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2015
06-10

CXCL14一種與免疫細(xì)胞趨化、腫瘤遷移密切相關(guān)的趨化因子
CXCL14是一種與免疫細(xì)胞趨化、腫瘤遷移密切相關(guān)的趨化因子。近日，中科院動(dòng)物研究所段恩奎研究員帶領(lǐng)的研究小組通過(guò)基因芯片篩選以及多種實(shí)驗(yàn)手段證明，在小鼠和人類妊娠中，CXCL14在早期母胎界面呈現(xiàn)高表達(dá)，并特異地定位于滋養(yǎng)層細(xì)胞。進(jìn)一步的功能研究發(fā)現(xiàn)CXCL14能夠有效地抑制滋養(yǎng)層細(xì)胞的侵潤(rùn)，這一作用是通過(guò)調(diào)節(jié)滋養(yǎng)層MMP-9和MMP-2的分泌量和活性來(lái)實(shí)現(xiàn)的。另外，因?yàn)镃XCL14的特異性受體目前尚未發(fā)現(xiàn)，文章作者通過(guò)用生物素標(biāo)記的CXCL14在母胎界面進(jìn)行特異結(jié)合實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)CXCL14特異
2015
06-09

β細(xì)胞對(duì)糖尿病療法新希望
胰腺中的胰島α細(xì)胞負(fù)責(zé)胰高血糖素，胰島β細(xì)胞負(fù)責(zé)胰島素。但日本奈良科學(xué)技術(shù)大學(xué)院大學(xué)和瑞士日內(nèi)瓦大學(xué)研究人員通過(guò)小鼠實(shí)驗(yàn)表明，這種分工并不是不可改變的。此前，研究人員從未發(fā)現(xiàn)胰島α細(xì)胞能夠成為胰島β細(xì)胞的來(lái)源。他們指出，如果人體內(nèi)胰島α細(xì)胞能夠代替數(shù)目減少或者功能減弱的胰島β細(xì)胞，將會(huì)為糖尿病治療帶來(lái)希望。這一研究成果刊登在一期英國(guó)《自然》雜志網(wǎng)絡(luò)版上。研究人員給小鼠使用了一種名為白喉的毒素，將小鼠體內(nèi)的胰島β細(xì)胞全部破壞，結(jié)果小鼠出現(xiàn)糖尿病癥狀。為了維持小鼠的生命，研究人員給它們注射胰島素。兩
2015
06-05

干細(xì)胞培養(yǎng)出與聽(tīng)覺(jué)有關(guān)細(xì)胞
德國(guó)法蘭克福大學(xué)醫(yī)院１日發(fā)表公報(bào)說(shuō)，該校與美國(guó)斯坦福大學(xué)研究人員歷時(shí)１０年，以老鼠為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，利用干細(xì)胞培養(yǎng)出與人類耳蝸內(nèi)毛細(xì)胞相似的細(xì)胞，從而向利用再生醫(yī)療方式治療失聰邁出了重要一步。德美研究人員以老鼠為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，利用干細(xì)胞培育出與人類耳蝸內(nèi)毛細(xì)胞非常相似的細(xì)胞，而且顯微鏡觀察發(fā)現(xiàn)，這種細(xì)胞也能傳導(dǎo)聲音振動(dòng)。研究人員下一步將利用人類細(xì)胞進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。他們表示，如果這一方法獲得成功，將有望以更自然的方式恢復(fù)失聰患者的聽(tīng)覺(jué)，從而代替使用助聽(tīng)器和移植耳蝸等傳統(tǒng)治療方法，這對(duì)失聰患者將是一大福音。鴨白介素
2015
06-04

大腸桿菌轉(zhuǎn)化時(shí)免熱激及孵育的方法
中山大學(xué)的徐曉鵬博士向大家介紹了一種質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸桿菌時(shí)免熱激及孵育的方法。背景：目前外源質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸桿菌的步驟，需要先將質(zhì)粒和感受態(tài)細(xì)胞在冰上撫育半小時(shí)，然后42度熱激90秒，加液體培養(yǎng)基緩搖1個(gè)小時(shí)左右再離心涂板。其中熱激步驟溫度和時(shí)間要求嚴(yán)格，熱激后大量菌細(xì)胞死亡，還要經(jīng)過(guò)液體培養(yǎng)基撫育才能涂板。這個(gè)方法我們一直在用，質(zhì)粒可以成功轉(zhuǎn)進(jìn)菌體中，只要感受態(tài)細(xì)胞沒(méi)有問(wèn)題，其轉(zhuǎn)化率和使用熱激法差不多，而且若是新鮮制備的感受態(tài)細(xì)胞，轉(zhuǎn)化率甚至更高。可以省下42度水浴裝置的儀器，還節(jié)省了至少1個(gè)小時(shí)的時(shí)
2015
06-03

