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Lonza 384孔高通量電轉應用：篩選藥物靶點文獻分享2023/11/28

當前生物醫藥行業面臨著藥物靶點同質化嚴重的問題，確認疾病的作用機制并尋找全新的、有效的、安全的藥物靶點將成為轉化醫學和創新藥物開發的有效措施，基于高通量全基因組CRISPR篩選可以為此提供很好的幫助。CRISPR/Cas9已成為一種流行的基因編輯工具，因為它易于使用，并且與其他基因調節工具（例如siRNA技術）相比，脫靶效應更少。CRISPR/Cas9敲除篩選文庫的形式主要有混合文庫和陣列文庫，已被廣泛用于靶點識別和機制分析。雖然混合文庫的CRISPR/Cas9篩選通常更便宜且耗時更少，但陣列式

逐典細胞因子應用案例2023/11/27

上海逐典生物科技有限公司，坐落于中國(上海)自由貿易試驗區，獲得ISO9001質量體系認證，是一家專業從事重組蛋白研發和銷售的高新科技企業。逐典生物始終秉持以客戶為中心的理念，針對重組蛋白的結構設計、純化工藝及其穩定劑型相關的多項關鍵技術進行攻關和突破。定向蛋白變復性技術，可將大腸桿菌大量表達的變性固體蛋白轉變成高活性可溶性蛋白。憑借技術優勢，新品研發周期短且可控性強，為重組蛋白的高質高效研發提供保障，為企業生產降本增效。公司自成立以來成功開發30余種高活性細胞因子及多種高活性蛋白酶，覆蓋細胞培

IVIS活體成像應用聚焦——外泌體研究2023/11/27

外泌體（Exosomes），是由活細胞分泌的一種脂質雙分子結構的胞外小泡（EV，ExtracellularVesicles），直徑約為30-150nm，廣泛存在于血液、唾液、尿液、腦脊液、精液、乳汁、羊水、肺泡灌洗液以及其他生物體液中。外泌體攜帶有多種蛋白質、脂類、RNA等重要信息，不僅在細胞與細胞間的物質和信息傳遞中起重要作用，更有望成為多種疾病的早期診斷標志物，或者作為藥物的天然載體用于治療。本文將為大家介紹如何運用活體成像技術進行外泌體相關內容的研究。一，外泌體示蹤圖1外泌體（EVs）的獲

內毒素檢測-重組C因子法的原理及操作步驟！2023/11/27

一，重組C因子法原理PyroGene™重組因子C試劑盒是一種不含動物制品的LAL替代方案，FDA已許可將其作為一種替代方法。它基于一種重組產生的C因子(rFC)，C因子是馬蹄蟹凝血級聯反應中的第一個組成部分。它由內毒素結合激活。然后，產生的活性成分發揮作用，裂解合成底物，釋放熒光。反應在96孔板中操作，使用380/440nm的激發/發射波長，在時間零點和一小時孵育后，在熒光酶標儀中以37°C±1°C孵育的時間零點和一小時后，分別測量熒光。比較細菌內毒素檢測試劑盒中的擴增方法對一小時讀數和零時讀數

HL-SAN耐高鹽核酸酶，高效去除宿主2023/11/24

描述無論是實驗室規模樣品制備、還是生產規模工藝過程，去除核酸都可以改善工藝流程，如蛋白純化、病毒載體制備、mNGS中樣品處理等過程。而核酸酶的選擇，就顯得特別重要。HeatLabile-SaltActiveNuclease(熱不穩定性耐高鹽核酸酶，HL-SAN)是一種非特異性內切酶，在高鹽濃度下具有最佳活性；且該酶在多種緩沖液中都有活性，很容易通過還原劑處理而失活。這些特性使HL-SAN在需要去除DNA和RNA的應用中，更為適合。核酸污染，特別是宿主基因組DNA污染，在幾乎所有工藝流程及生物制品

Simoa技術在制藥領域的應用案例分享（下）！2023/11/24

一，Simoa超靈敏技術分析人淚液中游離VEGF-A含量1.目的:開發和驗證一種靈敏的檢測方法來測量眼液中非結合VEGF-A，以監測抗VEGF-A治療。2.Assayrange0.12-400pg/ml(LOD=0.09pg/ml);MRD=123.40名糖尿病黃斑水腫患者，接受雙抗藥物Faricimab治療，收集房水樣本。對照是未經過治療的糖尿病黃斑水腫患者，房水中的VEGFA平均水平為74pg/ml；接受雙抗藥物Faricimab治療的患者，房水中VEGF-A水平下降，而房水中Faricim

文獻解讀—不同細胞因子在CAR-T細胞活化增殖中的作用2023/11/24

增殖、存活和持續是CAR-T細胞毒性功能實現癌癥清除和持久緩解的前提。多項臨床試驗表明，CAR-T細胞強勁的擴增和長效作用影響臨床反應增強和生存期延長，而體內增殖不良與短暫緩解后的復發密切相關。在這里，我們主要討論常見γ鏈家族的細胞因子在CAR-T細胞體內外增殖、存活和持久性中的作用。IL-2IL-2于體外T細胞擴增，因為它在淋巴細胞生長和分化中起關鍵作用，并且已知它可以促進細胞毒性T淋巴細胞(CTLs)的擴增和終末分化效應T(Te)細胞的發育。IL-2，由FDA批準的γc細胞因子，已在初步臨床

