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ELISA常見樣本收集處理方法2016/09/12

ELISA檢測的目的是為實驗提供準確可靠定量分析實驗的依據。為了保證實驗數據的可靠性，在實驗過程中必須堅持全面質量控制和全過程質量控制。在收集標本前都必須有一個完整的計劃。以下是恒遠生物整理的ELISAzui常見的幾種樣本收集處理方法：1．細胞培養上清細胞培養液在2500rpm/min離心20分鐘后，收集上清即刻檢測，或者分裝，-20℃貯存。避免反復凍融。2．血清樣本分離管分離血清。在1000g離心之前，使血樣凝集30分鐘。吸取血清樣本之后即刻檢測，或者分裝，-20℃貯存。避免反復凍融。3.血漿

ELISA實驗中常見問題及原因分析2016/09/07

上海恒遠銷售部、技術部根據客戶的咨詢，將的常見問題以及原因分析整理出來以供大家參考：（一）ELSIA實驗中結果顏色淺、靈敏度偏低的原因試劑盒在運輸、保存期間放置的溫度過高，時間過長，造成抗原、抗體效價下降，酶的活力降低。試劑盒已經超出保存的有效期，抗原抗體效價下降，酶的活性降低。移液取樣不足，移液時抽吸、排放太快，移液嘴內壁掛液太多或者內壁不清潔。造成加樣量不足。孵育溫度偏低，或多塊反應板重疊放置造成孔內的實際溫度偏低，使抗原、抗體復合物形成過少。保溫時間不足，抗原、抗體反應不*。顯色劑加入量不

免疫組化抗原修復注意事項2016/09/05

經甲醛固定的部分組織細胞，因固定過程中可能會形成醛鍵或羧甲基而封閉部分抗原決定簇，使免疫組化標記敏感性明顯降低，因此在染色前，有些抗原需進行修復或暴露。抗原修復方法可分為化學方法和物理方法。化學方法是以酶消化方法，常用胰蛋白酶及胃蛋白酶，配制濃度與消化時間要適度。常用的物理方法有單純加熱、微波處理和高壓加熱。在選用這三種方法時，浸泡切片的緩沖液的離子強度和pH、加熱的溫度和時間均影響著抗原修復效果。1、pH的應用范圍及選擇抗原修復液的pH非常重要，有效的抗原修復pH要比修復液的化學成分更重要，同

科技前沿：諾獎獲得者將端粒酶附著過程可視化2016/08/18

Cell上諾貝爾獲獎者在新近在線發表的文章中運用CRISPR基因組編輯和單分子成像技術將端粒酶附在染色體末端的過程可視化，證實了端粒酶在活的人體細胞核里的轉運途徑。對該動態過程的進一步了解有助于靶向端粒酶作為治療癌癥的策略。端粒酶是作用于人類染色體末端的功能強大的酶，可以保持我們的健康，但它也可以促進癌癥的生長。現在美國科羅拉多大學的研究人員使用單分子成像，將這種酶附著在染色體末端的過程可視化。端粒酶的附著是個不穩定的動態過程在積極分裂的細胞中，包括90%的癌細胞中，端粒酶通過在染色體末端添加重

上海藥物所等闡明人體細胞外鈣敏感受體的激活機理2016/07/25

據上海課題組社會報道：人體血液里鈣離子濃度的穩定性對維持正常生命活動極為重要。人體細胞外鈣敏感受體（CaSR）是G蛋白偶聯受體（GPCR），它能檢測血液里鈣離子濃度的改變，維持鈣離子的代謝平衡。CaSR功能紊亂會導致各種與鈣的代謝相關的疾病。但是，目前對其作用機制仍然不清楚。7月19日，中國科學院上海藥物研究所與美國哥倫比亞大學合作，在學術期刊elife在線發表了題為Structuralmechanismofligandactivationinhumancalcium-sensingrecept

上海恒遠助力天津科技大學實驗！2016/06/20

今日上午，天津科技大學來電我司何，就一些技術問題提出疑問。問：大鼠骨特異性堿性磷酸酶B(ALP-B)ELISA，大鼠血清抗酒石酸酸性磷酸酶5b（TRACP-5B），我發現試劑盒里缺少標準品稀釋液，沒有它我的實驗無法進行，盒子里面有特殊稀釋液是用來稀釋樣品的，但都沒有標準品稀釋液，我的樣品已超出zui低檢測限，所以需要稀釋標準品才行嗎？何將這一問題發至我司技術部，技術部做出如下解釋：答：特殊稀釋液是用來稀釋標準品的，特殊稀釋液一般情況不用當樣本濃度特別高是先用特殊稀釋液稀釋，標準品需要再稀釋就也要

有關培養基的明確分類，您思路是否清晰2016/03/10

前言：品種繁多的培養基容易讓操作使用者們混淆，我們可以按照用途、效期、形態、方法等方面將培養基區分開來。培養基的明確分類能夠使得實驗中您的思路更加清晰，那么今天就請隨上海恒遠小編一起了解下培養基的分類吧。按狀態，用途還有包裝，效期大致可分為這幾類1.干粉培養基效期由于干粉培養基中不含水分，呈干燥狀態，干擾微生物不易生長，因此效期較長。國內廠商一般設定干粉培養基的效期為兩年或者三年，某些添加劑的效期設為一年。2.即用型培養基效期這一類型的培養基省去了由干粉培養基滅菌、制作成為可用的培養基的過程，使

