中山大學(xué)的徐曉鵬博士向大家介紹了一種質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸桿菌時(shí)免熱激及孵育的方法。

   背景：目前外源質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸桿菌的步驟，需要先將質(zhì)粒和感受態(tài)細(xì)胞在冰上撫育半小時(shí)，然后42度熱激90秒，加液體培養(yǎng)基緩搖1個(gè)小時(shí)左右再離心涂板。其中熱激步驟溫度和時(shí)間要求嚴(yán)格，熱激后大量菌細(xì)胞死亡，還要經(jīng)過(guò)液體培養(yǎng)基撫育才能涂板。

   這個(gè)方法我們一直在用，質(zhì)粒可以成功轉(zhuǎn)進(jìn)菌體中，只要感受態(tài)細(xì)胞沒(méi)有問(wèn)題，其轉(zhuǎn)化率和使用熱激法差不多，而且若是新鮮制備的感受態(tài)細(xì)胞，轉(zhuǎn)化率甚至更高。可以省下42度水浴裝置的儀器，還節(jié)省了至少1個(gè)小時(shí)的時(shí)間。

 大鼠戊糖素(Pentosidine)ELISA 檢測(cè)試劑盒Rat Pentosidine ELISA Kit  96T/48T
 大鼠6酮前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)ELISA 檢測(cè)試劑盒Rat 6-keto-prostaglandin F1a,6-K-PGF1a ELISA Kit  96T/48T
 大鼠視黃醇結(jié)合蛋白4(RBP-4)ELISA 檢測(cè)試劑盒Rat Retinol binding protein 4,RBP-4 ELISA Kit  96T/48T
 大鼠骨形成蛋白(BMPs)ELISA 檢測(cè)試劑盒Rat bone morphogenetic proteins,BMPs ELISA Kit  96T/48T
 大鼠巨噬細(xì)胞替代激活相關(guān)化學(xué)因子1(AmAC-1)ELISA 檢測(cè)試劑盒 Rat Alternative macrophage activation-associated CC chemokine 1,AMAC-1 ELISA Kit  96T/48T
 大鼠組織蛋白酶K(cath-K)ELISA 檢測(cè)試劑盒Rat Cathepsin K,cath-K ELISA Kit  96T/48T
 細(xì)胞大鼠磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)ELISA 檢測(cè)試劑盒Rat phospho Protein Kinase C,P-PKC ELISA Kit  96T/48T
 大鼠膠原酶I(Collagenase I)ELISA 檢測(cè)試劑盒Rat Collagenase I ELISA Kit  96T/48T
 大鼠髓系細(xì)胞觸發(fā)受體-1(TREM-1)ELISA 檢測(cè)試劑盒Rat Triggering Receptor Expresses on Myeloid Cells-1,TREM-1 ELISA Kit  96T/48T