上標注出來不適于某
糖化酶活力測定(直接滴定法)2015/01/28
糖化酶活力測定(直接滴定法)原理采用可溶性淀粉為底物,在一定的pH值與溫度下,使之水解為葡萄糖(還原糖),以直接滴定法測定。試劑及儀器(1)堿性酒石酸銅鉀溶液(使用時等體積混合甲、乙溶液):甲液:稱取15.693g硫酸銅(Cu2SO4·5H2O),0.05g次甲基藍,用水溶解并稀釋定容至1000mL;乙液:稱取50g酒石酸鈉鉀,54g氫氧化鈉,用水溶解并稀釋定容至1000mL(2)0.1%標準葡萄糖溶液:準確稱取1g無水葡萄糖(預先在100-1050C烘干),用水溶解,加5mL濃鹽酸,用水定容至
膠原酶2015/01/27
無菌條件下,切取動物軟骨組織剪碎為1立方毫米大小;加入0.25%胰蛋白酶37℃水浴消化15~20分鐘;離心10分鐘(1000轉/分),棄去胰酶再換成0.2%Ⅱ型膠原酶37℃水浴消化30分鐘至2小時,期間每15分鐘混勻一次或者不停攪拌(用磁力攪拌器)至液體渾濁為止,加胎牛血清數滴終止消化,加1640培養液5~10ml混勻;用100目金屬網過濾,濾液離心10分鐘(1000轉/分),棄去上清夜,再加含10%胎牛血清1640培養液5ml放入培養瓶進行孵育培養.一型膠原酶,酶:組織塊=2:1。37度下消化
多西他賽與吉非替尼對人肺癌細胞的作用2015/01/26
多西他賽與吉非替尼對人肺癌細胞的作用多西他賽和吉非替尼均是晚期非小細胞肺癌(non-smallcelllungcancer,NSCLC)的一線和二線治療藥物,日前兩者療效都達平臺期。除尋找新的靶向治療靶點外,如何進一步提高化療和表皮生長因子酪氨酸激酶抑制劑(EGFR-TKIs)的療效是晚期NSCLC面臨的問題。化療藥物與EGFR-TKIs作用的機制不同,理論上兩者同時應用可能有增效作用。細胞學研究顯示,EGFR-TKIs聯合化療藥物能明顯增強對NSCLC細胞生長的抑制作用,起到“1+12”的作用
AdvCell®骨髓間充質干細胞血清培養基2015/01/23
AdvCell?骨髓間充質干細胞血清培養基AdvCell?骨髓間充質干細胞血清培養基根據哺乳類生物干細胞的生長需要,包含必需和非必需氨基酸、維生素、有機和無機化合物、激素、生長因子、微量礦物質、胎牛血清以及其他補給成分。產品嚴格無菌,無病毒和支原體,性能穩定,使用該培養基能使干細胞在理想營養平衡狀態下進行多代擴增而不發生分化(至少在10代以內)。★產品內容名稱產品號規格貯藏條件運輸AdvCell?骨髓間充質干細胞基礎培養基AdvCell?BoneMarrowMesenchymalStemCell
細胞培養液簡介2015/01/23
細胞培養液細胞培養液簡介雖然細胞培養的實驗早在19世紀末就開始了,但用于培養細胞的培養液主要是動物的血清或淋巴液。被人稱為細胞培養之父的RossHarrison就是利用青蛙的淋巴液來培養神經細胞的。這樣的培養液不但性質不穩定,而且只能進行非常小規模的細胞培養。*個人工配制的培養液是由Lewis&Lewis在1911年由海水、血清、胚胎提取物和鹽和蛋白胨為原料配制成的。但是人們對于培養液中的化學成分并不清楚。直到1948年,Fisher才研制成了*個化學成分清楚的細胞培養液CMRL1006。實驗室
淺析細胞質遺傳的多樣性2015/01/22
淺析細胞質遺傳的多樣性摘要:繁榮的地球分分秒秒都在孕育和誕生新的生命,生命遺傳的方式也是多種多樣的。遺傳方式主要分為核內遺傳和核外遺傳(也叫細胞質遺傳),細胞質遺傳的主要方式是母系遺傳,但同時也存在著不同于母系遺傳的細胞質遺傳方式,即父系遺傳和雙親遺傳。本文主要講述了細胞質遺傳的發現以及研究細胞質遺傳的新方法并舉例論證了父系遺傳和母系遺傳方式的存在。關鍵字:細胞質遺傳母系遺傳父系遺傳雙親遺傳一、細胞質遺傳的定義及發現在核外遺傳中,其中由細胞質成分如質體、線粒體引起的遺傳現象叫細胞質遺傳。細胞質遺
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