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ELISA試驗結果為什么會出現負值2015/11/20

客戶經常會問用兩個不同廠家的ELISA盒子測人血清中的TNF-α等指標時都出現濃度負值,,考慮是不是洗板洗得太過了還是反應溫度不夠,做第二遍的時候將實驗方法,做了少許調整,將板置入36-37攝氏度的烘箱中反應,結果吸光度更低了,測的樣本的濃度仍然有很多負值,目前有兩個問題:1、目前的負值數據該怎么處理？2、為什么會出現這樣的問題？現在讓我們恒遠技術給您做出答復：血清中TNF-α值為負數，可能有如下原因引起：*、因為保存問題，TNF-α在血清中極易降解造成測量值很小。第二、因為血清中一些物質對測量

如何降低ELISA的背景2015/11/12

ELISA實驗的原理似乎很簡單，不外乎固定抗原，添加一抗、二抗和底物，間中夾雜著洗滌和封閉。然而，即使是平淡無奇的洗滌和封閉，如果做得不太好，也有可能毀了整個實驗。在實驗結束時，我們是否能獲得有意義的信息，這在很大程度上取決于結果的信噪比。背景噪音會影響您對結果的判斷。如何降低ELISA的背景，下面有一些tips。洗滌很重要洗滌步驟看似很無聊，其實很重要，因為如果未結合的材料（如非特異結合的抗體或檢測試劑）殘留在微孔板中，那么它會增加背景噪音。如有必要，可增加洗滌液中的鹽濃度，這會阻止非特異結合

恒遠與您分享動物樣本前期處理2015/11/03

一、勻漿介質的制備:一般采用pH7.4,0.01mol/LTris-HCl,1mmol/LEDTA-2Na,0.01mol/L蔗糖,0.8%氯化鈉溶液或直接用0.86%的生理鹽水作為勻漿介質。二、組織勻漿的制備1、取組織塊（0.1g～0.2g）zui少可到2～5mg在冰冷的生理鹽水中漂洗，除去血液，濾紙拭干，準確稱重，放入5ml的勻漿管中。2、按重量(g):體積(ml)=1:9的比例加入9倍體積的勻漿介質（pH7.4，0.01mol/LTris-HCl，1mmol/LEDTA-2Na,0.01m

上海恒遠解析白介素樣本處理涵蓋幾點2015/10/28

本周一上海恒遠為迎接雙十一特推出了新品“人白介素12(IL-12/P40)ELISA試劑盒”，上海交通大學的李老師就向我司訂購了一盒，李老師在樣品的要求放面有些疑慮，上海恒遠馬上為您解析：首先樣本處理需提供待檢測抗體和包被用抗原。要注意檢測的樣本為細胞培養上清、人和動物的血清、血漿。其次樣本收集后應立即-20℃保存，若長期保存應-70℃。特別要注意樣本量的要求：若一個指標做復孔檢測應不少于250ul，做單孔檢測應不少于120ul。建議若客戶樣本量充足提供500ul上。zui后提醒樣本收集后，立即

上海恒遠解析腫瘤壞死因子標本的采集及保存2015/10/21

上海恒遠十月新品“人腫瘤壞死因子α轉化酶ELISA試劑盒”上市啦。上海同濟大學的陳老師在本周一就向我司訂購了一盒“人腫瘤壞死因子α轉化酶ELISA試劑盒”，陳老師對于標本的采集及保存方面有些疑慮。上海恒遠馬上為您解析：1.血清：全血標本請于室溫放置2小時或4℃過一夜后于1000xg離心20分鐘，取上清即可檢測，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。2.血漿：可用EDTA或肝素作為抗凝劑，標本采集后30分鐘內于2-8°C1000xg離心15分鐘，或將標本放于-20℃或-80℃保存，

