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上海恒遠生物科技有限公司
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ELISA試劑盒有哪些操作技巧呢?(新手必讀)2017/09/07
今天上海恒遠生物科技有限公司來告訴您ELISA試劑盒的17種操作技巧,如若您掌握了這些實驗技巧之后,在做ELISA實驗中,試驗起來會更熟練,大大的降低了實驗過程中的風險,ELISA試劑盒實驗的入門新手掌握了這些知識后,操作起來都會快的多。ELISA試劑盒陳技術總結的17個相關操作技巧如下:1.切記在加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。2.合理安排檢測量,以免反應板過多造成洗板等待時間長。3.在吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。4.務必做雙孔實驗,這樣才既能保證數據的準確性,
對于ELISA試劑盒血清標本的保存您知道幾點?2017/08/31
ELISA試劑盒能檢測各種樣本,比如血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養上清液、尿液等等。其中,血清是zui常見的檢測標本之一,根據上海恒遠生物技術員對ELISA試劑盒血清標本的保存建議有以下幾點:1.樣本的采集及血清分離中要注意盡量避免細菌污染,一則細菌的生長,其所分泌的一些酶可能會對抗原抗體等蛋白產生分解作用;二則一些細菌的內源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶本身會對用相應酶作標記的測定方法產生非特異性干擾。2.血清標本如是以無菌操作分離,則可以在2~8℃下保存一周,ELISA如為有菌操作,則建議
ELISA試劑盒:溫育可不是你想的那么簡單!2017/08/23
溫育是ELISA測定中影響測定成敗zui為關鍵的一個因素。也是zui容易出現問題的一個步驟。通常目前國內ELISA商品試劑盒的反應溫育時間為37℃30分鐘~1小時,進口ELISA試劑盒則通常為37℃1~2小時才能有較*的結合,低于1小時,可能會影響測定下限。因此,關于溫育,在實際測定操作中一定要注意以下幾點:(1)要保證在設定的溫度下有足夠的反應時間。一般來說,加完樣本和/或反應試劑后,將微孔板從室溫拿至水浴箱或溫箱中時,孔內溫度從室溫升至37℃,需要一定的時間,尤其是在室溫比較低以及非水浴的狀
ELISA試劑盒:實驗相關問題解答2017/08/17
在做ELISA實驗前,我們就要先想想還有沒有什么地方沒弄懂的,還有沒弄清楚的就需要去問清楚。只有都清楚了做起實驗來才不會那么被動。經過整理,我司將上周客戶咨詢的常見問題及我司做出的分析分享給大家,以供參考:一、在加液的時候,如果不用多道移液器,對結果有影響嗎?技術分析:對于熟練的技術人員來說,可能影響不會很大,如果不是很熟練,結果就很難說了。也正是因為如此,進口的試劑盒的說明書都要求用多道移液器或自動加樣器加樣。二、抗原的純度達到多少?技術分析:如果對本底要求不是很高對化,不純對抗原對包被影響不
上海恒遠為您分享:如何確定抗體的Z佳稀釋度比例2017/08/10
大家在稀釋抗體的時候,有的抗體說明書中有推薦稀釋比例就按照該比例稀釋進行實驗,但是有的抗體說明書沒有推薦稀釋比例,那么我們就需要做大量的預實驗來摸索*的比例了。一般來說,抗體說明書都會提供一個稀釋度范圍,但是,有些公司生產的抗體,其說明書上沒有提供抗體稀釋度。這是可以理解的,因為如果說明書上標明的抗體稀釋度如果高的話,就說明這種抗體效價不高,質量不好。為此,實驗者可以先在網上搜索一些相關的文獻,文獻的方法與材料中一般會把抗體來源以及稀釋度都詳細的標出的。但真正做實驗時,還是要根據自己實驗樣品的情
ELISA試劑盒影響因素之固相載體2017/08/07
ELISA試劑盒因為具有靈敏度高、特異性強,酶免疫試劑的性質比較穩定,操作方法簡便快速、無放射性污染以及應用范圍廣等很多優點,受到很多科研工作者的喜愛,但是Elisa試劑盒的測定,受很多方面影響,這也是ELISA檢測中的重要部分,下面對其中一個影響方面加以說明。固相載體:可溶性抗原或抗體吸附于固相載體而成為不溶形式,這是進行酶標記測定的基本條件。許多物質可作為固相載體,如纖維素、交聯右旋糖苷、瓊脂糖珠、聚丙烯、聚苯乙烯、聚乙烯及聚氯乙烯等等。但在ELISA中zui常用的是聚苯乙烯或聚氯乙烯微量反
為什么血清的顏色有的成黃色有的成紅色呢?2017/07/27
