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抗體的特異性的四個方面表現2022/11/25

抗體(antibody)免疫細胞分泌免疫物質，是哺乳動物適應性免疫系統對抗病原體的核心，它是在病原體刺激下由漿細胞（效應B細胞）所分泌的一種免疫球蛋白，能夠識別并結合特異的病原體抗原，隨后通過介導中和作用、調理作用、效應T細胞殺傷等來清除病原體。隨著抗體制備與改造技術的飛速發展，抗體已經廣泛應用于生命科學各個領域，包括科學研究、診斷、治療等。特異性（specificity）的本質含義是“Connectedwithoneparticularthingonly"即只與唯yi的特定事物相關，具有專一性

抗體IgG生理特性具體講述2022/11/14

抗體又被稱為免疫球蛋白（immunoglobulin，Ig），這是因為，血清蛋白通過物理的溶解度定義，可以被簡單的區分為白蛋白（albumin）和球蛋白(globulin)，進一步通過電泳技術對血清蛋白進行精確的分析，發現大部分的抗體蛋白都集中在伽馬球蛋白（gammaglobulin）所在的條帶，因此抗體也被稱為免疫球蛋白。作為一種功能蛋白，抗體整體由四條多肽鏈構成，分別為兩條結構相同的輕鏈（Lchain）和兩條結構相同的重鏈（Hchain），四條鏈形成典型的“Y”型抗體結構。氨基酸序列比較研究

詳述ELISA常見四個問題與解決方法2022/11/07

ELISA即酶聯免疫吸附測定，是一類常用的免疫酶技術。主要方法是將已知的抗原或抗體吸附在固相載體表面，然后利用酶標記（偶聯）的抗體或抗原與之孵育，加入顯色劑顯色，通過酶標儀測定待測物顏色與標準物顏色的差異，繪制出酶活曲線得出待測物濃度。下面詳述ELISA常見四個問題與解決方法:1.陰性對照出現陽性結果①樣品、試劑被污染，或加樣時操作不當導致相鄰孔之間溶液濺灑出現交叉污染——更換試劑，小心操作。②酶標板洗滌不徹di——洗板前先將抗體溶液倒干凈，然后清洗液倒滿板孔，確保能充分洗滌。③抗體量過多導致非

加大環保技術投資 促進跨國公司參與可持續發展2022/11/01

加大環保技術投資促進跨國公司參與可持續發展導讀：據了解，“十二五”期間，將以六個方面的問題為重點進行投資和戰略布局，包括飲水安全、空氣污染、重金屬污染、土壤污染、農村生態整治和環保集成能力建設。相關人士分析，環保技術、裝備和服務等多個環節的綜合能力，將在“十二五”期間獲得大幅提升。他表示，隨著國內環保裝備業自主化率的提升，企業將能減少設備引進成本，**市場主動權。中國政府對環境保護、節能減排、循環經濟的日益重視正推動經濟進一步轉型，也正創出造越來越多的新商機。包括福伊特在內的許多大型跨國公司重視

ELISA實驗各類組織勻漿樣本的處理說明2022/11/01

ELISA實驗中的各類組織勻漿有容易勻漿的組織和不易勻漿的組織的兩類樣本，下面分別介紹它們的采集、處理和保存。一、應用ELISA實驗的各類組織勻漿（容易勻漿的組織）樣本的采集、處理和保存。1、采集組織，在冰冷的生理鹽水中漂洗，除去血液，濾紙拭干，稱重，剔除附屬的結締組織，稱取組織塊。2、用移液管量取0.1MPBS或者用0.86％冷生理鹽水，勻漿介質或生理鹽水的體積總量應該是組織塊重量的9倍，用眼科小剪盡快剪碎組織塊（天然時操作要在冰水浴中進行，將盛有組織的小燒杯放入冰水中）。3、勻漿的方式有多種

論述ELISA常見檢測方法2022/10/24

ELISA是酶聯接免疫吸附劑測定（Enzyme-LinkedImmunosorbnentAssay）的簡稱。它是繼免疫熒光和放射免疫技術之后發展起來的一種免疫酶技術。在檢測時，受檢標本（測定其中的抗原）與固相載體表面的抗體反應。洗滌后加入酶標記的抗體，通過反應結合在固相載體上。加入酶反應的底物后，底物被酶催化成為有色產物，產物的量與標本中受檢物質的量直接相關，可根據呈色的深淺進行定性或定量分析。ELISA可用于測定抗原，也可用于測定抗體。ELISA的檢測方法有直接發、間接法、競爭法基雙抗夾心法四

PCR反應中溫度的設置2022/10/17

在PCR自動熱循環中，最關鍵的因素是變性與退火的溫度。如操作范例所示，其變性、退火、延伸的條件是：94℃60s,37℃60s,72℃120s，共25～30個循環，擴增片段500bp。在這里，每一步的時間應從反應混合液達到所要求的溫度后開始計算。在自動熱循環儀內由混合液原溫度變至所要求溫度的時間需要30～60s，這一遲滯時間的長短取決于幾個因素，包括反應管類型、壁厚、反應混合液體積、熱源(水浴或加熱塊)以及兩步驟間的溫度差，在設置熱循環時應充分給以重視和考慮，對每一儀器均應進行實測。關于熱循環時間

