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上海一研生物科技有限公司

11
  • 2015

    12-25

    無(wú)血清培養(yǎng)基的優(yōu)點(diǎn)

    所有上述的有關(guān)血清培養(yǎng)基的問(wèn)題都可通過(guò)不使用血清和動(dòng)物源性產(chǎn)物而得到控制,另外,無(wú)血清培養(yǎng)基還有以下兩個(gè)主要的優(yōu)點(diǎn):(1)具有選擇性能選擇性地促進(jìn)特殊類型細(xì)胞的生長(zhǎng)是無(wú)血清培養(yǎng)基的主要優(yōu)點(diǎn)之一。例如,用MCDBl70和153培養(yǎng)基培養(yǎng)乳腺細(xì)胞和皮膚細(xì)胞可有效地抑制成纖維細(xì)胞的過(guò)度生長(zhǎng);黑素細(xì)胞能在沒(méi)有成纖維細(xì)胞和角質(zhì)細(xì)胞的條件下培養(yǎng);在造血細(xì)胞培養(yǎng)中,通過(guò)挑選某種適當(dāng)?shù)纳L(zhǎng)因子或一組生長(zhǎng)因子,可選擇性地使單一細(xì)胞譜系甚至某個(gè)分化階段的細(xì)胞生長(zhǎng)。現(xiàn)在許多這類選擇性培養(yǎng)基已有商業(yè)產(chǎn)品以適應(yīng)培養(yǎng)各種類
  • 2015

    12-23

    細(xì)胞活性檢查的原理與方法

    1)訓(xùn)練目的了解細(xì)胞活性檢查的原理;掌握染料的配制方法;掌握細(xì)胞活性檢查方法。2)實(shí)驗(yàn)原理細(xì)胞損傷或死亡時(shí),某些染料可穿透變性的細(xì)胞膜,與解體的DNA結(jié)合,使其著色。而活細(xì)胞能阻止這類染料進(jìn)入細(xì)胞內(nèi),因此可以鑒別死細(xì)胞與活細(xì)胞。常用的染料有臺(tái)盼藍(lán)、苯胺黑、結(jié)晶紫。3)實(shí)驗(yàn)材料①臺(tái)盼藍(lán)、苯胺黑、結(jié)晶紫溶液(溶于Hank's液或BSS液)。②冷凍復(fù)蘇后的細(xì)胞或其他培養(yǎng)細(xì)胞。③研缽、濾紙、漏斗、試劑瓶、標(biāo)簽紙、顯微鏡、膠頭滴管、鑷子、載玻片、蓋玻片、計(jì)數(shù)器。4)操作步驟(1)配制染色液①0.5%臺(tái)盼藍(lán)
  • 2015

    12-21

    細(xì)胞內(nèi)還原型谷胱甘肽((GSH)的測(cè)定

    (一)原理細(xì)胞內(nèi)還原型谷胱甘肽((GSH)可保護(hù)細(xì)胞免受損傷,藥物或毒物可通過(guò)使細(xì)胞內(nèi)GSH耗竭而導(dǎo)致細(xì)胞受損。(二)材料1.96孔培養(yǎng)板培養(yǎng)的待測(cè)細(xì)胞與對(duì)照組細(xì)胞。2.O.1mol/LPBS(pH8.0)0.1mol/LNa2HPO4溶液170ml和O.1mol/LNaH2PO4溶液34ml混勻。3.DTNB溶液用0.1mol/LPBS配成6.5%TCA溶液。(三)方法培養(yǎng)細(xì)胞的96孔培養(yǎng)板,傾去培養(yǎng)液,加入O.1mol/LPBS洗滌各孔,倒掉PRS,加入6.5%TCA0.05ml,4℃放置3
  • 2015

    12-18

    大鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子-1α (SDF-1α)分析試劑盒

    本試劑盒僅供研究使用。使用目的:本試劑盒用于測(cè)定大鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中基質(zhì)細(xì)胞衍生因子-1α(SDF-1α)含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中大鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子-1α(SDF-1α)水平。用純化的大鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子-1α(SDF-1α)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入基質(zhì)細(xì)胞衍生因子-1α(SDF-1α),再與HRP標(biāo)記的基質(zhì)細(xì)胞衍生因子-1α(SDF-1α)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶
  • 2015

