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小鼠干細胞的新突破2017/10/25

英國研究團隊在近日《自然》雜志上撰文指出，他們借助一種全新方法，利用小鼠發育初期的4—8個細胞胚胎，培育出了一種干細胞系——擴展潛能干細胞（EPSCs）。新細胞不僅能發育成類型的細胞，且發育潛力超過胚胎干細胞等，對人類的再生醫學意義重大，有望為研究治療流產和發育紊亂問題開辟新方向。目前得到的胚胎干細胞和誘導多能干細胞只能發育成某些特定的細胞譜系。為了發現新型干細胞用于再生醫學等領域，劍橋大學韋爾科姆基金會桑格研究所劉澎濤博士領導的團隊，發明了一種從發育初階段開始培育干細胞的新方法。在此階段，受精

高血壓疾病動物實驗研究2017/10/20

高血壓（hypertension）是指以體循環動脈血壓（收縮壓和/或舒張壓）增高為主要特征（收縮壓≥140毫米汞柱，舒張壓≥90毫米汞柱），可伴有心、腦、腎等器官的功能或器質性損害的臨床綜合征。高血壓是常見的慢性病，也是心腦血管病主要的危險因素。正常人的血壓隨內外環境變化在范圍內波動。在整體人群，血壓水平隨年齡逐漸升高，以收縮壓更為明顯，但50歲后舒張壓呈現下降趨勢，脈壓也隨之加大。近年來，人們對心血管病多重危險因素的作用以及心、腦、腎靶器官保護的認識不斷深入，高血壓的診斷標準也在不斷調整，目前

動脈粥樣硬化研究動物實驗2017/10/20

動脈粥樣硬化（atherosclerosis，AS）是冠心病、腦梗死、外周血管病的主要原因。脂質代謝障礙為動脈粥樣硬化的病變基礎，其特點是受累動脈病變從內膜開始，一般先有脂質和復合糖類積聚、出血及血栓形成，進而纖維組織增生及鈣質沉著，并有動脈中層的逐漸蛻變和鈣化，導致動脈壁增厚變硬、血管腔狹窄。病變常累及大中肌性動脈，一旦發展到足以阻塞動脈腔，則該動脈所供應的組織或器官將缺血或壞死。由于在動脈內膜積聚的脂質外觀呈黃色粥樣，因此稱為動脈粥樣硬化。動脈粥樣硬化模型，模型構建方式常見有幾種，現在介紹種

RACE技術的原理和操作2017/10/13

近年來隨著生物技術的不斷發展，出現了許多克隆新基因的方法和手段，如圖譜克隆技術、轉座子標簽技術、mRNA差異顯示技術二基因組減法技術以及cDNA文庫篩選技術等。但上述方法人多具有實驗周期長、技術步驟煩瑣且工作量大等特點。cDNA末端快速擴增技術（rapidamplificationofcDNAends，RACE）是一種基于PCR從低豐度的轉錄本中快速擴增cDNA的5'和3'末端的有效方法，以其簡單、快速、廉價等優勢而受到越來越多的重視.經典的RACE技術是由Frohman等（1988）發明的一項

實驗助手——質粒圖譜如何“瞅”2017/09/28

每當拿到一個質粒圖譜，是不是一下就有點懵了？這些ori、RBS、tet是什么？這些箭頭代表什么，轉錄的方向嗎？不要著急，申知心生物把這些告訴你，也許會解決你的困惑。質粒和載體傻傻分不清楚質粒(Plasmid)是附加到細胞中的非細胞的染色體或核區DNA原有的能夠自主復制的較小的DNA分子(即細胞附殖粒、又胞附殖粒)。大部分的質粒雖然都是環狀構型。載體即要把一個有用的基因（目的基因——研究或應用基因）通過基因工程手段送到生物細胞（受體細胞），需要運載工具（交通工具）攜帶外源基因進入受體細胞，這種運載

實驗助手—六大要素讓你告別RNA反轉錄失敗2017/09/26

RTPrimer的佳選擇通常RTprimer可分為三類：oligodT，隨機引物以及基因特異性引物。OligodT引物之所以應用范圍更加廣泛，是因為可由此獲得mRNA的全長拷貝。然而如果mRNA長度過長4kb，或者沒有polyA尾（原核mRNA或rRNA），就需要考慮使用隨機引物進行RNA的反轉錄。隨機引物雖能長基因的5’末端的轉錄，但并不能獲得整個基因全長的cDNAs，且對RNA樣品質量要求比較高，此時可用6-8個核酸聚合體來提高cDNAs的合成量。而對于真核生物的qPCR，長隨機引物和Oli

內外科大夫那些有趣的區別2017/09/18

雖然說內科和外科都是相親相愛的一家人，但是細數一下，兩者之間還是有一些有趣的差別，看看網友們是如何總結的。區別一：內科大夫多話癆皇上：此番遼國起傾國之力，那蕭皇后親率三十萬大軍南下，諸位愛卿如何是好？內科大臣:啟稟皇上，臣以為還當細細打探方能定奪，不宜早下決定。究竟是蕭皇后親征，還是南院大王統帥？又或者是其他將領？這分型應當明確。三十萬兵力應當有所鑒別，據臣所知遼國連續三年大旱，北方更有金人犯境，能聚三十萬兵力實在存疑，打個問號。遼國大軍南下，是分兵幾路？每路兵馬幾何？還需完善相關檢查。至于如何