透析袋的使用方法
ELISA透析的動(dòng)力是擴(kuò)散壓，擴(kuò)散壓是由橫跨膜兩邊的濃度梯度形成的。透析的速度反比于膜的厚度，正比于欲透析的小分子溶質(zhì)在膜內(nèi)外兩邊的濃度梯度，還正比于膜的面積和溫度，通常是4℃透析，升高溫度可加快透析速度。透析膜可用動(dòng)物膜和玻璃紙等，但用的zui多的還是用纖維素制成的透析膜，目前常用的是美國(guó)UnionCarbide（聯(lián)合碳化物公司）和美國(guó)光譜醫(yī)學(xué)公司的各種尺寸的透析管，截留分子量MwCO（即留在透析袋內(nèi)的生物大分子的zui小分子量，縮寫為MwCO）通常為1萬(wàn)左右。商品透析袋制成管狀，其扁平寬度為
2015
06-02

培養(yǎng)基的鑒別和配方
EMB培養(yǎng)基：常用于鑒別E.coli蛋白胨10g乳糖5g蔗糖5g磷酸氫二鉀2g伊紅Y0.4g美藍(lán)0.065g蒸餾水1000gpH7.22216E培養(yǎng)基配方分離海洋微生物的培養(yǎng)基配方蛋白胨5g酵母膏1g磷酸高鐵0.01g瓊脂15~20g陳海水1000ml煮沸氫氧化鈉的溶液調(diào)PH值7.6~7.8HumanAndrogenBindingProtein,ABPELISAKit人雄激素結(jié)合蛋白(ABP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48THumananapasticlymphomakinase,ALKEL
2015
06-01

沙雷菌肺炎的體征
沙雷菌肺炎的體征：1.癥狀與一般急性細(xì)菌性肺炎相似，ELISA主要表現(xiàn)為發(fā)熱、寒戰(zhàn)、咳嗽、咯血痰或假性血痰或黃痰、呼吸困難、胸痛。但對(duì)于醫(yī)院獲得性感染及原有肺部感染疾病的繼發(fā)性沙雷菌肺炎者，則癥狀不典型，可因原發(fā)病癥狀掩蓋了肺炎癥狀，同時(shí)發(fā)熱、咳嗽、咳黃痰可是原發(fā)病癥狀。但這時(shí)病人往往有病情加劇，可出現(xiàn)呼吸衰竭，心衰或突發(fā)性的高熱、咳黃膿痰增多。2.體征雙肺可聞及干濕性啰音，當(dāng)肺葉或肺段出現(xiàn)實(shí)變時(shí)，可有相應(yīng)肺段、肺葉的語(yǔ)顫增強(qiáng)，叩濁、可聞及支氣管呼吸音。危重病人可能有呼吸急促、發(fā)紺及休克等。EL
2015
05-29

酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA ）
檢測(cè)方法elisa試劑盒酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）利用免疫學(xué)抗原抗體特異性結(jié)合和酶的催化作用，通過(guò)化學(xué)方法將植物辣根過(guò)氧化物酶（HRP）與克倫特羅（CL）結(jié)合，形成酶偶聯(lián)克倫特羅。將固相載體上已包被的抗體（羊抗兔IgG抗體）與特異性的抗克倫特羅抗體結(jié)合，然后加入待測(cè)克倫特羅和酶偶聯(lián)克倫特羅，它們競(jìng)爭(zhēng)性與克倫特羅抗體結(jié)合，洗滌后加底物，根據(jù)有色物的變化計(jì)量待測(cè)克倫特羅量。若待測(cè)克倫特羅多，則被結(jié)合的酶偶聯(lián)克倫特羅少，有色物量就少。用目測(cè)法或比色法測(cè)定樣品中的克倫特羅含量，比色的*波長(zhǎng)為450nm
2015
05-28