上海恒遠教您細胞凍存融化怎樣操作2015/10/21

細胞凍存融化的原則是緩凍速融細胞凍存（慢）1.預先配制凍存液：10%DMSO+90%胎牛血清，4℃冰箱保存預冷；2.用胰酶對細胞進行消化：倒去培養瓶中的培養基或用槍小心吸去培養板中的培養基，PBS沖洗兩次，用胰酶消化細胞（盡可能溫和）；3.將預冷的凍存液懸浮細胞，用滴管輕輕吹打混勻。4.在每支凍存管中加入1ml細胞液，密封后標記凍存細胞名稱和凍存日期。5.凍存步驟的細致直接關系到細胞復蘇時的活力，如果有程序降溫器（放在-80℃冰箱一整夜，放入液氮罐）；或者可以在4℃，2h；然后轉到-20℃，2h

測定血清中總甲狀腺素（TT4）的臨床意義2015/10/15

為什么要測定血清中的總甲狀腺素(TT4）呢，測定這個指標的臨床意義是什么呢，會對中國的科研事業有什么幫助呢，今天讓上海恒遠與您一起分享一下！血清中99.95%以上的T4與蛋白結合，其中80%～90%與球蛋白結合稱為甲狀腺素結合球蛋白(簡稱TBG)。TT4是指T4與蛋白結合的總量，受TBG等結合蛋白量和結合力變化的影響，TBG又受妊娠、雌激素、病毒性肝炎等因素影響而升高，受雄激素、低蛋白血癥(嚴重肝病、腎病綜合征)、潑尼松等影響而下降，在臨床上必需注意。血清TT4測定方法有放射免疫法(RIA)、酶

細胞培養中常見的污染有哪些2015/10/10

細胞培養直接關系著實驗的成敗，如果細胞受到污染將無法提取細胞培養液，細胞的污染有哪幾種呢，應該如何避免細胞的污染呢，今天上海恒遠與您一起分享一下！細胞培養中的污染分為兩類，化學污染和生物污染?；瘜W污染化學污染是一些對細胞有毒性的或對細胞產生刺激的化學物質。這些污染一般來自于沒有洗凈的器皿、不純的化學試劑和細胞培養中的污染分為兩類，化學污染和生物污染?；瘜W污染化學污染是一些對細胞有毒性的或對細胞產生刺激的化學物質。這些污染一般來自于沒有洗凈的器皿、不純的化學試劑和質量較差的蒸餾水等?；瘜W污染中比較

ELISA試劑盒的質控2015/09/29

ELISA是一種敏感性高、特異性強、重復性好的實驗診斷方法，由于其試劑穩定、易保存、操作簡便、結果判斷較客觀等因素，以及既適宜于大規模篩查試驗又可以用于少量標本的檢測，既可以做定性試驗也可以做定量分析等優點，已廣泛應用于微生物學、寄生蟲學、腫瘤學和細胞因子等領域。ELISA的影響因素較多，加強質量管理才能充分發揮其方法學的優點。一、質量控制血清質控血清是已有靶值的血清，在每次的常規檢驗中加入一份或數份，通過所得結果來了解本次檢驗的情況。質控血清檢驗的結果如能控制其誤差在一定范圍內，就說明該檢驗沒

如何制備免疫組化的樣品2015/09/24

免疫組化，是應用免疫學基本原理--抗原抗體反應，即抗原與抗體特異性結合的原理，通過化學反應使標記抗體的顯色劑(熒光素、酶、金屬離子、同位素)顯色來確定組織細胞內抗原(多肽和蛋白質)，對其進行定位、定性及定量的研究，稱為免疫組織化學技術(immunohistochemistry)或免疫細胞化學技術(immunocytochemistry)，也是國內應用比較廣泛的一種方法，這個實驗的成敗有兩個比較關鍵的因素，樣本的處理和抗體的選擇，今天上海勁馬就為您介紹一下怎樣處理免疫組化樣本的處理和抗體的選擇，今