相信有不少科研工作者都比較好奇一個問題,那就是為什么血清有的血清成黃色,而有的血清成紅色呢?到底哪種顏色才是正常的呢?質量好的血清又是哪種顏色呢?今天上海恒遠將圍繞這個問題為大家分析一下!根據我公司多年經驗技術員的分析:血清中,血紅蛋白含量的不同,可表現出黃色或紅色。我國的細胞培養用血清標準是不高于20mg/dl,實際上,血紅蛋白含量的高低對血清并無直接影響,這個指標的意義在于能體現出采血過程的嚴謹規范程度,良好的操作能降低血清的溶血。國產血清的采血點很分散,大多是由屠戶采血后馬上離心收集,所以
試劑的取用方法及取用規則2017/07/20
實驗室里有著各種各樣的生物試劑,不同形態的試劑取量方法也是不同的。今天文章中,將為大家簡單的介紹一下試劑的取用方法以及試劑取用規則!試劑的取用方法固體粉末試劑可用潔凈的牛角勺取用。要取一定量的固體時,可把固體放在紙上或表面皿上在臺秤上稱量。要準確稱量時,則用稱量瓶在天平上進行稱量。液體試劑常用量筒量取,量筒的容量為:5mL、10mL、50mL、500mL等數種,使用時要把量取的液體注入量筒中,使視線與量筒內液體凹面的zui低處保持水平,然后讀出量筒上的刻度,即得液體的體積。如需少量液體試劑則可用
實驗儀器的保護工作您做好了嗎?2017/07/12
的試劑,良好的儀器和正確的操作是保證ELISA檢測結果準確可靠的必要條件.所以在實驗儀器這一塊也是非常重要的。精密檢測儀器的性能、可靠性、測量結果和壽命對實驗結果都有很大影響。所以大家需要注意儀器工作環境要求:防塵、防潮、防熱、防震、防蝕。儀器的接地接地的問題除對儀器的性能、可靠性有影響外,還對使用者的人身安全關系重大,因此所有接入市電電網的儀器必須接可靠的地線。電源電壓由于市電電壓波動比較大,常常超出要求的范圍,為確保供電電源的穩定,必須配用交流穩壓電源。要求高的儀器單獨配備穩壓電源。另外應注
免疫血清(抗血清)常見種類2017/07/06
免疫血清亦稱抗血清(antiserum)是一種含有多克隆抗體的血清。通過注射抗血清可以傳遞被動免疫(passiveimmunity)治療許多疾病。目前*能夠治療埃博拉病毒患者的方法就是通過注射前一個患者的抗血清到體內。抗血清種類很多,包括抗毒素、抗菌血清、抗病毒血清、抗Rh血清等。(1)抗毒素,將類毒素多次免疫動物(常用馬)后,采取動物的免疫血清,經濃縮純化后制得。主要用于治療細菌外毒素所致疾病。常用的有白喉抗毒素、破傷風抗毒素。(2)抗菌血清,在本世紀40年代以前曾用抗肺炎、抗百日咳、抗炭疽等
上海恒遠與您分享:實驗室常用試劑的配置方法2017/06/28
實驗室總有一些試劑是經常用到的。也許市場上的價格看似不是那么貴,但由于經常需要用也用量較大,所以掌握常用試劑的配置方法是每個實驗室科研人員的*課程。例如“PBS"它是生物化學研究中使用的一種緩沖液,想了解具體的配制方法請看下面詳細介紹。1、PBS:取ZLI-9061PBS溶于1000ml的蒸餾水中,混勻,測pH值應在7.2~7.4之間,若偏離此范圍,請用0.1N的HCL或NaOH調整。2、Tris緩沖液:先以少量雙蒸水(300~500ml)溶解Tris,加入HCl后,用HCl(1N)或NaOH(
未雨綢繆:ELISA實驗過程中也許會遇到的問題2017/06/21
在實驗過程中加樣可能會遇到一些問題,而這些問題往往會弄的大家措手不及。恒遠為了方便大家更好的完成實驗,技術人員特將實驗過程中可能碰到的問題以及解決辦法整理分析出來,希望能幫到大家??赡苡龅降膯栴}:1、過長(特別是室內溫度較高時)2、手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間;3、加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。.血清或血漿標本分離不好即進行加樣。相應解決辦法:1、標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后
一些錯誤的操作能造成ELISA實驗結果成假陽性2017/06/15
ELISA實驗操作人員經常會遇到自己的檢測數據和相關文獻中的實驗結果差別較大,甚至相反,或與預期不一致的情況,也常常為此感到困惑。今天給大家分享的內容:哪些錯誤的操作能造成ELISA實驗結果成假陽性。ELISA實驗中造成假陽性的錯誤操作主要有如下幾點:1、加樣對于間接ELISA標本一般都要進行稀釋,如果加樣不準就會造成誤差,尤其當稀釋倍數大時,很小的誤差,會導致較大的相對誤差,使陰性(或弱陽性)標本呈陽性(或陰性)。加樣時應將所加物加在ELISA板孔的底部,避免加在孔壁上部,并注意不可濺出,不可
胎牛血清相關知識,免費科普啦!2017/06/07
