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2023
05-11

標記二抗的選擇及應用實例
標記二抗的作用：二抗是在其它宿主體內制備的能與一抗或一抗片段結合的抗體，上面通常連有酶或熒光素等標簽。由于標記二抗所具備的優點使得其在免疫學實驗中得以應用廣泛，如westernblot(通過與特異性抗體結合來鑒定蛋白質)，ELISA，免疫組織化學(檢測組織中的特異性抗原)，免疫細胞化學(通過免疫學方法檢測細胞的抗原組成)，流式細胞術及免疫沉淀(通過抗原與抗體的特異性結合作用來分離相應抗原)。二抗針對某一特定物種(如小鼠)的所有抗體均具有特異性，因而使用標記二抗可以免去對每一個一抗進行標記，大大節
2023
04-13

選購線粒體染色試劑盒要考慮哪些因素？
線粒體染色試劑盒是一種用于分離、純化、檢測和定量分析線粒體的試劑盒。它可以用于研究線粒體DNA含量、線粒體膜電位、線粒體膜透過性等線粒體功能和結構方面的內容。其作用和原理如下：線粒體染色試劑盒作用：1.分離和純化線粒體：通過離心、低速離心分離和高速離心純化方法，使線粒體從細胞中分離出來。2.檢測線粒體DNA含量：線粒體染色試劑盒可以檢測線粒體DNA含量。3.測量線粒體膜電位：線粒體染色試劑盒還可以測量線粒體膜電位。4.測量線粒體膜透過性：線粒體染色試劑盒可以測量線粒體膜透過性。線粒體染色試劑盒的
2023
04-04

蛋白電泳試劑盒的操作方法介紹
蛋白電泳試劑盒是一種用于分離和檢測蛋白質的實驗材料。它包含有需要用到的試劑和工具，可以快速、方便地進行蛋白質分離和檢測。蛋白電泳試劑盒主要用于分離和檢測蛋白質樣品。通過其含有的試劑和工具，可以進行凝膠制備、電泳分離、染色和凝膠圖像分析等步驟，實現不同數量和質量的蛋白質的分離和檢測。蛋白電泳試劑盒的原理是利用電泳技術分離蛋白質，當電場作用于凝膠中的蛋白質時，它們會向負極移動。不同大小和電荷的蛋白質會根據其遷移速度和遷移距離而分離出來。分離完成后，通過染色方法可以使蛋白質產生顏色反應，然后通過凝膠圖
2023
03-20

瓊脂糖凝膠與核酸電泳小知識分享
影響核酸電泳遷移率的幾個因素1、核酸分子大小在一定濃度的瓊脂糖凝膠中，DNA片段遷移距離和其含有的堿基對數量成反比，因此可以通過與標準條帶遷移距離進行比較，由此得出目的條帶的大小，但這僅對雙鏈線性的DNA比較準確(DNAMarker一般為雙鏈線狀DNA)，且對大于20kb的DNA不適用(普通瓊脂糖凝膠很難將其分開)。2、核酸分子構象DNA分子在電場中的遷移速度不僅和分子量有關，還和它本身的構象有關。相同分子量的線狀、開環和超螺旋DNA在瓊脂糖凝膠中的移動速度不一樣，移動速度次序為：共價閉環DNA
2023
03-15

簡單介紹PEI轉染試劑的保存方法
一、PEI轉染試劑的作用PEI轉染試劑，全稱聚乙烯亞胺（polyethylenimine），是一種常見的DNA、RNA質粒轉染試劑。PEI會與DNA形成一種復合物，并將DNA導入人體細胞內，使其表達您需要的蛋白質。二、PEI轉染試劑的原理PEI轉染試劑的原理是利用PEI分子所帶上的各種官能團對DNA或RNA質粒進行吸附，形成一個復合物，再將該復合物轉運至細胞內，使DNA或RNA質粒得以進入細胞，并在細胞內進行表達。而PEI分子帶上的陽離子基團能夠與細胞的負電荷相結合，從而達到較高的轉染效率。直鏈
2023
03-09