Elisa試劑盒中比色法的內(nèi)容
其次，單波長(zhǎng)或雙波長(zhǎng)比色選擇的問(wèn)題。ELISA試劑盒所謂的單波長(zhǎng)比色即是通常的以對(duì)顯色具有zui大吸收的波長(zhǎng)如450nm或492nm進(jìn)行比色測(cè)定；而雙波長(zhǎng)雙色則酶標(biāo)儀在敏感波長(zhǎng)如450nm和非敏感波長(zhǎng)630nm下各測(cè)定一次，敏感波上下的吸光度測(cè)定值為樣本測(cè)定酶反應(yīng)特異顯色的吸光度與板孔上指紋、刮痕、灰塵等臟物所致的吸光度之和；非敏感波長(zhǎng)下測(cè)定即改變波長(zhǎng)至一定值，使得樣本測(cè)定酶反應(yīng)特異顯色的吸光度值為零，此時(shí)測(cè)得的吸光度即為臟物的吸光度值。zui后酶標(biāo)儀給出的數(shù)值為敏感波長(zhǎng)下的吸光度值與非常感波長(zhǎng)
2015
05-27

ELISA干細(xì)胞和再生醫(yī)學(xué)
來(lái)自Salk研究所的科學(xué)家們發(fā)現(xiàn)了一類新型的多能干細(xì)胞（能夠發(fā)育成為所有的組織類型），它們的特性與在發(fā)育胚胎中的位置密切相關(guān)。與科學(xué)研究中傳統(tǒng)采用的干細(xì)胞相比，這些細(xì)胞呈現(xiàn)出時(shí)間相關(guān)的發(fā)育階段。他們的研究論文發(fā)表在5月6日的《自然》（Nature）雜志上。論文的資深作者是Salk生物研究所資深教授JuanCarlosIzpisuaBelmonte。Belmonte教授主要從事干細(xì)胞和再生醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的研究，利用多種模式生物和人多能干細(xì)胞等工具探索心臟和血管等系統(tǒng)的發(fā)育與再生，以及通過(guò)體細(xì)胞重編程、去
2015
05-25

試劑空白和樣品空白的區(qū)別
測(cè)試試劑的空白值對(duì)于一項(xiàng)測(cè)試非常重要，當(dāng)進(jìn)行低濃度測(cè)定時(shí)應(yīng)該從測(cè)試結(jié)果中扣除測(cè)試試劑的空白值。例如，如果從0.06mg/L的低濃度測(cè)試結(jié)果中減掉0.02mg/L的試劑空白值，就會(huì)使zui終測(cè)定結(jié)果改變至少30%。而從1.23mg/L的高濃度測(cè)試結(jié)果中減掉0.02mg/L的試劑空白值，zui終測(cè)定結(jié)果只發(fā)生了2%的變化。測(cè)定試劑的空白值時(shí)，需要使用高質(zhì)量的去離子水代替待測(cè)樣品，加入測(cè)試試劑，按照操作步驟，進(jìn)行常規(guī)測(cè)試。然后，從樣品的測(cè)定結(jié)果中減去測(cè)試試劑的空白值。不同批次的測(cè)試試劑其空白值會(huì)有所變
2015
05-22

免疫組化“雜音”染色種類繁多
“雜音”染色種類繁多，產(chǎn)生的原因也多種多樣，為了便于說(shuō)明，筆者將其歸納為下面幾種。1、灶片狀著色切片中著色區(qū)東一塊西一塊，呈灶片狀分布，出現(xiàn)這種問(wèn)題的原因有：（1）裱片時(shí)水未排盡，在局部形成氣泡使組織突起，染色時(shí)試劑滲入后不易洗盡，顯色過(guò)深所致。解決辦法是，漂片盒里的氣泡應(yīng)去盡，晾片熱臺(tái)不能平放，應(yīng)有45度左右的斜度，利于水流走和蒸發(fā)。（2）壞死組織灶，組織壞死后細(xì)胞破壞、酶的釋放、蛋白游離、分解，復(fù)雜的肽鏈殘段（如Fc段）可能與一抗或/和二抗結(jié)合導(dǎo)致zui終著色。解決辦法是在選擇染色切片時(shí)應(yīng)避
2015
05-21

