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藥物安全藥理試驗設計要求2018/02/02

1.生物材料生物材料有以下幾種：整體動物，離體器官及組織，體外培養的細胞、細胞片段、細胞器、受體、離子通道和酶等。整體動物常用小鼠、大鼠、豚鼠、家兔、犬、非人靈長類等。動物選擇應與試驗方法相匹配，同時還應注意品系、性別及年齡等因素。生物材料選擇應注意敏感性、重現性和可行性，以及與人的相關性等因素。體內研究建議盡量采用清醒動物。如果使用麻醉動物，應注意麻醉藥物的選擇和麻醉深度的控制。實驗動物應符合對相應等級動物的質量規定要求，并具有實驗動物質量合格證明。2.樣本量試驗組的組數及每組動物數的設定，應

冰凍切片機使用步驟和注意事項2018/02/02

(1)按電源開關I/O側的I(開)側，接通儀器電源。待儀器進行短暫時間的初始化(屏幕上將顯示一個沙漏標志)后，請檢查上方顯示屏是否亮起，是否顯示語言選擇菜單。(2)請檢查速凍臺、冷凍箱及其切片厚度是否為實驗所需要的相74關數據，通常速凍臺為-35℃，冰凍箱為-20℃，切片厚度為6μm。如若不是，在屏幕上點擊要修改的事項，用或調節到需要的數據。調節好后，等待機器降到所調節的溫度。(3)將手輪手柄旋轉到12點鐘的位置，然后進行制動。將樣品利用冰凍膠固定在樣本托上，并放于速凍臺上降溫。10min后，將

小鼠生化位點檢測2018/02/02

小鼠生化位點檢測乙酸纖維薄膜電泳是生物化學的方法，該技術運用于實驗動物遺傳質量控制只有二十余年的歷史。由于該方法能檢查近20對等位基因，涉及十幾條染色體，利于反映被檢品系的遺傳概貌，所以，目前認為此法靈敏度高，準確性強，檢出速度快，用樣量小，是遺傳檢測諸方法中較為理想的一種。一、實驗器材1．樣品(1)血清：用于Es-1和Trf兩位點檢查。(2)溶血清：用于檢查Hbb、Car-2和Ldr-1位點。(3)腎勻漿：用于檢查Es-2、Es-3、Idh-1、Mod-1、Akp-1、Pgm-1、Pep-1、

免疫學檢測方法與免疫技術2018/02/02

免疫學檢測方法與免疫技術免疫學檢驗方法和免疫化學技術主要包括：抗原抗體的制備、純化和鑒定，免疫擴散、免疫電泳、免疫凝集試驗、補體結合試驗，免疫細胞分離、純化和鑒定，免疫功能檢測，細胞因子檢測，放射免疫檢測，免疫酶標檢測，熒光和發光免疫技術，免疫組化實驗方法，原位雜交免疫組化，免疫PCR技術，免疫微球的應用，免疫電鏡技術，細胞凋亡的檢測方法，膜受體分析，胞內鈣鎂濃度的測定和細胞間通訊，流氏細胞儀技術及應用等。從上述內容可以看出，免疫技術是免疫學和物理、化學及電子信息和分子生物學理論和技術的結合產物

構建基于熒光多重cPCR的小鼠基因拷貝數檢測方法2018/02/02

構建基于熒光多重cPCR的小鼠基因拷貝數檢測方法目的：建立基于競爭性聚合酶鏈式反應(competitivepolymerasechainreaction,cPCR)小鼠基因拷貝數變異(copynumbervariations,CNVs)的檢測方法,用于檢測野生小家鼠來源一號染色體替換系群體(populationofspecificchromosome1substitutionstrains,PCSSs)的CNVs。方法：選取小鼠一號染色體上11個CNVs位點,及7、9和X染色體上各1個內對照位點

ELISA：用于檢測未知抗原的雙抗體夾心法2018/02/02

ELISA：用于檢測未知抗原的雙抗體夾心法1.包被：用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質含量為1～10μg／ml。在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml，4℃過夜。次日，棄去孔內溶液，用洗滌緩沖液洗3次，每次3分鐘。(簡稱洗滌，下同)。2.加樣：加稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中，置37℃孵育1小時。然后洗滌。(同時做空白孔，陰性對照孔及陽性對照孔)。3.加酶標抗體：于各反應孔中，加入新鮮稀釋的酶標抗體(經滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃孵育0.5～1小時，洗

ELASA：用于檢測未知抗體的間接法2018/02/02

ELASA：用于檢測未知抗體的間接法1.用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1～10μg／ml，每孔加0.1ml，4℃過夜。2.次日洗滌3次。3.加稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時,洗滌。(同時做空白、陰性及陽性孔對照)于反應孔中，加入新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.1ml，37℃孵育30-60分鐘，洗滌,后一遍用DDW洗滌。4.加底物液顯色：于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃10～30分鐘。5.終止反應：于各反應孔中加入2M硫酸

