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MPTP誘導的帕金森氏模型2024/06/17

藥品：1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine（MPTP）是一種廣泛使用的化學物質，用于在動物體內誘導類似于PD的狀態，注射MPTP的小鼠已被廣泛接受為PD模型。動物：成年雌性Balb/c小鼠，10周齡。造模：成年雌性Balb/c小鼠，連續7天給予MPTP（15mg/kg/天），腹腔注射。模型的評價：1.曠場活動測試（Openfieldlocomotionactivitytest）：曠場（45cm×45cm×25cm）準備好，將小鼠放入盒子中，熟悉

大鼠腦缺血再灌注損傷模型2024/06/17

模型：麻醉大鼠，然后在頸部中線切開一個切口，暴露頸外動脈和頸內動脈，用無菌縫合線結扎，血管夾夾住頸內動脈。隨后在頸總動脈上切口，然后插入線栓。2h后，大鼠進行再灌注。模型大鼠成功構建的標準：大鼠出現癥狀如偏癱，對側前肢下垂和站立不穩。Bederson評分在1-3分，48小時內沒有死亡，就認為模型成功。文獻上用的是2-3分的模型。優點：無需開顱，創傷較?。蝗毖课幌鄬潭?，可控性好；可實現腦缺血后再灌注，是理想的標準局灶性腦缺血動物模型。動物選擇：目前多選用SD大鼠。考慮大鼠雌激素水平對腦缺血損傷

小鼠脾臟單細胞懸液的制備方法2024/06/14

1.8周齡C57BL/6小鼠摘眼球放血。2.在75%的酒精中，浸泡5min。3.無菌狀態下取脾臟。4.取一干凈10cm大皿，放入無菌的70um濾網，將脾臟置于濾網上，加入2ml培養基。5.用研磨棒輕輕研磨臟器，將脾臟組織研磨成單細胞狀態，直到只剩下臟器的結締組織為止。6.研磨時動作應輕柔，用力過大可導致細胞死亡。7.棄去濾網和濾網上的結締組織，收集平皿內的細胞懸液，400g4min離心沉淀。8.用PBS重懸沉淀，就可以進行后續實驗。

大鼠腹腔注射方法2024/05/11

1.大鼠腹腔注射的位置在兩后肢連線與腹中線交叉兩側1cm處。2.左手固定大鼠，使腹部向上，讓大鼠頭處于低位。3.注射位置消毒4.右手持連有5號針頭的注射器。5.將注射器沿45°角斜向穿過腹肌進入腹腔，此時有落空感，回抽無回血或尿液，即可注入藥液。6.緩慢抽出注射器，用棉球按壓注射部位，注射完畢。注意事項1.注射時，大鼠腹部朝上，頭處于低位，使臟器移向胸部橫隔處，以免被針頭刺入。2.為避免注射后藥液從針孔流出，注射針頭不要太粗。

小鼠腹腔注射方法2024/05/11

1.小鼠腹腔注射的位置在兩后肢連線與腹中線交叉兩側0.5cm處。2.首先采用背側保定法抓取小鼠，使其頭部稍向后仰，腹部向上，小鼠左后肢用小指固定住。3.再用75%酒精棉球消毒注射部位。4.將注射器針頭與皮膚呈45度角刺入小鼠腹腔，回抽針栓，如無回血或液體即可注入藥物。5.注射后，緩慢拔出注射器，用棉球按壓注射部位，注射完畢。注意事項1.注射時，小鼠腹部朝上，頭處于低位，使臟器移向胸部橫隔處，以免被針頭刺入。2.為避免注射后藥液從針孔流出，注射針頭不要太粗。