細(xì)胞簡(jiǎn)易不污染的配液方法
細(xì)胞具體配液方法：*步，配制1L培養(yǎng)液。培養(yǎng)基中含有酚紅指示劑，偏堿時(shí)液體為深紅或紫色，偏酸時(shí)則呈黃色。取配1L培養(yǎng)液的粉劑培養(yǎng)基，加入750ml三蒸水或去離子水，搖勻(一般培養(yǎng)液呈橘紅色)；再加入碳酸氫鈉1～1．1g，至*溶解(呈深紅色)；zui后再加三蒸水或去離子水至1L止。第二步，插吸管于配好的培養(yǎng)液內(nèi)，通入二氧化碳?xì)怏w。隨著二氧化碳?xì)獾娜谌?，液體逐漸變成黃色。用一次性0．22m孔徑的濾膜于正壓情況下將該液體過(guò)濾除菌。在此過(guò)程中，由于部分二氧化碳?xì)怏w溢出，液體漸成橘黃色。此時(shí)迅速將其分裝到
2015
05-20

ELISA試劑提升疫苗免疫效果改善免疫機(jī)能
動(dòng)物體是由復(fù)雜的組織器官構(gòu)成，每個(gè)系統(tǒng)相互依賴和彼此支援，各個(gè)器官若受到病原體或其他各種應(yīng)激因素侵?jǐn)_或損傷，這些器官的生理功能就難以正常發(fā)揮，而ELISA試劑免疫系統(tǒng)就是這些器官的保護(hù)神，猶如強(qiáng)大的*一樣，發(fā)揮著防衛(wèi)和修復(fù)功能的特殊作用。因此，呵護(hù)免疫器官，啟動(dòng)免疫系統(tǒng)，激活免疫功能，是動(dòng)物機(jī)體健康的根本。免疫是機(jī)體識(shí)別和排除抗原性異物，維持自身穩(wěn)定和平衡的一種生理功能。ELISA試劑免疫系統(tǒng)是一個(gè)分布于全身的能的網(wǎng)路體系，包括免疫器官（中樞免疫器官、周邊免疫器官）、免疫細(xì)胞（如T細(xì)胞、B細(xì)胞、
2015
05-19

ELISA檢測(cè)試劑盒基礎(chǔ)的類型
ELISA檢測(cè)試劑盒可用于測(cè)定抗原，也可用于測(cè)定抗體。在這種測(cè)定方法中有三個(gè)必要的試劑：（1）固相的抗菌素原或抗體，即"免疫吸附劑"（immunosorbent）；（2）酶標(biāo)記的抗原或抗體，稱為"結(jié)合物"（conjugate）；（3）酶反應(yīng)的底物。ELISA檢測(cè)試劑盒根據(jù)試劑的來(lái)源和標(biāo)本的情況以及檢測(cè)的具體條件，可設(shè)計(jì)出各種不同類型的檢測(cè)方法。假使在被測(cè)分子的不同位點(diǎn)上含有多個(gè)相同的決定簇，例如HBsAg的a決定簇，也可用針對(duì)此決定的同一單抗分別包被固相和制備酶結(jié)合物。但在HBsAg的檢測(cè)中應(yīng)注
2015
05-18

ELISA體外診斷試劑技術(shù)指導(dǎo)原則
ELISA試劑盒各組分的診斷試劑盒主要組分的包括包被反應(yīng)板、標(biāo)記物制備、各種溶液的配置、凍干、分包裝等步驟；并通過(guò)產(chǎn)品的半成品檢驗(yàn)和成品檢驗(yàn)兩個(gè)質(zhì)控過(guò)程來(lái)完成。(一)固相載體的制備（因不同產(chǎn)品使用的包被載體有很大區(qū)別，在此以標(biāo)準(zhǔn)96孔微孔反應(yīng)板為例進(jìn)行描述）1．包被板的準(zhǔn)備準(zhǔn)備經(jīng)檢驗(yàn)合格的包被板，記錄批號(hào)、數(shù)目、狀態(tài)標(biāo)識(shí)。質(zhì)控項(xiàng)目：尺寸，外觀，包裝。2．包被液的配制配制包被緩沖液，加入包被的抗體或抗原到工作濃度，混合均勻，即成所需的包被液，工作濃度的包被液應(yīng)在規(guī)定時(shí)間內(nèi)使用。質(zhì)控項(xiàng)目：包被緩沖液
2015
05-15