恒遠分享:ELISA酶聯免疫試劑盒基本原理方法2015/09/24

ELISA(酶聯免疫試劑盒)(以下簡稱ELISA(酶聯免疫試劑盒)):是酶免疫測定技術中應用zui廣的技術。其基本方法是將已知的抗原或抗體吸附在固相載體(聚苯乙烯微量反應板)表面，使酶標記的抗原抗體反應在固相表面進行，用洗滌法將液相中的游離成分洗除。常用ELISA酶聯免疫吸附試驗,法有雙抗體夾心法和間接法，前者用于檢測大分子抗原，后者用于測定特異抗體?；驹鞥LISA(酶聯免疫試劑盒)方法的基本原理是酶分子與抗體或抗抗體分子共價結合，此種結合不會改變抗體的免疫學特性，也不影響酶的生物學活性。此

上海恒遠分享:實驗室配制標準品的方法原理和步驟分析2015/09/22

據我公司技術分析，NaOH有很強的吸水性和吸收空氣中的CO2，因而，市售NaOH中常含有Na2CO3。由于碳酸鈉，對指示劑的使用影響較大，應設法除去。除去Na2CO3zui通常的方法是將NaOH先配成飽和溶液，由于Na2CO3在飽和NaOH溶液中幾乎不溶解，會慢慢沉淀出來，因此，可用飽和氫氧化鈉溶液，配制不含Na2CO3的NaOH溶液。待Na2CO3沉淀后，可吸取一定量的上清液，稀釋至所需濃度即可。此外，用來配制NaOH溶液的蒸餾水，也應加熱煮沸放冷，除去其中的CO2。標定堿溶液的基準物質很多，

ELISA試劑盒都是有哪些生物原料構成的2015/09/16

上海恒遠生物科技有限公司成立八年以來，在公司所有的生物試劑銷售中，ELISA試劑盒一直位居，這當然和我們提供的ELISA試劑盒過硬的質量和良好的售后服務是分不開的，還有一點我認為這是和ELISA試劑盒的生物原料分不開的，今天讓上海恒遠與您一起看一下，ELISA試劑盒主要用的哪些生物原料呢。生物原料與ELISA試劑盒質量zui密切相關，生物原料主要包括各種天然抗原、重組抗原、單克隆抗體、多克隆抗體以及多肽類、激素類等生物原科。這類原料可用于包被酶標反應板、標記相關酶（如辣根過氧化物酶、堿性磷酸酶等

胎牛血清溶解后有沉淀不必慌張2015/09/02

在日常的銷售工作中，經常有客戶反映買回去的胎牛血清出現沉淀，是不是出現沉淀的胎牛血清會影響實驗，或者說所購買的胎牛血清本身就是假的，今天上海恒遠就來給您解釋一下，出現沉淀的原因。血清中沉淀物的出現有許多原因，但普遍的原因是血清中脂蛋白的變性所造成的，而血纖維蛋白（形成凝血的蛋白之一）在血清解凍后，也會存在于血清中，也是造成沉淀物的原因之一。但這些絮狀沉淀物，并不影響血清本身的質量。若欲去除這些絮狀沉淀物，可以將血清分裝至無菌離心管內，以400g稍微離心，上清液即可加入培養基內一起過濾。不使用過濾

上海恒遠教您如何對傳代細胞進行保存和培養2015/08/26

現在市場上供應的細胞大多都是傳代的，而且細胞比較珍貴，價格高，保存不當不但會造成經濟上的損失而且會影響我們的實驗進度如何對細胞進行保存決定著我們實驗的成功與否。今天上海恒遠就教您如何對傳代細胞進行保存和培養。傳代培養原代培養形成的單層細胞匯合以后，需要進行分離培養，否則細胞會因空間不足或由于細胞密度過大引起營養枯竭，都將影響細胞的生長，這一程序常稱為傳代或傳代培養。原代培養在傳代時即為細胞系，能連續培養下去的為連續細胞系；不能連續培養的為有限細胞系。通常，傳代培養是指擴大培養，也就是將一份細胞一