Western blot，內參蛋白選用技巧！2017/09/12

一、WesternBlot實驗為什么要用內參?WesternBlot實驗結果進行內參校正已成為一種慣例。目的蛋白表達量的相對多少，前提條件是等量的組織細胞蛋白上樣，才有比較的基礎，特別是表達量不高時，上樣量的的差別就很有可能影響結果的分析。因此，在WesternBlot試驗中，進行內參的檢測，有以下兩點作用：1、校正蛋白質定量、上樣過程中存在的誤差，實驗結果的準確性；2、使用內參可以作為空白對照，檢測蛋白轉膜情況是否、整個WesternBlot顯色發光體系是否正常。二、你的內參選對了嗎？作為內參

ELISA免疫測定，實驗技巧！！2017/09/12

ELISA是酶聯接免疫吸附劑測定(Enzyme-LinkedImmunosorbnentAssay)的簡稱。它是繼免疫熒光和放射免疫技術之后發展起來的一種免疫酶技術。此項技術自70年代初問世以來，發展十分迅速，目前已被廣泛用于生物學和醫學科學的許多領域。在臨床檢驗中主要通過抗原抗體反應檢測體液中的抗體或抗原性物質。ELISA免疫測定目的是？1.測定體液中的各種蛋白質，包括含量極少的蛋白質如甲胎蛋白等；2.測定激素，包括小分子量的甾體激素等；3.測定抗生素和藥物；4.測定病原體抗原，HBsAg、H

1型糖尿病——也許受腸道細菌影響2017/09/07

一項新動物實驗的研究發現，出生后不久就接受抗生素，或者在無菌的環境中長大，小鼠會發展出嚴重的胰腺炎，這是1型糖尿病的前兆。科學家早已知道，HLA/MHC基因的某些常見變異，能防范各種自身免疫性疾病，特別是1型糖尿病。他們研究出一批小鼠進行動物實驗，擁有人類白細胞抗原(HLA)基因和主要組織相容性復合物(MHC)，由微小的表面蛋白質的細胞作為一些主力抑制免疫系統。然而，這些基因和微小的細胞蛋白質是如何調節immune-modulating影響收益率？仍籠罩在神秘之中。現在，哈佛大學醫學院的科學家們

產后抑郁——也許和妊娠糖尿病有關2017/09/06

來自IcahnSchoolofMedicineatMountSinai和KarolinskaInstitutet的研究人員發現，妊娠糖尿病導致了初次母親產后抑郁（PPD）的風險。這是迄今為止大的同類研究，其中包括70多萬名婦女。結果在“journalDepressionａndAnxiety”雜志上。研究人員還確定，抑郁癥史女性比沒有診斷過抑郁癥的母親更有可能體驗PPD，數值達20倍以上。妊娠糖尿病單獨增加PPD的風險，孕婦抑郁癥與妊娠糖尿病的病史進一步增加了PPD的可能性。“大多數從業者認為這是

建立胃癌動物模型2017/08/31

1．甲基膽蒽誘發小鼠胃癌動物模型（1）取20g左右的小鼠，無菌手術下，在腺胃粘膜面穿掛含甲基膽蒽（MC）線結。（2）含MC的線結是用普通細線，在一端打結后，將線結置于盛有MC小玻璃試管內，在酒精燈上微微加溫，使MC液化滲入線結。MC濃度為0.05～0.1g20-甲基膽蒽內浸入10～20根線。（3）手術埋線后4～8個月可誘發成功胃癌。2．不對稱亞硝胺誘發小鼠胃癌動物模型劑量為0.25ml/kg體重，3個月后全部動物發生前胃乳頭狀癌，7～8個月后有85～發生前胃癌。昆明種敏感。A系次之，615系小鼠

建立食管癌動物模型2017/08/30

1．(CH3)2NNO（MBNA）誘發大鼠食管癌動物模型（1）取體重100g以上的Wistar大鼠；（2）任其食用含(CH3)2NNO的飲水，并將MBNA摻入飼料中使每日攝入量達0.75～1.5mg/kg體重；（3）80～100天可誘發成食管癌。2．二烴黃樟素（Dihydrosafrole）誘發大鼠食管癌動物模型（1）二烴黃樟素是一種制備啤酒的調味品，在大鼠飼料中加入百萬分之二千五百至一萬（2500～10000ppm）黃樟素，就能引起20～75%的食管癌。3．(CH3)2NNO誘發大鼠食管癌動物