探討影響ELISA實驗結果洗板操作2022/10/10

在做ELISA實驗時，洗板有兩種方法：手工法洗板和洗板機洗板。二者沒有本質的差別,只要操作合乎要求,均能得到正確、可靠的結果。手工洗板是每次反應溫育后,將反應液吸出或甩干,然后在板孔中加滿洗液,放置2～3min后,將洗液吸出或甩干再在吸水紙上拍干。重復上述洗滌步驟3～4次,最后在吸水紙上拍干即可。手工洗板人為因素比較大,實驗人員必須經驗豐富,洗滌次數要足夠,沖擊力又不要太大,加入的洗液量以剛滿反應孔為限,防止孔口內有游離酶未能洗凈,同時防止孔與孔之間液體交叉。洗滌結束后扣干亦非常重要,否則易造成

探討抗體的分裝與保存2022/10/08

抗體（antibody）是指機體由于抗原的刺激而產生的具有保護作用的蛋白質。它（免疫球蛋白不僅僅只是抗體）是一種由漿細胞（效應B細胞）分泌，被免疫系統用來鑒別與中和外來物質如細菌、病毒等的大型Y形蛋白質，僅被發現存在于脊椎動物的血液等體液中，及其B細胞的細胞膜表面。抗體能識別特定外來物的一個*特征，該外來目標被稱為抗原。抗體的分裝與保存:抗體保存得當與否，直接決定了抗體的活性和使用效果！如果抗體保存得當，大部分抗體活性都可以維持數月甚至數年。1.收到抗體后請在12000rpm離心1-5min，將

冷凍細胞活化的正確操作步驟2022/09/26

細胞冷凍yellfreexirig是保存微生物或動植物細胞株的常用方法。冷凍細胞到底該如何活化，一個不小心，細胞就受損了，今日總結，冷凍細胞活化的正確操作步驟:1.冷凍細胞之活化原則為快速解凍，以避免冰晶重新結晶而對細胞造成傷害，導致細胞之死亡。2.細胞活化后，約需數日，或繼代一至二代，其細胞生長或特性表現才會恢復正常(例如產生單株抗體或是其它蛋白質)。3.步驟：①操作人員應戴防護面罩及手套，防止冷凍管可能爆裂之傷害。②自液氮或干冰容器中取出冷凍管，檢查蓋子是否旋緊，由于熱脹冷縮過程，此時蓋子易

抗體的免疫學功能???????用途2022/09/19

抗原進入外環境，被吞噬細胞吞噬，露出特異性抗原。T細胞分泌淋巴因子，刺激B細胞，B細胞增殖分化，產生漿細胞，分泌抗體。有部分抗原直接刺激B細胞，B細胞增殖分化，產生漿細胞，分泌抗體。在二次免疫時，抗原直接刺激漿細胞，產生抗體。抗體是機體依據抗原而特異性產生的一種蛋白。抗體產生后的免疫學功能用途如下：1、特異性結合抗原：抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細胞，通常需要補體或吞噬細胞等共同發揮效應以清除病原微生物或導致病理損傷。然而，抗體可通過與病毒或毒素的特異性結合，直接發揮中和病毒的作用

實驗室技術操作要求2022/09/13

實驗室技術操作要求一、無菌操作要求食品微生物實驗室工作人員，必須有嚴格的無菌觀念，許多試驗要求在無菌條件下進行，主要原因：一是防止試驗操作中人為污染樣品，二是保證工作人員安全，防止檢出的致病菌由于操作不當造成個人污染。1．接種細菌時必須穿工作服、戴工作帽。2．進行接種食品樣品時，必須穿專用的工作服、帽及拖鞋，應放在無菌室緩沖間，工作前經紫外線消毒后使用。3．接種食品樣品時，應在進無菌室前用肥皂洗手，然后用75％酒精棉球將手擦干凈。4．進行接種所用的吸管，平皿及培養基等必須經消毒滅菌，打開包裝未使

ELISA測定標本處理保存需考慮方面2022/09/05

用于ELISA測定的標本最為常用的是血清(漿)，有時因為特定的檢測目的，也用到唾液、腦脊液、尿液、糞便等標本。目前臨床上使用血清標本測定的標志物一般有傳染性病原體的抗原和抗體、腫瘤標志物、激素、特種蛋白、細胞因子和治療藥物等。對用于激素和治療藥物測定的血清標本的收集，要注意收集時間甚或體位有可能會對測定結果產生影響。如可di松在早晨4～6點之間，會有一峰值出現：生長激素、促黃體激素(LH)和促卵泡激素(FSH)均以陣發性方式釋放，因此，在測定此類激素時，有必要在密切相連的時間間隔內采取數份血樣本

