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ELISA試劑盒檢測血清使用說明2022/07/05

ELISA試劑盒檢測血清使用說明大部分elisa檢測均以血清為標本。血清標本可按慣例方法收集，應留意防止溶血，紅細胞溶解時會釋放出具有過氧化物酶活性的物質，以HRP為符號的ELISA測定中，溶血標本可能會添加非特異性顯色。血清標本宜在新鮮時檢測。如有細菌污染，?菌體中可能含有內源性HRP，也會發生假陽性反應。一般說來，在5天內測定的血清標本可放置于4℃。超越一周測定的需-20℃保存。凍住血清融解后，蛋白質局部濃縮，散布不均，應充沛混勻并防止發生氣泡。混濁或有沉積的血清標本應先離心或過濾，弄清后再

常見的化學試劑儲存及原則上處理辦法2022/06/28

很難說，一般買來的試劑打開用一次沒用完要放好，保質期和儲存條件有很大關系。比如對于不耐熱的試劑特別是一些生物試劑，在冰箱冷藏又容易吸潮，往往是很不利的；有些試劑對光敏感或者對空氣敏感，所以很難找到一種*理想的儲存條件。原則上應該這樣：1、對于便宜的試劑，買來用過按照瓶上建議的方式保存即可（反正壞了不心疼，有錢任性）2、價格昂貴的試劑，最要緊的是按照需要量購買，最好一次用完，不要剩下，因為很難說這種東西會受什么影響，一來價格貴，你不會有心情來試試它對光、氧、水的敏感性；二來昂貴藥品往往用在關鍵步驟

胎牛血清在細胞培養中的作用2022/06/21

胎牛血清在細胞培養中的作用：1.提供對維持細胞指數生長的激素，基礎培養基中沒有或量很少的營養物，以及主要的低分子營養物。2.提供結合蛋白，能識別維生素、脂類、金屬和其他激素等，能結合或調節它們所結合的物質活力。3.有些情況下結合蛋白質能與有毒金屬和熱原質結合，起到解毒作用。4.是細胞貼壁、鋪展在塑料培養基質上所需因子來源。5.起酸堿度緩沖液作用。6.提供蛋白酶抑制劑，使在細胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活，保護細胞不受傷害。7.參與細胞凍存。在細胞培養中，胎牛血清加入基礎培養基的濃度大多為5%～20%

淺析幼倉鼠腎細胞培養基本條件2022/06/14

幼倉鼠腎細胞培養基本條件：1、合適的細胞培養基合適的小鼠源細胞培養基是體外細胞生長增殖的重要的條件之一，培養基不僅提供細胞營養和促使細胞生長增殖的基礎物質，而且還提供培養細胞生長和繁殖的生存環境。2、優質血清目前，大多數合成培養基都需要添加血清。血清是細胞培養液中重要的成分之一，含有細胞生長所需的多種生長因子及其它營養成分。3、無菌無毒細胞培養環境無菌無毒的操作環境和培養環境是保證細胞在體外培養成功的首要條件。在體外培養的細胞由于缺乏對微生物和有毒物的防御能力，一旦被微生物或有毒物質污染，或者自

了解有關pH標準緩沖溶液必看2022/06/07

pH標準緩沖溶液定義：pH緩沖溶液是一種能使pH值保持穩定的溶液。如果向這種溶液中加入少量的酸或堿，或者在溶液中的化學反應產生少量的酸或堿，以及將溶液適當稀釋，這個溶液的pH值基本上穩定不變，這種能對抗少量酸堿或大或稀釋，而使pH值不變化的溶液就稱為緩沖溶液。pH標準緩沖液有以下特點：（1）標準溶液的pH值是已知的，并達到規定的準確度；（2）標準溶液的pH值有良好的復現性和穩定性，具有較大的緩沖容量，較小的稀釋值和較小的溫度系數；（3）溶液的制備方法簡單；1.如何配制pH標準緩沖溶液？對于一般p

熒光定量PCR的應用領域2022/05/31

熒光定量PCR的應用領域：1、核酸定量分析:對傳染性疾病進行定量定性分析，病原微生物或病毒含量的檢測,比如近期流行的甲型H1N1流感，轉基因動植物基因拷貝數的檢測，RNAi基因失活率的檢測等。2、基因表達差異分析:比較經過不同處理樣本之間特定基因的表達差異(如藥物處理、物理處理、化學處理等)，特定基因在不同時相的表達差異以及cDNA芯片或差顯結果的確證3、SNP檢測:檢測單核苷酸多態性對于研究個體對不同疾病的易感性或者個體對特定藥物的不同反應有著重要的意義，因分子信標結構的巧妙性，一旦SNP的序

簡述各類抗體主要功能2022/05/31

抗體依據重鏈抗原性的不同分為五類：IgG、IgA、IgM、IgD、IgE。各類抗體主要功能有：IgG：血清中含量最高，因此是最重要的抗感染分子，包括抗菌、抗病毒、抗毒素等。IgG還能激活補體，結合并增強巨噬細胞的吞噬功能（調理作用和ADCC效應），穿過胎盤，保護胎兒及新生嬰兒免受感染。IgA：分單體和雙體兩種。前者存在血清中，后者存在于黏膜表面及分泌液中，是黏膜局部抗感染的重要因素。IgM：是分子量最大，體內受感染后最早產生的抗體，具有很強的激活補體和調理作用，因此是重要的抗感染因子，且常用于診