藥物安全藥理主要研究內容2018/01/25

1.核心組合試驗安全藥理學的核心組合試驗的目的是研究受試物對重要生命功能的影響。中樞神經系統、心血管系統、呼吸系統通常作為重要器官系統考慮，也就是核心組合試驗要研究的內容。根據科學合理的原則，在某些情況下，可增加或減少部分試驗內容，但應說明理由。1.1中樞神經系統定性和定量評價給藥后動物的運動功能、行為改變、協調功能、感覺/運動反射和體溫的變化等，以確定藥物對中樞神經系統的影響。可進行動物的功能組合試驗。1.2心血管系統測定給藥前后血壓（包括收縮壓、舒張壓和平均壓等）、心電圖（包括QT間期、PR

離心機的使用和管理2018/01/25

離心機是實驗室常用的基礎設備之一，主要用于各種生物樣品的分離。按轉速可分為低速、高速和超速離心機；按溫度可分為冷凍和常溫離心機。離心機轉動速度快，要注意安全，特別要防止在離心機運轉期間，因不平衡或試管墊老化，而使離心機邊工作邊移動，以致從實驗臺上掉下來，或因蓋子未蓋，離心管因振動而破裂后，玻璃碎片旋轉飛出，造成事故。因此使用離心機時，注意以下操作：(1)離心機的安裝：根據離心機的性能選擇合適的地點放置，對一般低速離心機和小型高速離心機(臺式)可放在平穩、堅固的臺面上(它的底座應裝有橡皮吸角)，水

用GEO腦補出來的外泌體2018/01/17

閑得沒事時候，我就比較喜歡隨便吹吹牛。嗯，比如編一個外泌體的看看。嗯，是這樣的：外泌體加LncRNA應該能算是有點意思了吧，反正我手上屁都沒有，所以我就用GEO挖挖看，看能挖出什么來：嗯，搜搜看LncRNA和外泌體的芯片，果然還是可以有點內容的：這是個前列腺癌的外泌體芯片，就是它了。隨便分下組：可以挑一些外泌體中表達量高那種LncRNA：但是光靠這些，就能腦補出一篇點的么？應該能吧，因為我們現在只有既然是外泌體里高表達的LncRNA，那會有靶細胞，這些LncRNA進入靶細胞后起到作用，而常見的L

免疫組化分析簡單介紹2017/12/07

你想要免疫組化的片子能更快更準確地識別么？你想要瞬間就把組畫里的陽性評級都算好么？下面簡單介紹下免疫組化簡單分析。是有這么個小插件能用一下的，這個插件是在ImageJ里的一個小插件。這個插件叫IHCProfiler，下載完有這么倆文件，全部復制粘貼到ImageJ的Plugin文件夾里:先通過ImageJ打開免疫組化的圖片：然后，從上面的Plugins的菜單里找到IHCProfiler：接著選擇細胞質中的表達：然后選擇DAB染色：于是，顏色就直接分開了：當然，這不能做為直接的評分，接著就要用IHC

細胞增殖到底用MTT還是CCK8呢？2017/11/30

MTT增殖曲線，基本上就是基礎的功能實驗了，養過細胞的你應該都會做。但是，要怎么樣才能省時省力呢？你也知道，如果用MTT的話，加入10ul的MTT后要等四個小時，在活細胞的線粒體中形成甲囋，然后在把培養基吸掉，再加上DMSO溶解，進行檢測。這個方法是常用的MTT方法，但是會有三個問題，*個是有的甲囋不容易溶解。還有一個問題就是，由于要讓DMSO充分溶解甲囋，所以會要混勻，就會產生泡沫，影響酶標儀讀值：第三個問題，就是在吸去培養基的時候，容易把甲囋也吸走，導致終讀值不準。當然也不是沒有辦法的，這篇

你真以為做ceRNA就這么簡單么？2017/11/23

大家一直都覺得ceRNA的研究，就是研究LncRNA的簡便機制了是吧。因為都不用來論證啥，就直接證明LncRNA和對應的mRNA能同時結合miRNA就行了，不是么？其實，也不全是，當然，要是把ceRNA作為低分的LncRNA研究機制的話，那簡單的就是做一個Luciferase實驗：也就是利用Luciferase的3'UTR結合miRNA，來驗證一下lncRNA和mRNA是不是分別能和miRNA結合。這個都是研究miRNA的基本套路。但LncRNA并不會表達蛋白，所以用Luciferase的方法，

發CNS文章，都用了哪些試劑盒？2017/11/23

你要知道哪個抗體好用么？哪個qPCR試劑盒用了以后發了高分蚊帳？我是不知道，但我知道要怎么樣才能知道。是不是很拗口？挖掘文獻，除了挖數據還能挖出點啥？能挖出試劑盒和試劑好不好用，嗯，沒錯，有很多文獻的MaterialsａndMethods里面會標明試劑盒的生產供應商。就是有這么一個文獻挖掘工具，可以幫你挖出文獻中的試劑盒：我們隨便輸入一個GFP的抗體查查看哈，就出現了這樣的結果：當然這樣的結果，你并不會看得很懂。我們拆解一下哈,左側那一欄，是挖掘出來的，與這個抗體相關的供應商以及相關實驗：接著，