大鼠尾靜脈注射方法2024/04/26

1.用固定裝置固定大鼠，將尾巴露出。2.使用酒精棉球擦拭消毒大鼠尾巴，擴張血管。3.用1ml注射器。4.用左手拇指和食指固定住尾巴，在尾巴的下1/4處進針，針頭與尾巴平行，進針時，針頭斜面朝上。5.回抽看血液是否回流，以確保針頭在血管內。6.注射完成后，用干棉球按壓注射部位1-2分鐘以止血。注意事項：1.固定大鼠也要固定尾巴。2.推注藥物時，如果有阻力或白色皮丘出現，則意味著針頭未刺入血管，此時應更換位置。3.多次注射，要從尾巴遠端開始注射。

小鼠尾靜脈注射方法2024/04/19

1.用專用固定裝置固定小鼠，前部有氣孔保障小鼠呼吸，后部將尾巴露出。2.小鼠尾靜脈左右兩條，使用酒精棉球擦拭消毒尾巴，擴張血管。3.用1ml注射器，4號針頭。4.用左手拇指和食指固定住靠近尾部末端約1/3處。5.右手持注射器，針尖斜面朝上，沿與靜脈平行方向進針。6.輕推針栓，如無阻力，即可注射藥物。7.拔出針頭前，先用干棉球按壓止血。注意事項：1.推注藥物時，如果有阻力或白色皮丘出現，則意味著針頭未刺入血管，此時應更換位置。2.多次注射，要從尾巴遠端開始注射，漸進向尾根方向移動。

來自結直腸癌的病人類器官原代培養2024/04/19

一、操作步驟1.組織4℃條件下從醫院取回。2.消毒取樣的15ml管，取出組織，放到10ml大皿中。3.用含4抗的PBS溶液浸泡，清洗組織。4.再用組織緩沖液浸泡、清洗三遍。5.將組織剪成1mm3大小的組織塊，轉移到15ml管中消化。6.在37℃水浴鍋中，消化15min。7.取少量液體在顯微鏡下觀察，看到較多的單細胞和較少的細胞簇后，終止消化。8.用100μm篩過濾，然后300g4℃離心5min，移去上清。9.重懸沉淀，轉移到2ml離心管中，300g4℃離心5min，移去上清。10.估算沉淀的細胞

小鼠灌胃操作2024/03/26

一、左手固定小鼠，確保其身體成一直線，頭部固定，避免活動。二、灌胃針從小鼠左側嘴角進入，壓住舌頭，抵住上顎，輕輕向內推進，進入食管后會有一個刺空感。三、在灌注藥液時需注意小鼠是否有強烈掙扎現象。四、一般灌胃針插入深度：小鼠2-3cm。五、一次灌胃量：0.1-0.2ml/10g。伊萊博生物科技（上海）有限公司，公司總部位于上海長江軟件園。2024年1月與上海大學醫學院成立聯合研究中心，主要以生命科學研究為基礎，專注于研究成果轉化及技術服務創新，建立了包含腫瘤生物學、病理學、免疫學、細胞生物學、生物

大鼠灌胃操作2024/03/26

一、用左手固定大鼠的頭部，使其頭部和頸部成一直線，方便灌胃針頭進入口腔。二、將灌胃針從大鼠的左側嘴角插入，壓住舌頭，抵住上顎，輕輕向內推進，進入食管后會有一個刺空感。三、在灌胃針插入過程中，應緊貼咽后壁進針，避免損傷食道。若灌胃針進入氣管，大鼠會劇烈掙扎。四、觀察大鼠的反應，如無過度掙扎，可嘗試推注藥物。如阻力過大或動物反應劇烈，可退針后插入。五、一般灌胃針插入深度：大鼠4-6cm。六、一次灌胃量：大鼠1-2ml/100g。伊萊博生物科技（上海）有限公司，公司總部位于上海長江軟件園。2024年1