ELISA常用的幾種方法2016/03/09

近日，有幾位客戶ELISA常用的幾種方法有哪些？今天，小編就帶大家一起來看看吧。一、雙抗體夾心法測定抗原：將抗原免疫*種動物獲得的抗體吸附于固相表面;加抗原，形成抗原-抗體復合物;加抗原免疫第二種動物獲得的抗體，形成抗體抗原抗體復合物;加酶標抗抗體(第二種動物抗體的抗體);加底物。底物的降解量＝抗原量。二、直接法測定抗原：將抗原吸附在載體表面；加酶標抗體，形成抗原—抗體復合物；加底物。底物的降解量＝抗原量。三、間接法測定抗體：將抗原吸附于固相載體表面；加抗體,形成抗原-抗體復合物；加酶標抗體；加

ELISA技術的操作要點2016/03/07

zui近，有幾位客戶我司ELISA技術的操作要點，我司特在此做出解答:的試劑，良好的儀器和正確的操作是保證ELISA檢測結果準確可靠的必要條件。ELISA的操作因固相載體的形成不同而有所差異，國內醫學檢驗一般均用板式點。本文將敘述板式ELISA各個操作步驟的注意要點，珠式、管式及磁性球ELSIA，國外試劑均與特殊儀器配合應用，兩者均有詳細的使用說明，嚴格遵照規定操作，必能得出準確的結果。其中zui重要的是標本的采取和保存：可用作ELISA測定的標本十分廣泛，體液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物

您知道ELISA檢測基本原理有哪些嗎？2016/02/29

ELISA法是免疫診斷中的一項新技術，現已成功地應用于多種病原微生物所引起的傳染病、寄生蟲病及非傳染病等方面的免疫診斷。也已應用于大分子抗原和小分子抗原的定量測定，根據已經使用的結果，認為ELISA法具有靈敏、特異、簡單、快速、穩定及易于自動化操作等特點。不僅適用于臨床標本的檢查，而且由于一天之內可以檢查幾百甚至上千份標本,因此，也適合于血清流行病學調查。本法不僅可以用來測定抗體，而且也可用于測定體液中的循環抗原，所以也是一種早期診斷的良好方法。（1）抗原或抗體能以物理性地吸附于固相載體表面，可

恒遠解析：elisa試劑盒抗體能不能用于免疫組化2016/01/27

我司的郭在公司展臺的留上上看到“elisa試劑盒抗體能不能用于免疫組化”這樣一個問題，郭在咨詢技術后給出來這樣的解答。elisa試劑盒抗體一般不能用于免疫組化的。雖然說理論上這兩個都是屬于免疫反應實驗，但是實際操作上還是有區別的。首先，ELISA的抗體一般是針對抗原蛋白的三極結構的，所以操作一般在室溫下進行，避免高溫。而免疫組織化學的抗體是針對抗原的一級結構的，所以要進行抗原熱修復。如果相互混用，很可能不能出結果。抗體的標記并不一樣，ELISA的抗體一般是Streptavidin-HRP標記免疫

美國R&D品牌試劑盒幾大優勢2016/01/21

美國R&DELISA試劑盒幾大優勢：1．R&D致力于試劑盒生產多年，種類全面，建立了可靠的實驗系統。2．數量巨大，3000多種ELISA試劑盒，基本覆蓋實驗中常用細胞因子、信號通路試劑盒。3．種類齊全，高靈敏度比色夾心法ELISA試劑盒，普通靈敏度比色夾心法ELISA試劑盒，磷酸化特異性夾心法ELISA試劑盒，乙酰化特異性夾心法ELISA試劑盒，基于細胞的比色法ELISA試劑盒，基于細胞的熒光法ELISA試劑盒。4．質量可靠，每個ELISA試劑盒都通過了敏感性、特異性、精密度，和批次間一致性的驗

上海恒遠分享小鼠血管生長素ELISA試劑盒實驗的注意事項2016/01/20

在做小鼠血管生長素ELISA試劑盒實驗時，除了熟練的操作外是實驗成功的的條件外，以下的八點注意事項也是實驗成功*的。今天上海恒遠分享小鼠血管生長素ELISA試劑盒實驗的注意事項：1.當混合蛋白溶液時應盡量輕緩，避免起泡。2.洗滌過程非常重要，不充分的洗滌易造成假陽性。3.一次加樣時間控制在5分鐘內，如標本數量多，推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標準曲線，做復孔。5.如標本中待測物質含量過高，請先稀釋后再測定，計算時請zui后乘以稀釋倍數。6.在配制標準品、檢測溶液工作液時，請以相應的稀釋