    12-14

    小鼠小腸結(jié)腸炎耶爾森菌試劑盒

    耶爾森菌實(shí)驗(yàn)原理:本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫法(ELISA)測(cè)定標(biāo)本中小鼠小腸結(jié)腸炎耶爾森菌(Yersiniaenterocolitica)。用純化的小鼠小腸結(jié)腸炎耶爾森菌(Yersiniaenterocolitica)抗體包被微孔板,制成固相抗體,可與樣品中小腸結(jié)腸炎耶爾森菌(Yersiniaenterocolitica)相結(jié)合,經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的抗體和其他成分后再與HRP標(biāo)記的小腸結(jié)腸炎耶爾森菌(Yersiniaenterocolitica)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)
  • 2015

    12-11

    *0感受態(tài)細(xì)胞操作步驟

    產(chǎn)品簡(jiǎn)介本產(chǎn)品是大腸桿菌*0菌株經(jīng)特殊工藝處理得到的感受態(tài)細(xì)胞,可用于DNA的熱擊轉(zhuǎn)化。*0是一種常用于質(zhì)粒克隆的菌株,其φ80lacZΔM15基因產(chǎn)物可與載體編碼的β-半乳糖苷酶氨基端實(shí)現(xiàn)α互補(bǔ),可用于藍(lán)白斑篩選。使用pUC19質(zhì)粒檢測(cè),轉(zhuǎn)化效率可達(dá)108,適用于的質(zhì)粒DNA克隆并能保證高拷貝質(zhì)粒的穩(wěn)定復(fù)制。本產(chǎn)品僅供科研使用,請(qǐng)勿用于臨床診斷及其他用途注意事項(xiàng)1.感受態(tài)細(xì)胞一定要用干冰運(yùn)輸。感受態(tài)細(xì)胞應(yīng)在-80℃下保存,不可反復(fù)凍融和放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng),以免降低感受態(tài)細(xì)胞的轉(zhuǎn)化效率。2.轉(zhuǎn)化所有步
  • 2015

    12-09

    ELISA競(jìng)爭(zhēng)法操作步驟

    競(jìng)爭(zhēng)法可用于測(cè)定抗原,也可用于測(cè)定抗體。以測(cè)定抗原為例,受檢抗原和酶標(biāo)抗原競(jìng)爭(zhēng)與固相抗體結(jié)合,因此結(jié)合于固相的酶標(biāo)抗原量與受檢抗原的量成反比。操作步驟如下:1、將特異抗體與固相載體連接,形成固相抗體。2、待測(cè)管中加受檢標(biāo)本和一定量酶標(biāo)抗原的混合溶液,使之與固相抗體反應(yīng)。如受檢標(biāo)本中無(wú)抗原,則酶標(biāo)抗原能順利地與固相抗體結(jié)合。如受檢標(biāo)本中含有抗原,則與酶標(biāo)抗原以同樣的機(jī)會(huì)與固相抗體結(jié)合,競(jìng)爭(zhēng)性地占去了酶標(biāo)抗原與固相載體結(jié)合的機(jī)會(huì),使酶標(biāo)抗原與固相載體的結(jié)合量減少。參考管中只加酶標(biāo)抗原,保溫后,酶標(biāo)抗
  • 2015

    12-07

    ELISA試劑盒首要考慮的條件

    在ELISA試劑盒測(cè)定時(shí),受檢標(biāo)本與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。拋開(kāi)品牌、價(jià)格來(lái)說(shuō)。選擇ELISA試劑盒首要考慮這幾個(gè)條件:1、編號(hào):將樣品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào),每板應(yīng)設(shè)陰性對(duì)照2孔、陽(yáng)性對(duì)照2孔、空白對(duì)照1孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)2、加樣:分別在陰、陽(yáng)性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照50?l。然后在待測(cè)樣品孔先加樣品稀釋液40?l,然后再加待測(cè)樣
  • 2015

    12-04

    ChIP的一般操作流程(第二天)