成年小鼠關節軟骨細胞原代培養2024/03/19

1.C57小鼠，8-10周，通過頸椎脫位處死，浸入75%乙醇浸泡5分鐘，轉移到通風柜中的解剖盤中。2.使用眼科剪和鑷子，使髖關節脫臼，保持股骨頭完整。3.用止血鉗去除每個股骨頭的軟骨帽，將組織放入含2%雙抗的PBS中。4.用冰冷的含2%雙抗的PBS清洗2-3遍，將關節軟骨小心移到2ml離心管中。5.用眼科剪刀將軟骨帽剪成約1mm3的碎片，加入3ml預熱的CollagenaseD（1.5mg/ml）。6.放入37℃、80rpm的搖床中進行第一次消化，時間2h。7.第一次消化結束后，加入含血清的培養

大鼠骨髓來源的內皮祖細胞體外培養方法2024/03/19

1.SD大鼠，250g，通過頸椎脫位處死大鼠，浸入75%乙醇浸泡5分鐘，轉移到通風柜中的解剖盤中。2.打開皮膚，暴露、收集股骨，無菌狀態下移除附著的肌肉和組織。3.并轉移股骨至預冷含雙抗的PBS中，洗滌三次。冰上操作。4.切斷股骨骨骺，使用5mlPBS，1ml注射器針頭沖洗，沖洗液由棕色變成粉紅色即可（股骨變白）。沖洗后，用1ml注射器吹打3-5次。5.70um濾網過濾，棄去篩網。使用15ml離心管，先加入分離液，然后緩慢加入濾過的懸液。20℃環境下，600g離心25min。6.離心后，離心管中

上海大學醫學院伊萊博聯合研究中心細胞平臺介紹2024/03/08

細胞平臺硬件：擁有人、小鼠、大鼠來源的多種原代或永生化細胞株儲存的細胞庫，配備雙人操作的生物安全柜，進口培養箱；服務：主要包含原代細胞分離、永生化細胞株培養、耐藥株篩選、穩轉株構建以及細胞功能相關實驗檢測、高清顯微拍照等；項目：CCK-8、細胞轉染、流式細胞術、原代細胞分離及培養、穩轉株篩選及驗證、細胞侵襲/遷移/劃痕、平板克隆、破骨/成骨細胞誘導分化、細胞成管實驗、彗星實驗等。伊萊博生物擁有豐富的研究經驗，具備完善的系統化管理能力和科研服務體系。目前已自建細胞、分子、病理等實驗平臺近1000平

上海大學醫學院伊萊博聯合研究中心動物中心平臺介紹2024/03/08

動物中心硬件：擁有1600平方米的SPF級的動物實驗中心，以及200平方米的常規清潔級動物房，滿足多種動物模型的構建，同時設有動物行為學檢測平臺：如水迷宮、曠場監測系統、高十字架、平衡木等；服務：主要包含大、小鼠的服務內容：飼養、繁殖、造模、灌胃/注射治療、樣本取材（保存）、活體成像、動物指標檢測（如血常規、尿常規、栓塞等）；項目：多種模型構建，在體相關研究。伊萊博生物擁有豐富的研究經驗，具備完善的系統化管理能力和科研服務體系。目前已自建細胞、分子、病理等實驗平臺近1000平方米，擁有先進的儀器

伊萊博實驗技術服務內容2024/02/28

伊萊博生物深耕生命科學領域十余載，積累了豐富的理論與實操經驗，可根據不同的研究方向制定相應的科研規劃，助力更好的科研成果產出。服務內容發病機制研究：根據研究內容，設計（優化）方案，完成實驗服務內容，闡述疾病的調控機制；靶向藥物設計：根據靶點信息，預測調解位點，通過虛擬篩選，體內外實驗驗證，協助論文發表和zhaunli申請；新藥研發服務：將篩選的單體進行藥效學分析，推進成果產業化，完成臨床前CRO服務，協助zhaunli申請，協助市級或guojiaji發明獎等獎項申報；科室建設服務：根據不同科室，