Gentle Trans——解放雙手的自動液體轉移神器2023/11/23

某天下班后，小A和老板在走廊遇到：老板：明天下班后的部門團建你怎么沒參加呢？小A：明天我的20瓶細胞要收獲了，可能趕不上團建的時間。老板：咱們不是有GentleFlex自動化設備嗎？1小時就搞定了！可是我要把細胞轉液到袋子里面再接自動化設備，小A：20瓶呢…我還要準備清洗液，凍存液，這些是手動開放操作，耗時長還有污染風險。老板：不用擔心了，咱們有自動轉液儀，上周我就預定了2臺，明天到貨。自動快速，解放雙手！小A：太好了，真是老板！GentleTrans自動轉液儀大揭秘！！！下面讓我們具體了解一下

基點Skadi -80℃自動化單體存儲系統優勢！2023/11/23

基點生物核心自動化技術加持，確保Skadi能夠保持足夠的穩定性與實用性，為多規格生物樣本管理及珍貴試劑保存提供安全、智能的解決方案。從智慧管理到自動化存取一氣呵成，多種場景靈活應用，多種耗材兼容存儲，助力實現高質量、高精度、數據閉環的生物樣本及珍貴試劑管理升級。Skadi-80℃自動化單體存儲系統的創新功能1、自動化存取》在低溫環境下，完成凍存盒/凍有管的自動化存取2、存儲環境控制》在低溫環境下進行存取操作，減少無辜樣本復溫》出入庫設置緩沖隔離，消除頻繁除冰困擾3、權限管理》庫位權限與人臉識別結

IL-12，免疫屆的端水大師！2023/11/22

IL-12家族的細胞因子在結構上表現出相似性，但在免疫系統中有不同的功能。其中促炎細胞因子IL-12和IL-23有比較深入的研究。這兩個細胞因子共享細胞因子亞單位p40和受體β鏈，但在自身免疫性疾病、癌癥和感染中具有不同的功能。白細胞介素12（IL-12）由活化的抗原呈遞細胞（樹突狀細胞，巨噬細胞）產生。它促進Th1反應的發展，是T細胞和NK細胞產生IFNγ的有力誘導劑。圖1.IL-12細胞因子家族的體系結構[1]IL-12介導的信號轉導IL-12和IL-23激活Jak/STAT通路。IL-12

切向流過濾工藝如何優化？2023/11/22

切向流技術（TangentialFlowFiltration,TFF），又稱錯流過濾（Cross-FlowFiltration，CFF），料液以一定的流速在膜表面循環，小于膜孔徑的物質可以透過膜到透過端，而大于膜孔徑的物質會被膜截留，從而實現不同物質的分級分離。相比于死端過濾，切向流過濾再循環料液流經膜表面，液體形成的“沖刷作用”沖洗整個膜表面，降低了膜孔堵塞及膜污染的風險，形成長時間穩定的膜過濾生產能力。通過對切向流工藝中的操作參數及各種變量進行優化，可以有效提高過濾效率，同時降低物料成本，在

小動物活體成像系統的優勢！2023/11/22

一，最高的光學成像靈敏度珀金埃爾默IVIS成像系統提供了目前市場上最高的光學成像靈敏度。這依托于高性能的成像硬件配置，包括具有90%以上量子效率的背部薄化背照式科學一級CCD芯片，低至-90℃的CCD制冷溫度及超低讀出噪音和暗電流，f/0.95超大光圈的大口徑優質定焦鏡頭，高透光率（95%）濾光片、高品質的成像暗箱以及迅捷的濾光片轉換技術。利用IVIS成像系統并結合生物發光腫瘤細胞株，可在活體水平觀測腫瘤的生長及轉移中的極微弱信號，使得研究者在腫瘤發展早期即可觀察到其體內的微弱變化。同時，對于某

IL-21在抗腫瘤治療和自體免疫性疾病中的作用2023/11/21

細胞因子作為免疫反應的重要成員，在調節各種免疫反應方面起著至關重要的作用，且在疾病的發生、進展和治療過程中扮演著重要角色，因此確定細胞因子調節疾病狀態的機制有利于設計新的具有前景的治療方法。一，IL-21細胞因子IL-21細胞因子于2000年被發現，屬于IL-2家族成員，結構上是一種四α螺旋束I型細胞因子。它可以通過由IL-21R和普通γ鏈/IL-2Rγ組成的受體復合體激活下游信號通路（見下圖1）。IL-21由活化的CD4+T細胞、NKT細胞（自然殺傷T細胞）或濾泡輔助性T細胞（follicul