ELISA試劑盒解析泛素化結構2022/05/24

ELISA試劑盒泛素化作為一類作用方式更加復雜且作用結果更加多樣的蛋白質修飾,在細胞生命周期各個方面扮演著同樣重要的角色。泛素化過程通常需要3種泛素酶的協同作用，其中E1泛素激活酶(ubiquitin-activatingenzyme)與E2泛素偶聯酶(ubiquitin-conjugatingenzymes)激活泛素，將其鏈接到蛋白底物上，而泛素連接酶在靶蛋白的特異性識別以及泛素化系統活性的調控中起著zui重要的作用。RINGE3sRING-finger家族的E3均含有相似的E2結合結構域，作

分享免疫熒光實驗要點2022/05/23

標記免疫技術發展蕞早的一種是免疫熒光，它是在免疫學、生物化學和顯微鏡技術的基礎上建立起來的一項技術，通過將抗體與一些示蹤物質結合，利用抗原抗體反應進行組織或細胞內抗原物質的定位。免疫熒光步驟包括，細胞固定和通透，封閉，孵育一抗，二抗等。除了這些基本步驟，接下來的實驗方法希望可以幫到您。1.細胞固定和通透為達到蕞佳的檢測效果，細胞需要經過固定和通透。步驟很重要，細胞和抗原需要保證蕞佳的結構，并利于抗體與抗原結合。通常情況下，2.抗體特異性免疫熒光需要用到特異性非常強的抗體，可以避免高背景和不理想的

人胰腺癌細胞培養基本條件2022/05/17

人胰腺癌細胞培養基本條件：1、合適的細胞培養基合適的小鼠源細胞培養基是體外細胞生長增殖的重要的條件之一，培養基不僅提供細胞營養和促使細胞生長增殖的基礎物質，而且還提供培養細胞生長和繁殖的生存環境。2、優質血清目前，大多數合成培養基都需要添加血清。血清是細胞培養液中重要的成分之一，含有細胞生長所需的多種生長因子及其它營養成分。3、無菌無毒細胞培養環境無菌無毒的操作環境和培養環境是保證細胞在體外培養成功的首要條件。在體外培養的細胞由于缺乏對微生物和有毒物的防御能力，一旦被微生物或有毒物質污染，或者自

清除被污染的細胞辦法2022/05/09

培養細胞一經污染，多數較難處理。在細胞培養中如果污染細胞價值不大，宜棄之；在尋找原因后*消毒操作室，復蘇或重新購置細胞，再進行細胞培養。污染細胞價值較大，又難于重新得到，可采取以下辦法清除。1、細菌和真菌的清除抗生素對殺滅細菌較有效。聯合用藥比單獨用藥效果好。預防用藥比污染后再用藥效果好。預防用藥一般用雙抗生素，污染后清除用藥需采用大于常用量5～10倍的沖洗法，于加藥后作用24～48小時，再換常規培養液。此法在污染早期有效。2、支原體的清除(1)用MRA處理用MRA（MycoplasmaRemo

細胞不貼壁生長可能原因及解決方法2022/04/24

細胞不貼壁生長可能原因及解決方法：可能原因：支原體污染。培養瓶瓶底不干bai凈。培養液pH值過堿（NaHCO3分解）。消化du液或培養液配制錯誤、過期儲存、儲存不當。細胞老化（如傳代前細胞已匯合導致失去貼附性）。接種細胞起始濃度太低或太高。解決方法：縮短胰蛋白酶消化時間或降低胰蛋白酶濃度.分離培養物,檢測支原體.清潔支架和培養箱.如發現支原體污染,丟棄培養物.注意刷洗,或換用一次性塑料培養瓶.使用無菌醋酸溶液調整pH值或充入無菌CO2（將培養液敞口放入培養箱也可）.重新配置消化液或培養液.啟用新

懸浮細胞的凍存及液氮罐使用說明2022/04/19

懸浮細胞的凍存：1.直接將細胞收集到離心管。2.200g離心5min，棄上清。3.以生長培養基（含20%胎牛血清）或100%胎牛血清重懸細胞至終濃度約107/ml，加入10%的DMSO。4.以每管1ml分裝至凍存管中。5.置于4oC30min，再轉入-20℃2h后，再放入-80℃冰箱冷凍過夜，次日保存到液氮罐中；或置于程序降溫盒中，按相關的操作指南進行操作。液氮罐使用注意事項：1．初次使用前檢查容器內膽是否清潔干燥，外部有無凹陷及嚴重碰傷，如有輕微凹陷及碰傷，經試驗其蒸發性能不變，仍可繼續使用，