小鼠腦缺血再灌注損傷模型2024/02/21

1.體重22-28g的雄性C57Bl/6小鼠，用5%異氟醚深度麻醉小鼠，然后2.5%異氟醚維持麻醉。2.在頸部中線切開一個切口。3.分離右側的頸總動脈和迷走神經。4.右側的頸總動脈暫時結扎。5.分離右側的頸外動脈和頸內動脈，右側的頸內動脈暫時結扎；右側的頸外動脈頭端結扎，近心端掛線備用。6.隨后，用無菌的1ml注射器針頭在右側頸外動脈上做一個小洞，然后插入線栓，近心端掛線適度的系牢插入右側頸外動脈的線栓，以防止血從小洞中流出；松開右側頸內動脈暫時的結扎線，輕輕送入線栓到大腦中動脈，當感覺到阻力時

腦積水大鼠模型的建立2024/01/10

1.雄性SD大鼠、8周齡，麻醉。2.大鼠頭頸部皮膚去毛后，固定在立體定位上，常規消毒。3.在頸部后面的皮膚上做一個中線切口，鈍性分離肌肉，暴露寰枕膜。4.微量注射器進入寰枕膜失去阻力后停針，注入0.02mL無菌高嶺土懸浮液。5.注射速度6ul/s，注射后停針10min。6.拔針后，用醫用耳腦膠封閉針眼，縫合切口，術后抗感染治療。7.術后每天給大鼠稱重并監測其神經功能缺陷。8.大鼠術后3周，經MRI檢查確認模型成功后，取其腦組織，4%多聚甲醛固定。9.常規HE染色，光鏡觀察，可看到模型組大鼠側腦室

缺血性面癱動物模型2024/01/10

1.豚鼠重量220-300g，Preyer反射陽性。2.適應性飼養5天后，阻斷左耳巖動脈，手術過程如下。3.麻醉豚鼠，動物俯臥位。4.沿耳廓前上基底切開皮膚，暴露顳肌。5.翻開顳肌暴露顳骨鱗部（上鼓室氣房的外側壁）。6.用牙科鉆小心打開上鼓室氣房的外側壁，暴露上鼓室氣房。7.以錘砧復合體和上半規管隆凸為骨性標志，確認面神經管和巖動脈的部位。8.巖動脈走行于巖骨嵴內，用小型牙科鉆輕輕鉆除巖動脈上方的骨質。9.以看見點狀出血為巖動脈鉆出的標志，即巖動脈阻斷。10.術畢，縫合切口。11.待豚鼠蘇醒后于

三氯化鐵（FeCl3）血栓形成法2023/01/29

①復制方法成年實驗大鼠，麻醉后將大鼠側臥固定于手術臺上，頭部皮膚常規消毒與去毛。用無菌手術自眼眥和外耳道中線處剪一切口，除去顴弓，暴露顳前窩及鱗狀骨大部分，隨后在顴弓和鱗狀骨前聯合的前下方約2mm處用牙科鉆一直徑約2mm的小顱窗，暴露大腦中動脈(MCA)，用一小片塑料薄膜保護血管周圍組織。將吸有50％三氯化鐵(FeCl3)溶液10μl的小片濾紙敷在暴露的大腦中動脈上20min，共敷兩次后去掉濾紙。再用生理鹽水沖洗局部組織，常規手術逐層縫合。②模型特點模型動物形成的動脈血栓為混合血栓，主要成分為血

膽固醇轉運蛋白GramD1C調控自噬啟動和線粒體生物能量學2022/12/09

文獻內容講解巨自噬（以下簡稱自噬）涉及膜的初始形成，將細胞質中需要分解的物質隔離形成雙膜自噬體，自噬體隨后與溶酶體接觸，進而融合，從而使物質分解和由此產生的大分子循環，以在饑餓和細胞應激期間獲得穩態。自噬體的生物發生通過ULK1激酶復合物和III類磷脂酰肌醇3激酶復合物1(PIK3C3-C1)聚集到內質網(ER)相關位點啟動，新形成的自噬體即從這些位點發出。自噬體膜很大程度上缺乏跨膜蛋白，因此認為其形成受膜相關蛋白及其脂質組成和分布的調節。前人研究表明，自噬體富含不飽和脂肪酸，而這些脂肪酸是自噬