抗生素的特性與作用機理介紹2022/08/30

抗生素（antibiotics）是由微生物（包括細菌、真菌、放線菌屬）或高等動植物在生活過程中所產生的具有抗病原體或其它活性的一類次級代謝產物，能干擾其他生活細胞發育功能的化學物質。現臨床常用的抗生素有轉基因工程菌培養液液中提取物以及用化學方法合成或半合成的化合物。抗生素是細菌、霉菌或其他微生物的代謝產物或人工合成的類似物，通俗地講，抗生素就是用于治療各種細菌感染或抑制致病微生物感染的藥物。其主要用途是抑制其他種類微生物的生長（抑菌作用）或將它們殺死（殺菌作用），一般情況下對其宿主不會產生嚴重的

雜交瘤細胞原代培養過程2022/08/22

雜交瘤細胞原代培養過程：1.取出小鼠后瀝干酒精，放入超凈臺內，固定在泡沫板上。2.用鑷子提起皮膚，用解剖剪剪開皮膚一個橫切口，將皮膚向上撕開，然后剪開肌肉等，暴露出腹腔，在左側找到脾臟，用彎頭眼科鑷取出脾臟，置于無菌培養皿中。3.用生理鹽水將取出的脾臟清洗多次，并剔除多余無用的組織。4.將篩網置于平皿中，脾臟置于篩網上，用彎頭鑷鑷住，輕輕在篩網上進行碾磨，同時不停滴加不含血清的培養液沖洗。5.將碾磨好的細胞懸液吸入至離心管中，離心(1000rpm,5min)，吸去上清（去除血液等）。6.加入10

WB實驗檢測結果背景過高原因分析2022/08/15

WesternBlot（WB）又名WesternBloting、Western、蛋白質印跡法、免疫印跡試驗，WesternBlot基本原理：首先利用SDS-PAGE對蛋白質樣品進行分離，然后轉移到固相載體上，固相載體以非共價鍵形式吸附蛋白質，且能保持電泳分離的多肽類型及其生物學活性不變。轉移后的膜就稱為一個印跡（blot）,用于對蛋白質的進一步檢測。印跡首先用蛋白溶液處理以封閉膜上剩余的疏水結合位點，而后用所要研究的蛋白質的抗體（一抗）處理，印跡中只有待研究的蛋白質與一抗特異結合形成抗原抗體復合

提取到質量良好的RNA方法技術2022/08/08

提取到質量良好的RNA（包括總RNA和mRNA，以下同），概括起來有兩種方法，總結如下：1、檢測RNA溶液的吸光度280、320、230、260nm下的吸光度分別代表了核酸、背景（溶液渾濁度）、鹽濃度和蛋白等有機物的值。一般的，我們只看OD260/OD280（Ratio，R）。1.82.0時，我們認為RNA中蛋白或者時其他有機物的污染是可以容忍的，不過要注意，當你用Tris作為緩沖液檢測吸光度時，R值可能會大于2（一般應該是2.2時，說明RNA已經水解成單核酸了。如果RNA的量夠，可在260nm

介紹抗體的保存2022/08/01

抗體的保存方法一般會直接影響抗體的活性和使用效果。在保存得當的情況下，大部分抗體可以存放數月甚至數年，一般情況需嚴格按照抗體說明書來進行保存。一、抗體保存溫度和條件：1、抗體收到后，需在12000rpm離心1~5分鐘，再打開管蓋進行分裝和保存，如果抗體體積不足50ul，可延長離心時間至5分鐘，從而確保抗體全部離心下來。2、對于多數抗體而言，分裝成小等份并凍存于-20℃或-80℃是不錯之選。腹水形式的產品收到后需立即凍存，因為該類產品含有大量的蛋白酶，長期在置于4℃條件會導致抗體的降解。分裝成小等

PCR對照試驗結果好卻沒回收到目的片段參考見解2022/07/25

PCR對照試驗一般都會加陰性對照，陽性對照。如果你只想檢控PCR操作及擴增，就加水作為陰性對照，陽性質粒或者DNA作為陽性對照。如果你想監控整個核酸提取過程，及PCR過程的話，那就從核酸提取開始，就將水作為陰性樣本做對照，含模板DNA的菌或者病毒或者組織作為陽性對照。然而，PCR對照試驗結果好卻沒回收到目的片段參考見解：1、連接用室溫保溫1小時，能滿足大多數克隆，為提高效率，需4oC過夜。2、插入片段帶有污染，使3`-T缺失，或抑制連接，抑制轉化。為此，將插入片段和pGEM-T正對照混合，再連接

正確溶解與稀釋ELISA標準品了解下2022/07/18

標準品是ELISA實驗成功與否的關鍵點。正確溶解、稀釋標準品尤其重要，以下一起了解下：1.粉末標準品短暫離心，讓因運輸沾到管蓋、管壁的標準品沉到管底。2.根據瓶標簽加入一定體積的蒸餾水，加水后輕柔渦旋震蕩，室溫靜置溶解10-30min，讓粉末*溶解。注意：加水后暫不用移液槍吹吸，避免蛋白未溶解，槍頭帶出部分蛋白，待*溶解后可吹吸或渦旋振蕩混勻。3.標準品梯度稀釋:（1）標準品稀釋液的選擇：若血清、血漿、組織勻漿樣本，用試劑盒中的標準品稀釋液，梯度稀釋標準品。若細胞上清樣本，建議用細胞培養基梯度稀