PCR三個基本反應步驟2022/04/06

聚合酶鏈式反應（PCR）是一種用于放大擴增特定的DNA片段的分子生物學技術，它可看作是生物體外的特殊DNA復制，PCR的最大特點是能將微量的DNA大幅增加。PCR技術的基本原理類似于DNA的天然復制過程，其特異性依賴于與靶序列兩端互補的寡核苷酸引物。PCR由變性-退火-延伸三個基本反應步驟構成：模板DNA的變性：模板DNA經加熱至93℃左右一定時間后，使模板DNA雙鏈或經PCR擴增形成的雙鏈DNA解離，使之成為單鏈，以便它與引物結合，為下輪反應作準備；模板DNA與引物的退火（復性）：模板DNA經

鋅指蛋白423抗體鑒定2022/03/29

鋅指蛋白423抗體鑒定：1、抗體的效價鑒定鑒定效價的方法很多,包括有試管凝集反應,瓊脂擴散試驗,酶聯免疫吸附試驗等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價的方法,以資比較。如制備抗抗體的效價,一般就采用瓊脂擴散試驗來鑒定。2、抗體的特異性鑒定抗體的特異性是指與相應抗原或近似抗原物質的識別能力。抗體的特異性高,它的識別能力就強。衡量特異性通常以交叉反應率來表示。交叉反應率可用競爭抑制試驗測定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競爭抑制曲線,計算各自的結合率,求出各自在IC50時的濃度,并按公式計

發酵培養基pH值影響有哪些2022/03/23

發酵培養基的pH值，對微生物生長具有非常明顯的影響，也是影響發酵過程中各種酶活的重要因素。pH值對微生物的生長繁殖和產物合成的影響有以下幾個方面：①影響酶的活性，當pH值抑制菌體中某些酶的活性時，會阻礙菌體的新陳代謝；②影響微生物細胞膜所帶電荷的狀態，改變細胞膜的通透性，影響微生物對營養物質的吸收和代謝產物的排泄；③影響培養基中某些組分的解離，進而微生物對這些成分的吸收；④pH值不同，往往引起菌體代謝過程的不同，使代謝產物的質量和比例發生改變。培養基中營養物質的代謝，是引起pH值變化的主要原因，

抗原抗體反應四個主要特點2022/03/15

抗原抗體反應是指抗原與相應抗體之間所發生的特異性結合反應。這種反應既可在機體內進行，也可以在機體外進行。在機體內，當免疫細胞被抗原激活后，由B細胞分化成熟為漿細胞后所合成、分泌的一類能與相應抗原特異性結合的具有免疫功能的球蛋白（immunoglobulin，Ig），激活補體系統從而解除抗原對機體的損傷。抗原抗體反應的主要特點有：1、特異性：特定的抗體只能與特定的抗原（肽段/蛋白）結合，這在WB一抗二抗的種屬及反應性的選擇常用到；2、可逆性：抗原抗體的結合是非共價結合，在一定條件下這種非共價結合是

介紹抗原和抗體三個主要不同點2022/03/01

1、定義不同抗原是能夠引起人bai體免疫系統產生du免疫應答，并能與抗體和淋巴細zhi胞在體內外結合的物dao質。抗原可分為*抗原和半抗原，*抗原具有免疫原性和反應原性兩種能力，*抗原you病原體、異種動物血清等等。半抗原只具有反應原性而沒有免疫原性，有磺胺、青霉素等。抗體是一種由漿細胞分泌的大型γ型蛋白質，能夠被免疫系統用來鑒別與中和外來物質如病毒、細菌以及機體本身存在的死亡細胞等等。抗體能夠識別特定外來物的一個*特征，目前僅被發現存在于脊椎動物的體液之中以及B細胞的細胞膜表面。2、功能不同抗

哪些外源性物質影響ELISA檢測結果2022/02/22

外源性物質經常是由于用于ELISA測定的血標本的采集、貯存等不當所致。如標本溶血、標本被污染、標本貯存過久、標本凝集不全和采血管中添加物等影響。（1）標本溶血由于各種人為原因引起的標本溶血，均可因紅細胞破壞溶解時釋放出大量具有過氧化物酶活性的血紅蛋白，在以辣根過氧化物酶為標記的ELISA測定中，會導致非特異性顯色，干擾測定結果。為克服上述干擾作用，標本采集時必須注重避免溶血。（2）標本受細菌污染因菌體中可能含有內源性辣根過氧化物酶，因此，被細菌污染的標本同溶血標本一樣，亦可產生非特異性顯色而干擾

混和培養物分離純化主要六種方法2022/02/15

含有一種以上的微生物培養物稱為混和培養物（mixedculture）。如果在一個菌落中所有細胞均來自于一個親代細胞，那么這個菌落稱為純培養（pureculture）。在進行菌種鑒定時，所用的微生物一般均要求為純的培養物。得到純培養的過程稱為分離純化，主要方法有以下六種。１、傾注平板法首先把微生物懸液通過一系列稀釋，取一定量的稀釋液與熔化好的保持在40-50°左右的營養瓊脂培養基充分混合，然后把這混合液傾注到無菌的培養皿中，待凝固之后，把這平板倒置在恒箱中培養。單一細胞經過多次增殖后形成一個菌落，