幾種核酸提取方法2017/08/24

(1)濃鹽法利用RNP和DNP在電解溶液中溶解度不同，將二者分離，常用的方法是用1MNacl抽提,得到的DNP粘液與含有少量辛醇的CCL3一起搖蕩,使乳化,再離心除去蛋白質,此時蛋白質凝膠停留在水相及CCL3相中間，而DNA位于上層水相中,用2倍體積95％乙醇可將DNA鈉鹽沉淀出來.也可用0.15MNaCL液反復洗滌細胞破碎液除去RNP,再以1MNaCL提取脫氧核糖蛋白,再按CCL3---異醇法除去蛋白.兩種方法比較,后種方法使核酸降解可能少一些.以稀鹽酸溶液提取DNA時,加入適量去污劑,如SD

2017年度國自然基金結果公布了！2017/08/23

?2017年3月1日至3月20日項目申請集中接收期間，自然科學基金委員會（以下簡稱自然科學基金委）共接收項目申請190840項，經初步審查和復審后共受理187135項。依據《自然科學基金條例》和自然科學基金相關管理辦法，經專家評審和委務會議審批，決定資助面上項目18136項、重點項目667項、重大項目2項、重點（地區）合作研究項目107項、青年科學基金項目17523項、青年科學基金項目399項、創新研究群體項目38項、海外及港澳學者合作研究基金項目142項、地區科學基金項目3017項、部分聯合基

免疫沉淀實驗2017/08/17

一、服務介紹免疫沉淀（Immunoprecipitation，IP）是指利用抗體與抗原間的特異性結合特性，將抗原（我們感興趣的靶蛋白）-抗體復合物從樣品中分離出來，達到初步分離純化靶蛋白的目的。之后，樣品可以再進行Westernblot分析。二、實驗原理免疫沉淀是利用抗原與抗體免疫反應達到純化，定性檢測蛋白的目的，即在蛋白質提取液中加入與抗原（靶蛋白質）特異性結合的抗體，抗體與抗原結合后形成免疫復合物，再與蛋ProteinA/G或二抗偶聯的瓊脂糖珠子孵育，通過離心得到免疫復合物再經過純化，洗脫后

PAS染色法實驗2017/08/16

一、服務介紹PAS染色法(PeriodicAcid-Schiffstain)在組織學上，主要用來檢測組織中的糖類。過碘酸把糖類相鄰兩個碳上的羥基氧化成醛基，再用Schiff試劑和醛基反應使呈現紫紅色。隨著醫學實驗技術的發展，糖原染色應用的范圍更加廣泛，如用以證明與鑒別細胞內空泡狀的性質，心肌病變及其他心血管疾病的診斷，糖原累積病診斷和研究，糖尿病的診斷和研究，用于某些腫瘤的診斷等。二、實驗原理PAS染色又稱過碘酸雪夫染色，糖原染色。PAS染色一般用來顯示糖元和其它多糖物質。過碘酸能使細胞內的多糖

高質量RNA提取條件之一2017/08/09

1.迅速滅活內源的RNA酶，以防止RNA降解。以下3個方法均可有效使內源RNA酶失活：1）用含離液（如胍鹽）的細胞裂解液收獲樣品，并立即勻漿。2）用液氮瞬間凍結樣品。值得特別注意的是：組織塊足夠小，在浸入液氮的瞬間就能凍結，以瞬間令RNA酶失活。3）立即將樣品置于RNAfixer無液氮RNA樣品儲存液中。它是一種水相、無毒的收集試劑，能立即穩定并保護完整、未凍結的組織和細胞樣品中的RNA。關鍵要點是組織樣品切片要夠薄（），這樣RNAfixer才能在RNase破壞RNA之前迅速滲入組織塊中。2.低

血清的保存方式2017/08/07

血清的保存應該注意以下幾點：（1）生物學實驗中需要長期保存的血清儲存于-20℃-70℃低溫冰箱中。4℃冰箱中保存時間切勿超過1個月。由于血清結冰時體積會增加約10%，因此，血清在凍入低溫冰箱前，預留體積空間，否則易發生污染或玻璃瓶凍裂。（2）熱滅活是指56℃，30分鐘加熱已解凍的血清。生物學實驗中加熱過程中須規則搖晃均勻。此熱處理的目的是使血清中的補體成分（complement）滅活。除非，一般不建議作此熱處理，因為熱處理會造成血清沉淀物顯著增多，而且還會影響血清的質量。補體參與反應有:細胞毒作

結締組織類細胞培養2017/07/31

一、成纖維細胞培養用人或動物胚體為好；動物可用小鼠或雞胚，去頭和內臟，剪成小碎塊后，用胰蛋白酶消化法培養；如為人胚，可取皮膚培養。幼兒包皮是培養成纖維細胞的很好對象。二、巨噬細胞培養1．實驗前三天，向每只小鼠腹腔內注入無菌硫羥乙酸肉湯1ml（勿注入腸內）。2．引頸殺死動物，手提鼠尾將全鼠浸入70％酒精中3～5秒。3．置動物于解剖臺上，用針頭固定四肢，雙手持鑷撕開皮膚拉向兩側，暴露出腹膜，但勿傷及腹膜壁。4．再用70％酒精擦洗腹膜壁后，用注射器吸10mlEagle液注入腹腔中，同時從兩側用手指揉壓