痰液DNA提取試劑盒

產品介紹：

提取痰液DNA

痰液DNA提取試劑盒產品及特點 

痰液是重要的臨床樣品，可以用于診斷肺癌，肺結核等各種疾病。但是從痰液中純

化 DNA 十分棘手，為此本公司開發了本產品，于從痰液或其他上呼吸道分泌樣品中

純化 DNA，用于后續的分子生物學分析。本產品具有下列特點：

1. 每次可以處理 10-20 mL 痰液，得到 2-5 ug DNA。

2. 純度高,可直接用于后續得 PCR 檢測。

3. 一管式操作，減少污染，節約成本。

4. 含痰液保存液（溶液 A），便于取樣和運輸。

5. 無毒環保，不需要使用苯酚和綠仿等有毒的有機溶液。

運輸及保存 常溫運輸和保存，有效期一年。

自備試劑 異丙醇，70%乙醇。

使用方法 一：痰標本的獲取與保存（注意：痰液以及下列操作的廢棄液都可能含有致病性的結核

桿菌等致病菌，需按傳染源相關規定流程進行操作）

1. 每例患者在常規痰標本采樣時，連續三天采集三次樣品以防誤差。具體做法是

先在每個 50 mL 的痰液收集管內新鮮加入 10 mL 溶液 A 和 10 mL 溶液 B，待患

者晨起漱口后，咳深部痰 7～8 口（約 10-20mL），收集到裝有溶液 A 和溶液 B 混

合液的痰液管收集內，混勻后儲于 4℃冰箱或陰涼處。第二、三天重復此操作。取

足三管后一起送實驗室，4℃冰箱保存直到使用（一般不超過 7 天）。

2. 使用時，在室溫反復振搖裝有樣品（總體積約 30-40 mL）的痰液收集管 5～10 分

鐘，充分混勻直到痰液中無粘稠痰塊而呈均勻的液相。

3. 4℃2500g 離心 5 分鐘，棄上清。

4. 沉淀再用自備的 PBS 液洗兩遍。

5. 所得沉淀可以直接用于涂片，用于比較細胞形態學分析。也可以將細胞沉淀在 0.2mL

PBS 緩沖液中重懸后轉入 1.5 mL 螺旋蓋塑料離心管，-20℃冰箱長期保存，或立

即用于下步的 DNA 提取。為避免蓋子崩開而出現交叉污染或痰液的分枝桿菌污染環

境，建議不要使用壓蓋式塑料離心管。同時設置一個陽性和一個陰性對照。

二：DNA 提取

6. 在上步所得的 0.2 mL 樣品中加入 0.6 mL 溶液 C。溶液 C 容易形成沉淀，用前需

37℃加熱融化并搖晃均勻。

7. 室溫放置 10 分鐘。此間可以在每個管外壁上做個標記，以在下步區別向心面和離心

面。

8. 振蕩數秒后加入 0.7 mL 自備的異丙醇，旋緊蓋后振蕩 30 秒混勻。

9. 把離心管的向心面對向轉頭，13,000-15,000 g 室溫離心至少 15 分鐘。

10. 小心移棄上清，注意不要觸及管底和管壁離心面的 DNA 沉淀（此時可能看不見）。

11. 加入 1.0 mL 70%乙醇, 振蕩數秒后 15,000 g 室溫離心 5 分鐘。注意：在離心機

中放置離心管時將其向心面對向轉頭的中央。

12. 小心移棄上清，注意不要觸及管底和管壁離心面的 DNA 沉淀（此時呈膜狀沉淀）。

13. 將離心管放回離心機再短暫離心數秒, 然后用移液器移棄約 50 uL 殘留液體（70%

乙醇），否則它會影響后續反應。

14. 加入 200 μl RNase-free 水，用移液槍仔細吹打離心管管底和管壁離心面的膜狀

DNA 沉淀，溶液將呈混濁狀，含少量不溶，短暫離心后存上清（含 DNA）。

15. 直接取適量用于 PCR，樣品使用量不超過 PCR 體系的 1/2。剩余 DNA 樣品可以室

溫放置 2 小時，也可保存于-80℃保存一個月。