高保真DNA聚合酶的操作方法介紹
高保真DNA聚合酶是一種具有高準確性和高速度的酶，廣泛應用于PCR擴增、突變篩選、基因克隆、DNA測序等領域。其在基因工程和生物技術研究中有著十分重要的作用。作用原理：高保真DNA聚合酶可將DNA單鏈合成DNA雙鏈，并對DNA進行擴增。該酶的作用機理基于DNA聚合酶基本的催化反應機制：利用DNA單鏈為模板，在DNA聚合酶的作用下，引物與模板互補結合進行DNA聚合反應。高保真DNA聚合酶的主要特點是：具有一定的3’-5’外切活性，能修正因PCR擴增引入的多種誤差，如插入、缺失、錯配等；具有高度準確
2023
02-22

DNA聚合酶和RNA聚合酶的異同點
DNA聚合酶是細胞復制DNA的重要作用酶，目前為止已發現有5種DNA聚合酶，分別為DNA聚合酶Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ，都與DNA鏈的延長有關。DNA聚合酶RNA聚合酶的相同點：都能以DNA為模板，從5'向3'進行核苷酸或脫氧核苷酸的聚合反應。DNA聚合酶RNA聚合酶的不同點：1、作用底物不同。RNA聚合酶底物是NTP；DNA聚合酶底物是dNTP。2、RNA聚合酶作用不需要引物，而DNA聚合酶作用需要引物。3、RNA聚合酶本身具有一定的解旋功能，而DNA聚合酶沒有，當需要解開雙鏈的時候要解旋酶和拓撲異
2023
01-16

細胞凍存和細胞凍存步驟
細胞凍存是細胞保存的主要方法之一。利用凍存技術將細胞置于-196℃液氮中低溫保存，可以使細胞暫時脫離生長狀態而將其細胞特性保存起來，這樣在需要的時候再復蘇細胞用于實驗。而細胞凍存步驟及細胞凍存液的選擇也是影響細胞凍存效率及解凍復蘇后細胞活力的主要條件。下面就以細胞凍存液為例講解細胞凍存原理及細胞凍存的步驟。細胞凍存及復蘇的基本原則是慢凍快融，實驗證明這樣可以最大限度的保存細胞活力。目前細胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護劑，這兩種物質能提高細胞膜對水的通透性，加上緩慢冷凍可使細胞內的水分滲出細胞
2023
01-06

慢病毒的感染效率受哪些因素影響？
慢病毒是一種有包膜的RNA病毒，直徑為80-120nm，呈二十面體對稱結構、球形。病毒顆粒最外層是包膜(包膜蛋白決定了感染細胞的類型)，再往里依次為基質蛋白和衣殼，最里面是兩條相同的正股RNA鏈和酶(逆轉錄酶、整合酶和蛋白酶)。慢病毒感染的顯著特點是感染個體在出現典型的臨床癥狀之前，大多經歷長達數年的潛伏期，之后緩慢發病，因此這些病原體被稱為慢病毒。慢病毒包裝系統一般由慢病毒表達載體和慢病毒包裝載體組成。而慢病毒包裝質粒可提供所有的轉錄并包裝RNA到重組的慢病毒載體所需要的所有輔助蛋白。慢病毒感
2022
12-21

溶酶體是細胞內的消化器官
溶酶體（Lysosomes）是動物細胞中重要的細胞器,其存在的完整性與動物生理病理均密切相關。溶酶體是真核細胞中為單層膜所包圍的細胞質結構，內部pH4～5，含豐富的水解酶，具有細胞內的消化功能。新形成的初級溶酶體經過與多種其他結構反復融合，形成具有多種形態的有膜小泡，并對包裹在其中的分子進行消化。因此，溶酶體具有溶解或消化的功能，為細胞內的消化器官。溶酶體染色試劑盒可以標記活細胞中的溶酶體，使之帶綠色熒光(Ex/Em=405/505nm)。本試劑盒使用染料為一種疏水性復合物，屬趨溶酶體染料，染料
2022
12-09