胎牛血清取自剖腹產的胎牛;新牛血清取自出生24小時之內的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。顯然,胎牛血清是品質zui高的,因為胎牛還未接觸外界,血清中所含的抗體、補體等對細胞有害的成分zui少。胎牛血清是細胞培養中用量zui大的天然培養基,含有豐富的細胞生長必須的營養成份,常用于動物細胞的體外培養,具有極為重要的功能。1.提供對維持細胞指數生長的激素,基礎培養基中沒有或量很少的營養物,以及主要的低分子營養物。2.提供結合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬和其他激素等,能結合或調變它們所結合
白介素IL-1到IL-8的基本介紹2017/06/01
白細胞介素,簡稱白介素,白細胞介素即是由多種細胞產生并作用于多種細胞的一類細胞因子。目前至少發現了38個白細胞介素,分別命名為IL-1~IL38,功能復雜,成網絡,復雜重疊;在免疫細胞的成熟、活化、增殖和免疫調節等一系列過程中均發揮重要作用,此外它們還參與機體的多種生理及病理反應。白細胞介素IL-1IL-1主要產生細胞:單核細胞,巨噬細胞IL-1氨基酸數目:IL-α159;IL-lβl53IL-1分子質量(kDa):17.5;17.3IL-1受體:CDl21a;CDl21bIL-1主要生物學活性
上海恒遠為您分析:酶聯免疫與化學發光的區別?2017/05/25
當你想要做某個實驗的時候,你會不會為用哪種方法而感到糾結呢?因為有些人建議用ELISA方法,有些建議用化學發光,甚至還有些人說WB(免疫組化)方法實驗。其實這些方法都是可以完成實驗的,只是有些方法操作簡單與復雜、針對點的區別。下面關于酶聯免疫與化學發光的區別恒遠做三點區分。1.一個生物的方法,一個化學方法!生物方法的特異性強點,干擾因素少點,結果準確點。2.化學發光與酶聯免疫都是生物學檢測,只不使用的指示系統不一樣,化學發光是通過光子計數來定量,酶聯免疫是通過顏色深淺來區分,化學發光使用成本高、
細胞中出現的顆粒是個什么鬼?需要處理嗎?2017/05/17
細胞培養的過程中,經常見到黑色的顆粒或小黑點,這種情況是怎么引起的呢?該怎么避免呢?那么今天上海恒遠將為大家分析:細胞中出現的顆粒是個什么鬼?需要處理嗎?原因:黑點,大概有細胞本身帶的,環境有的,還有人身上帶進細胞間的,還有就是血清和培養基。解決辦法:1、如果小黑點有增殖趨勢,那么就有可能是污染了,需要處理;2、如果小黑點沒有增殖趨勢,且不影響細胞生長,也不影響實驗的話,則可能a、是「黑膠蟲」,黑膠蟲究竟是一種生物還是非生物,本身就存在爭議。有人認為是從血清中來的一種原蟲,也有人認為是細菌,或是
上海恒遠與您分享ELISA檢測中涉及的計算公式2017/05/11
酶標板在酶聯免疫吸附實驗中,參與免疫學反應的抗原、抗體、標記抗體或抗原的純度、濃度和比例;緩沖液種類、濃度和離子強度、pH值和反應溫度、時間等條件起著關鍵作用。包被酶標版所用的抗體量,我們是可以用公式計算出來的。公式:V=5n/a(單位:ul),a:抗體濃度,n:酶標板數量。做ELISA實驗時,大家都知道樣本要進行一定比例的濃度稀釋,且稀釋太低或太高都會導致線性關系就不理想,結果也就不準了。那么,如何從標準曲線中通過樣本的吸光度計算樣本中的蛋白含量?方法很簡單,只需三步驟,輕輕松松搞定。1設立標
上海恒遠教你如何測定干擾素含量2017/05/05
干擾素能刺激某些指示細胞(如人羊膜上皮細胞Wish株、人喉癌細胞株Hep-2、人胚肌皮、肺單層細胞等)產生抗病毒蛋白,從而使細胞免受水皰性口炎病毒(VSV)的攻擊,根據待測樣品不同稀釋度的保護能力,計算出干擾素生物學活性單位?!静牧稀縑SV、Wish細胞、MTT、二甲亞砜(DMSO)、10%FCSRPMI1640、培養板、培養瓶、CO2孵箱、超凈臺、酶標檢測儀。【結果】以保護半數(50%)細胞免受病毒損害的zui高干擾素稀釋度為1個干擾素活性單位。也可從標準曲線中求得待測樣品的IFN活性單位。【
上海恒遠為您解答:胎牛血清需要滅活嗎?2017/04/26
相信很多人都有一個疑問,那就是胎牛血清需不需要滅活處理。針對這個問題,上海恒遠覺得有必要給大家講解講解!一般的血清都不要去滅活處理,為什么呢?GIBCO公司在其血清說明書上解析道:經過正確處理的熱滅活血清,對大多數的細胞而言是不需要的。經此處理過的血清對細胞的生長只有微小的促進,或*沒有任何作用,甚至通常因為高溫處理影響了血清的質量,而造成細胞生長速率的降低。而經過熱滅活的血清,沉淀物的形成會顯著增多,這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察,像是“小黑點”,常常會讓研究者誤以為是血清遭受污染,而把血清放在
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