如何將購買的原裝胎牛血清進行分裝2015/08/05

有的時候我們購買的原裝的胎牛血清一次用不完，這就需要進行分裝，怎么樣分裝才能避免胎牛血清的污染呢，上海恒遠有妙招。理論上來講，血清應該由-20℃到4℃再到水浴，等到血清*溶解且無絮狀渾濁后，搖勻分裝，據經驗，500ml血清在4℃*解凍需要約36h，這時多半會有血清不溶物，再將其置于水浴中至*溶解。將冰凍的血清直接水浴解凍，易造成血清質量下降。但是，實驗室急用血清時都是直接水浴解凍，因為細胞本身還算潑辣，沒出現什么問題。建議樓主按常規步驟來進行。滅活是沖著血清中的補體而去的，我的建議是成品血清無需

研究人超敏C反應蛋白（hs-CRP）的臨床意義2015/07/22

近日來有很多醫院的客戶購買究人超敏C反應蛋白(hs-CRP)這個指標的ELISA試劑盒，帶著好奇的心情，我搜索了一下人超敏C反應蛋白的臨床意義，今天上海恒遠就將它概括了一下，總結如下，希望對您的實驗有所幫助。1.CRP作為急性時相蛋白在各種急性炎癥,組織損傷,心肌梗塞,手術創傷,放射性損傷等疾病發作后數小時迅速升高,并有成倍增長之勢.病變好轉時,又迅速降至正常,其升高幅度與感染的程度呈正相關.2.CRP與其它炎癥因子的相關性:CRP與其它炎癥因子如白細胞總數,紅細胞沉降率和多形核白細胞等具有密切

如何避免抗體的冷凍和融化損傷2015/07/21

花大價錢買的抗體如果由于由于保存不當導致抗體壞掉，未免有點得不償失，如何防止這樣的事情發生呢，今天就讓上海恒遠與您一起來分享一下，防止抗體的冷凍和融化損傷的方法。重復冷凍/融化循環可使抗體變性，導致其形成使抗體結合能力降低的聚集物。存于-20℃對于大多數抗體是適當的；保存于-80℃無明顯優勢。冰箱不能為無霜型。這些冷凍和融化之間的循環（以減少結霜）恰恰是應該避免的。出于相同原因，抗體試劑瓶應置于具有zui小溫度波動的冰箱區域，例如朝冰箱后部放置而不是置于門架上。有些研究人員加入冷凍保護劑甘油達到

Elisa試劑盒植物組織樣本處理簡易四小步2015/07/13

Elisa試劑盒可測的標本包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、植物組織、牛奶、細胞培養上清等。樣本的處理對實驗結果有著很大的影響，今天上海恒遠生物為您帶來的是相關樣本處理，Elisa試劑盒植物組織樣本處理簡易四小步。植物組織的提取，不管是根莖組織還是葉片組織還是果實組織，都應該采用鮮重的計重方式，一般要遵循以下原則：1.稱取的組織重量不能低于50mg。2.勻漿的比例按照10%，即1g組織加9ml的勻漿液，勻漿液一般選取PBS(PH=7.2-7.4)3.組織在勻漿器勻漿過程中，勻漿液應該分2次加

上海恒遠告訴您培養基的滅菌方法2015/07/09

培養基為什么要滅菌呢，這是因為配制培養基是為了培養細菌一類的東西，配好的培養基中一般有別的菌種，滅菌后可確保培養的菌種是你要的那種。滅菌是指殺死或消滅一定環境中的所有微生物，滅菌的方法分物理和化學滅菌法兩大類。本實驗主要介紹物理方法的一種，即加熱滅菌。常見的滅菌方法有加熱滅菌，濕熱滅菌，煮沸消毒法滅菌，高壓蒸汽滅菌下面讓上海恒遠一一分析一下這些滅菌方法。加熱滅菌又分為濕熱和干熱滅菌兩種。通過加熱使菌體內蛋白質凝固變性，從而達到殺菌目的。蛋白質的凝固變性與其自身含水量有關，含水量越高，其凝固所需要