上海恒遠分析影響ELISA實驗結果的諸多因素2016/01/14

zui近很多老師表示ELISA的實驗結果不盡人意，由于ELISA操作步驟繁多，很多老師都不知道錯在那里，今天上海恒遠就與您分析影響ELISA實驗結果的諸多因素。1.操作前應對實驗的物理參數有充分的了解，如環境溫度(保持在18C～25℃)、反應孵育溫度和孵育時間、洗滌的次數等，要先查看水育箱溫度，是否符合要求。2.正確使用加樣器加樣器應垂直加入標本或試劑，避免刮擦包被板底部。加樣過程中避免液體外濺，血清殘留在反應孔壁上，加樣器吸頭要清洗干凈，避免污染，加樣次序要與說明書一致，否則可導致結果錯誤，實

大鼠ELISA試劑盒實驗中的幾個問題解惑2016/01/13

今天是本周的第三個工作日了，我公司的主推產品大鼠ELISA試劑盒也已經正式上市，今天上海恒遠與您一起來看實驗中的幾個問題解說。一臨界值質控血清分定值和未定值兩種。如只用一份質控血清定值，一般定在正常值與異常值交界點上，定性測定時處于弱陽性水平，稱為臨界值。乙肝標志物臨界值的制定，應按臨床要求，為臨床提供統一的判斷弱陽性的標準。臨界值質控血清可以作為試劑盒中的陽性對照品和陰性對照品以外的第三個對照品，它可以靈敏地反映出試劑盒的檢出水平，確保弱陽性反應的標本不漏檢。二質控血清的制備每個實驗室可以根據

上海恒遠羅列ELISA試劑盒所有樣本的處理方法2016/01/06

關于ELISA試劑盒樣本如何處理是一些新手朋友頭疼的問題，現在上海恒遠為您解決困擾，我司的郭花了一下午的時間為各位朋友詳細的羅列出了ELISA試劑盒樣本的處理方法，那么大家就跟隨郭的腳步一起去看看吧。血清樣本如何處理？全血標本于室溫放置2小時或4℃guo夜后于1000×g離心20分鐘。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。血漿樣本如何處理？應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，于1000×g離心15分鐘，仔收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再

上海恒遠解決客戶求助2015/12/30

上海恒遠無條件為各位朋友解決技術問題，這已經是上海恒遠的一項特色服務了。每天我們的業務員總會接到一些朋友的求助，下面我們一起來看看其中一位朋友的求助問題吧。問：我用48T試劑盒，大概只有十個樣所以一次用不完那么多板條，但是想做兩次，可封板膜只有一張，那如果用完了怎么辦？可以用什么別的東西取代嗎？答：可以把封板膜剪掉，用多少剪多少也可以用封口膜替代。問：實驗過程中溫育是放在哪溫育呢？答：可以在水浴箱、細胞培養箱和烘干箱里面都行，只要恒定溫度為37度。問：買了試劑盒后沒用，但是標準品稀釋了以后（如2

牛血清的質量要求2015/12/18

隨著科學技術的發展和生活水平的不斷提高對生物醫藥產品的質量要求也越來越高，所以對制備工藝中所涉及到的各種原材料的質量標準要求也越來越高，特別是對用于細胞培養基中的主要天然成份――牛血清的質量要求也不斷提高。牛血清包括胎牛血清、新生牛血清和成牛血清。對牛血清的質量要求：Gibco和Sigma二家主要的美國牛血清供應商的牛血清都已進入到我國市場，他們對其質量標準要求都極為嚴格，從血清來源到產品質量都有明確規定。1）血清來源：可從世界各國收集胎牛血清，但是必須符合他的質量標準和美國農業部進口要求。地方

小鼠ELISA試劑盒易于制備和保存2015/12/09

用于小鼠ELISA試劑盒的酶應符合以下要求：純度高，催化反應的轉化率高，專一性強，性質穩定，來源豐富，價格不貴，制備成酶結合物后仍繼續保留它的活性部分和催化能力。在受檢標本中不存在相同的酶。另外，它的相應底物，價格低廉，有色產物易于測定等。1，不能用手接觸試劑，不要把鼻孔湊到容器口去聞試劑（特別是氣體）的氣味。2，不得嘗任何試劑的味道。注意節約試劑，嚴格按照實驗規定的用量取用試劑。如果沒有說明用量，一般應按zui少量取用：液體1～2mL，固體只需要蓋滿試管底部。實驗剩余的試劑既不能放回原瓶，也不

ELISA試劑盒實驗時至關重要的步驟2015/12/02

Elisa試劑盒是一種敏感性高，特異性強，重復性好的實驗診斷方法。雖然elisa試劑盒的操作步驟看似簡單，但沒做到位的話就會影響實驗的效果。所以elisa試劑盒實驗時至關重要的步驟有：*、重要的洗滌：不充分的洗滌會導致差異和高背景，從而帶來不理想的實驗結果。如果未結合的材料殘留在微孔板中，那么它會增加背景噪音。有必要的話，可增加洗滌液中的鹽濃度，這會阻止非特異結合反應。如果背景過高，懷疑洗滌不夠時，可以嘗試增加洗滌次數。第二、關鍵的封閉：封閉液的作用是讓不相關的蛋白占據微孔板中潛在的結合位點。這