如何快速找出miRNA相關的信號通路？2017/11/16

那天突然有人問我，miRNA是不是能做出那種network的網絡圖，就跟那種文章里一樣？其實我自己也忘了到底應該怎么整了，簡單點的話，就自己去搜搜看miRNA怎么樣對應基因做成列表就行了吧。但是負責任的我，還是搜到了一些miRNA分析的工具。對，就是上面這個工具，可以分析單個基因或者多個基因對單個miRNA和多個miRNA，實際上跟形成network圖沒什么關系。只是覺得這個做出來的東西，還蠻有意思的。我們可以搜多個miRNA與多個基因間的關系：然后，它就會生成這么一個特別草率的二型網絡圖……點

突破！科學家有望利用干細胞來開發出*糖尿病的新型療法2017/11/16

日前，一項在雜志NatureCellBiology上的研究報告中，來自哥本哈根大學的研究人員通過進行一項新型的干細胞研究，闡明了如何有效增加糖尿病患者機體中胰島素的產生，這項研究發現或能幫助研究者更加有效地以低成本通過人類干細胞來制造產生胰島素的β細胞，同時也能開發出治療糖尿病的有效療法，對于開發治療其它疾病的新型療法也具有重要的意義。目前有4.15億糖尿病患者，而且這一數字仍在繼續上升中，糖尿病患者的共同點就是機體中缺乏制造足夠胰島素的能力，進而誘發患者出現一系列并發癥和致死性疾病等；胰島素能

肥胖癥疾病研究中動物模型2017/11/10

肥胖癥是一組常見的代謝癥群。當人體進食熱量多于消耗熱量時，多余熱量以脂肪形式儲存于體內，其量超過正常生理需要量，且達值時遂演變為肥胖癥。正常男性成人脂肪組織重量占體重的15%～18%，女性占20%～25%。隨年齡增長，體脂所占比例相應增加。關于肥胖的評估方法，包括人體測量學、雙能X線吸收法、超聲、CT、紅外線感應法等多種。如無明顯病因者稱單純性肥胖癥，有明確病因者稱為繼發性肥胖癥。外因以飲食過多而活動過少為主。熱量攝入多于熱量消耗，使脂肪合成增加是肥胖的物質基礎。內因為脂肪代謝紊亂而致肥胖。1.

低血糖疾病動物模型2017/11/10

低血糖是指成年人空腹血糖濃度低于2.8mmol/L。糖尿病患者血糖值≤3.9mmol/L即可診斷低血糖。低血糖癥是一組多種病因引起的以靜脈血漿葡萄糖（簡稱血糖）濃度過低，臨床上以交感神經興奮和腦細胞缺氧為主要特點的綜合征。低血糖的癥狀通常表現為出汗、饑餓、心慌、顫抖、面色蒼白等，嚴重者還可出現精神不集中、躁動、易怒甚至昏迷等。臨床上反復發生空腹低血糖癥提示有器質性疾病；餐后引起的反應性低血糖癥，多見于功能性疾病。1.空腹低血糖癥（1）內源性胰島素分泌過多：常見的有胰島素瘤、自身免疫性低血糖等。（

SCTM：發現一種新的干細胞來源---骨膜組織2017/11/03

在一項新的研究中，研究人員發現在常規的髖關節置換術(hipreplacementsurgery)期間通常丟棄的骨膜組織富含成體干細胞，有望提供一種用于再生醫學的干細胞新來源。相關研究結果近期在StemCellsTranslationalMedicine期刊上，標題為“Arthriticperiostealtissuefromjointreplacementsurgery:anovel,autologoussourceofstemcells”。鑒于每年有上萬人接受髖關節置換術治療，這種組織可能在臨

慢阻肺疾病研究實驗動物模型解讀2017/10/25

慢阻肺即慢性阻塞性肺疾病，以不可逆的氣流受限為特點。慢阻肺氣流受限常呈進行性加重，并伴有對有害顆粒或氣體，主要是吸煙所致的肺部異常炎癥反應。雖然慢阻肺直接累及肺，但也可引起顯著的全身效應。慢阻肺與慢性支氣管炎和肺氣腫密切相關。當患者有咳嗽、咳痰或呼吸困難癥狀和（或）疾病危險因素接觸史時，應考慮慢阻肺。慢性咳嗽、咳痰常先于氣流受限許多年存在，但不是具有咳嗽、咳痰癥狀的患者都會發展為慢阻肺。要明確診斷慢阻肺，則需要進行肺功能檢查。慢阻肺病死率高；伴有氣促、咳痰、喘息并反復加重；不僅損傷氣道、肺泡和肺