干貨合集強勢來襲，你關心的細胞消化利器看這里！2023/11/21

逐典TrypLUS消化液是一種胰蛋白酶類似物（TrypsinLikeEnzyme），是一種通過生物工程制備的非動物源性重組蛋白酶，與胰蛋白酶有相似的解離動力學，穩定性更高，純度更好，消化更溫和，細胞毒性更低。目前主要應用于細胞培養中，可以在賴氨酸和精氨酸的C末端切割肽鍵，可以替代豬或牛胰蛋白酶（Trypsin）對貼壁細胞的消化解離。生物制藥中，GMP級別的TrypLUS能夠為疫苗生產、病毒載體生產提供高質量和高性價比的貼壁細胞消化解決方案。非動物來源.即開即用.高效溫和逐典TrypLUS消化液優

內毒素檢測（光度法）的原理及操作步驟！2023/11/21

一，動態顯色法原理革蘭氏陰性細菌內毒素催化了LAL中酶原的活化。初始活化速率由內毒素的濃度決定。活化后的酶催化了無色底物Ac-lle-Glu-Ala-Arg-pNA釋放出pNA。在整個孵育過程中，用光度法連續測量405nm處的游離pNA。通過將其反應時間與標準曲線比較，計算出樣品中的內毒素濃度。酶原內毒素凝固酶底物+H2O酶肽肽+pNA二，動態濁度法原理濁度法是通過檢測鱟試劑與內毒素反應過程中的濁度變化來檢測內毒素含量的鱟試驗法。動態濁度法是檢測反應混合物的濁度到達某一預先設定的吸光度或透光率所

答疑小課堂 | 逐典細胞因子常見問題解答2023/11/20

細胞因子疑惑解答逐典細胞因子優勢1.非標簽純化2.特異性強，純度高3.全面覆蓋各類細胞培養所需4.規格可根據需求定制5.GMP和科研級別均可提供6.具有改良型產品：IL-2Pro擁有更高溶解度，IL-15Pro擁有更高活性細胞因子(cytokine，CK)是由多種組織細胞(主要為免疫細胞)所合成和分泌的小分子多肽或糖蛋白。細胞因子能介導細胞間的相互作用，具有多種生物學功能，如調節細胞生長、分化成熟、功能維持、調節免疫應答、參與炎癥反應、創傷愈合和腫瘤消長等。常見問題問：常見細胞因子有哪些？有什么

基點Skadi -20℃自動化單體存儲系統優勢！2023/11/20

基點生物核心自動化技術加持，確保Skadi能夠保持足夠的穩定性與實用性,為實驗室樣本暫存及植物種質資源保藏提供-20C智能化、自動化的安全存儲解決方案。從智慧管理到自動化存取一氣呵成，多種場景靈活應用，多種耗材兼容存儲，助力實現高質量、高精度、數據閉環的生物樣本暫存及植物種質資源保藏管理升級。Skadi-20℃自動化單體存儲系統的創新功能1、自動化存服》在低溫環境下，完成凍存盒/凍有管的自動化存取2、存儲環境環境控制》在低溫環境下進行存取操作，減少無辜樣本復溫》出入庫設置緩沖隔離，消除頻繁除冰困

CBS隔氮型—深低溫液氮罐解決方案！2023/11/20

我們生產的液氮罐-隔氮型V系列，將液氮深低溫儲存性能提升到一個全新的高度，最大限度地保障樣品完整性。我們的技術包括：圍繞儲存箱布置的一個充滿液氮的包覆層，確保整個儲存箱保持干燥和行業溫度一致性。采用專有技術的隔氮包覆層，將液氮與儲存箱分離，降低了樣品與液氮交叉污染的風險，增加了有效儲存空間。配有可編程控制器，讓您放心使用。此控制器專為深低溫儲存設計，設有雙溫度顯示屏、自動充液、報警、充液計時器、可導出報告和監測系統。CBS液氮罐-隔氮型設有干燥的深低溫儲存區域，其內部平均溫度為-193°C。一，

FlashGel®閃膠系統的應用!2023/11/20

一、用于DNA的FlashGel®系統實時可視化內置的照明裝置能夠讓你在環境光下觀察DNA在凝膠中的遷移。當達到所需的分離時，停止運行（根據感興趣的片段，最快2分鐘）。在沒有保護眼睛的情況下，可以安全地在有光的底座上觀察盒狀物。在FlashGel®盒上分離的DNA條帶也可通過紫外光檢測。可使用FlashGel®照相機或標準的文件系統對FlashGel®盒進行拍照。極其敏感的檢測FlashGel®系統比用溴化乙錠染色的凝膠敏感5-20倍，可以檢測到理想的樣品篩選工具用于DNA的FlashGel®系

電轉百科指南⑥：CRISPR基因編輯的轉染技巧與注意事項（下篇）2023/11/20

02/下篇Knock-in對于Knock-in，目前還存在一定的難度，大多數的出版物只能實現10-40%的敲入效率，不同位點也存在差異。NatureBiotechnology今年5月的一篇出版物利用SLEEK(SeLectionbyEssential-geneExonKnock-in)技術可以在T細胞上實現超過90%的KI效率，同樣在其他常用的免疫細胞如NK，Bcell，IPSC等細胞都實現了非常高的KI效率。對于常規的KI實驗，我們依然可以從以下方面考量進行進一步優化：DonorDNA用量的測