RNA的提取方法總結
這篇文章主要講的是幾種常用的RNA提取方法。1、異硫氰酸胍氯化銫超速離心法原理：使用蛋白質變性劑異硫氰酸胍有效抑制RNA酶的活性，經過起始密度為1.78g/ml的氯化銫介質，進行密度梯度超速離心，RNA沉淀于管底，而DNA與蛋白質在上清中。使用這種方法，不但能得到高質量的RNA，而且能同時分離出細胞染色體DNA.本法對于冷凍時間長、細胞質和細胞核不易分離的組織標本以及富含RNA酶的組織細胞(如胰腺)的RNA提取尤其適合。此法提取的RNA的質量好和成功率高，已成為提取哺乳動物細胞RNA的常規方法。
2022
11-29

微生物的培養方法步驟介紹
微生物培養所培養的微生物通常是病菌、細菌、放線菌、真菌等，屬于生物培養的一種。微生物培養步驟：1.配置不同濃度的營養液稀釋液:取營養液1ml溶于9ml無菌水中,振蕩5min配成10%的溶液.2.將容器口靠近(注意不是對著)酒精燈燈焰用吸管從此溶液中吸取1ml加入到裝有9ml無菌水的試管中.以此類推制成1%,0.1%,0.01%等不同濃度的稀釋液.3.將試管口靠近(注意不是對著)酒精燈燈焰,左手拿試管,右手托培養皿(僅露一條小縫,且靠近燈焰).將溶液倒入培養皿中,在各培養皿上標上濃度.4.將有細菌
2022
11-27

蛋白酶K的性質從這三個方面介紹
蛋白酶K來源于林伯氏白色念球菌（TritirachiumalbumLimber），是一種與枯草桿菌蛋白酶相關的絲氨酸蛋白酶。由于它能降解角蛋白（keratin），因此被命名為蛋白酶K。它是一種高活性的廣譜蛋白酶，在變性劑尿素或十二烷基磺酸鈉（sodiumdodecylsulfonate，SDS）溶液中依然能保持較高酶活力，所以被廣泛應用于各種生物材料中的DNA或RNA的提取。蛋白酶K的性質從這三個方面介紹：一、分子結構蛋白酶K由一條肽鏈組成，包含277個氨基酸殘基，相對分子質量為28930。活性
2022
11-08

高保真DNA聚合酶的定義及如何選擇
DNA聚合酶是PCR反應中*組成部分，是參與DNA復制中的重要酶，被用在生物及醫學等領域的各個研究方向上。PCR技術發明至今40多年的時間里，從早期被發現的TaqDNA聚合酶到現在，酶越來越多樣化。隨著新酶的發現和對舊酶的改造，DNA聚合酶的保真性、特異性、靈敏度等都獲得了明顯的改進。而高保真DNA聚合酶的出現正是順應了市場需求，下面小編將圍繞高保真DNA聚合酶的作用原理和應用方向等進行介紹。一、什么是什么是高保真酶高保真DNA聚合酶有聚合中心和酶切中心，聚合中心具有5'→3'的DNA聚合酶活性
2022
11-07

李記生物細胞轉染試劑常見問題（一）
涉及產品EZTransPlus細胞轉染試劑（Ⅱ）貨號：AC04L011EZTrans細胞轉染試劑（高效）貨號：AC04L091/AC04L092EZTrans細胞轉染試劑（低毒）貨號：AC04L098/AC04L099其他轉染產品EZTransPro細胞轉染試劑（GMP）貨號：AC04L032/AC04L033/AC04L034EZTransRNA轉染試劑貨號：AC04L051李記生物細胞轉染試劑常見問題（一）Q1：李記有3款轉染試劑，這3款有什么區別？和Li**對比效果如何？A1：我司自行測試
2022
10-20