血清/血漿樣本用于microRNA研究的挑戰(zhàn)
ELISA試劑盒大量研究表明，血液循環(huán)中的microRNA表達(dá)變化指征著疾病的發(fā)生和發(fā)展階段。同時(shí)，血液樣品在臨床易于獲取，且穩(wěn)定不易降解，因此對(duì)于microRNA標(biāo)記物篩選具有廣闊研究前景。血清/血漿樣本用于microRNA研究的挑戰(zhàn)?血清血漿中不包含細(xì)胞，且microRNA含量低?microRNA高度同源，例如hsa-let-7家族各成員?紅細(xì)胞破裂發(fā)生溶血后，會(huì)釋放抑制RT和PCR反應(yīng)的物質(zhì)?常規(guī)內(nèi)參（如U6等）在血清血漿中含量不穩(wěn)定，不適合作為內(nèi)參對(duì)照基因111643-200301香葉醇
2015
05-14

抗原修復(fù)技術(shù)
盡管固定對(duì)于組織形態(tài)的保留是*的，但這一過(guò)程對(duì)IHC/ICC檢測(cè)也有不良影響。固定可能會(huì)改變蛋白的生化特性，如目的表位被掩蓋，或不再與一抗結(jié)合。表位的掩蓋可能是由氨基酸與表位的交聯(lián)、表位附近無(wú)關(guān)肽段的交聯(lián)、表位構(gòu)象的改變或抗原靜電荷的改變引起的?？乖迯?fù)指的是逆轉(zhuǎn)表位掩蓋和恢復(fù)表位-抗體結(jié)合的技術(shù)。抗原修復(fù)技術(shù)抗原修復(fù)的需要取決于多個(gè)變量，包括但不限于，目的抗原、所使用的抗體、組織類型，以及固定方法和持續(xù)時(shí)間。多克隆抗體能識(shí)別多個(gè)表位，因此即使不進(jìn)行抗原修復(fù)，它們也比單克隆抗體更有可能檢測(cè)到特定
2015
05-13

酶聯(lián)免疫使用試劑盒實(shí)驗(yàn)檢測(cè)過(guò)程中值得關(guān)注的問(wèn)題
1、儀器質(zhì)控為使儀器保持*工作狀態(tài)，應(yīng)建立維護(hù)和校正儀器的標(biāo)準(zhǔn)操作程序（SOP），所要控制的儀器包括移液器（加樣槍）、溫箱、洗板機(jī)和酶標(biāo)儀?！蛞埔浩鳎篍LISA試劑盒加樣量?。?0-200μl），其準(zhǔn)確性直接影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果，利用稱重法檢查：低、中、高三個(gè)刻度分別吸取指示量的水，萬(wàn)分之一天平稱重后計(jì)算吸量是否準(zhǔn)確，一般應(yīng)在±5%以內(nèi)；◎恒溫箱：經(jīng)常檢查恒溫箱溫度計(jì)所示的溫度和水中（或溫箱內(nèi)）實(shí)測(cè)溫度是否一致，允許有±1℃的誤差；◎洗板機(jī)：每個(gè)設(shè)置洗板后的殘留液有各自的規(guī)定，一般不超過(guò)2μl；人工扣板
2015
05-12

人巨細(xì)胞病毒基因組測(cè)序
人巨細(xì)胞病毒是一種很常見(jiàn)的皰疹病毒，感染約50-100％的成人，ELISA試劑盒但通常沒(méi)有不良影響，并且它可以保持潛伏多年。人巨細(xì)胞病毒感染是比較常見(jiàn)的，發(fā)展中國(guó)家感染人數(shù)比發(fā)達(dá)國(guó)家人數(shù)多。該病毒可導(dǎo)致出新生兒生缺陷和免疫系統(tǒng)受損，可能會(huì)導(dǎo)致致命疾病。該病毒也與癌癥發(fā)展有關(guān)聯(lián)。這項(xiàng)新的研究分析了病毒的蛋白質(zhì)組，并描述了所有表達(dá)的蛋白質(zhì)。研究人員認(rèn)為，以往研究潛在編碼蛋白質(zhì)的基因組很大程度上是計(jì)算機(jī)模型上的，這是不完整的。二十多年來(lái)，16個(gè)病毒株人巨細(xì)胞病毒基因組已被測(cè)序。這是一個(gè)特別大的病毒基因

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