MH培養基的原理及用法
MH培養基為MH瓊脂培養基，微生物中所指的MH是Mueller-Hinton的首字母縮寫，指的是水解酪蛋白。所以MH培養基也成為水解酪蛋白培養基。常用作培養基原材料，提供細菌生長所需的生長因子。MH培養基的原理：牛肉粉和酸水解酪蛋白提供氮源、維生素和氨基酸；可溶性淀粉吸收有毒的代謝產物。MH培養基的成分：酸水解酪蛋白/酸水解酪素17.5g牛肉浸膏粉2g淀粉1.5g瓊脂12gMH培養基的用法：稱取本品21.0g,加熱溶解于1000ml?蒸餾水中,121℃高壓滅菌15分鐘,備用。MH培養基的質量控制
2022
09-27

分析影響細胞轉染效率的因素
細胞轉染指的是將外源分子如DNA、RNA等導入到真核細胞內部的技術。隨著基因和蛋白功能研究的深入，轉染已經成為科研實驗中常用的技術手段之一。對于細胞轉染實驗，轉染試劑、轉染方法、細胞狀態等都會影響到細胞轉染的效率，本文主要對影響細胞轉染效率的8個因素做一介紹。1.轉染試劑瞬時轉染和穩定轉染可以選擇不同的轉染試劑，轉染試劑的選擇又可以根據已經發表的文獻，已經有很多細胞株被成功轉染，通過文獻資料可以參考最適的轉染試劑，當然也要根據不同的實驗需求選擇。一般來說轉染試劑的要求是低毒，高效，廉價易得。2.
2022
09-19

胎牛血清使用中的常見問題解答
1、如何儲存和解凍血清才不會使產品質量受損?將血清從冷凍箱取出后，先置于2～8℃冰箱使之融解，然后在室溫下使之全融。但必須注意的是，融解過程中必須規則地搖晃均勻。長時間儲存在2-8℃時，血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可見的混濁。因此，推薦在-20℃以下儲存血清，并避免反復凍融。我們建議血清應保存在-2O℃。若存放于4℃時，請勿超過一個月。若一次無法用完一瓶，建議無菌分裝血清至恰當的滅菌容器內，再放回冷凍。2、血清中包含絮狀沉淀，它們是什么，怎
2022
08-19

核酸純化的方法及原理
核酸抽提與純化是分子生物學試驗的基礎，核酸純化方法是影響提取核酸質量高低的最重要因素，也是下游分子生物學試驗成敗的關鍵。核酸純化的方法及原理如下：一、PC抽提法PC抽提是去除蛋白質有效的手段，但超過了該飽和度，裂解體系中的蛋白質不會被一次去除，必須靠多次抽提，方可*去除。且每次抽提都會損失部分核酸。另外，體系太粘稠的壞處是，蛋白質難以*去除，以及基因組DNA會斷裂得更厲害，所以要注意裂解液與樣品的比例。PC抽提的另外一個用途是，利用酸性酚可以部分去除DNA的特點，在RNA抽提時獲得DNA殘留極少
2022
07-25

化學發光免疫分析包含免疫分析系統和化學發光分析系統
在常溫下由化學反應產生的光，產生電子能級處于激發態的物質，后者通過躍遷釋放能量產生光子，從而導至的發光現象。化學發光是一個多步驟的過程。學發光免疫分析(ChemiluminescenceImmunoassay，CLIA)誕生于1977年，是近十年來在世界范圍內發展非常迅速的非放射性免疫分析，將高靈敏的化學發光技術與高特異性的免疫反應結合起來建立的微量測定技術，因此該技術靈敏度高、線性范圍寬、應用范圍廣。而且CLIA與放射免疫分析(RIA)、熒光免疫分析(IFA)及酶免疫分析(EIA)相比，操作簡

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