    ChIP的一般流程:甲醛處理細(xì)胞---收集細(xì)胞,超聲破碎---加入目的蛋白的抗體,與靶蛋白-DNA復(fù)合物相互結(jié)合---加入ProteinA,結(jié)合抗體-靶蛋白-DNA復(fù)合物,并沉淀---對(duì)沉淀下來(lái)的復(fù)合物進(jìn)行清洗,除去一些非特異性結(jié)合---洗脫,得到富集的靶蛋白-DNA復(fù)合物---解交聯(lián),純化富集的DNA-片斷---PCR分析。在PCR分析這一塊,比較傳統(tǒng)的做法是半定量-PCR。但是現(xiàn)在隨著熒光定量PCR的普及,大家也越來(lái)越傾向于Q-PCR了。此外還有一些由ChIP衍生出來(lái)的方法。例如RIP(其實(shí)
  • 2015

    12-02

    制備SDS-PAGE 凝膠

    制備SDS-PAGE凝膠(1)將灌膠玻璃板洗凈,晾干固定,確定灌制分離膠液面標(biāo)志線(距樣品梳子底部約0.5-1.0cm處)。ELISA試劑盒(2)配制10%分離膠8ml,快速灌入凝膠玻璃槽中,使其液面至標(biāo)志線位置(避免產(chǎn)生氣泡)。(3)立即用去離子水覆蓋膠面(隔絕空氣,有助于凝膠聚合),室溫放置約40min至分離膠凝固。(4)配制5%濃縮膠4ml。(5)倒掉去離子水覆蓋液,并用吸水紙吸掉殘留的液體。將凝膠板重新垂直放置,輕輕加入5%濃縮膠液(注意避免產(chǎn)生氣泡),插入樣品梳,室溫凝膠約40分鐘。(
  • 2015

    11-30

    誘變育種的作用和特點(diǎn)

    誘變育種微生物誘變育種是用人工誘變方法誘發(fā)微生物基因突變,通過(guò)隨機(jī)篩選,從多種多樣的突變體中篩選出產(chǎn)量高、性能優(yōu)良的突變體,并找出突變體的培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件,使突變體在zui適環(huán)境條件下大量合成目的產(chǎn)物。因此,誘變、篩選和改變環(huán)境因素是誘育種的三個(gè)重要環(huán)節(jié),三者相輔相成,缺一不可。ELISA試劑盒1.誘變育種的作用和特點(diǎn)1.1誘變育種的作用誘變育種的作用主要有以下幾方面。(1)提高有效產(chǎn)物的產(chǎn)量通過(guò)誘變育種可以提高代謝產(chǎn)物的產(chǎn)量。目前在大多數(shù)發(fā)中所使用的菌種都是通過(guò)誘變育種獲得的突變株。對(duì)新分離的
  • 2015

    11-27

    慶大霉素功能主治及注意事項(xiàng)

    慶大霉素(Gentamicin)是一種氨基糖苷類抗生素,主要用于治療細(xì)菌感染,尤其是革蘭氏陰性菌引起的感染。慶大霉素能與細(xì)菌核糖體30s亞基結(jié)合,阻斷細(xì)菌蛋白質(zhì)合成。慶大霉素是為數(shù)不多的熱穩(wěn)定性的抗生素,因而廣泛應(yīng)用于培養(yǎng)基配置。ELISA試劑盒【主要成分】本品主要成份為硫酸慶大霉素,為一種多組分抗生素,含C1、C1a、C2a、C2等組分;輔料為:無(wú)水亞硫酸鈉,注射用水。【功能主治】1.用于治療敏感革蘭陰性桿菌如大腸埃希菌克雷伯菌屬腸桿菌屬變形桿菌屬沙雷菌屬銅綠假單胞菌以及葡萄球菌甲氧西林敏感株
  • 2015

    11-25

    ELISA常見(jiàn)10個(gè)問(wèn)題

    1.產(chǎn)品有哪幾種規(guī)格?可檢測(cè)多少個(gè)樣本?產(chǎn)品分為48T和96T兩種規(guī)格。ELISA試劑盒每次實(shí)驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)曲線一般設(shè)7個(gè)不同濃度,加上空白孔,標(biāo)準(zhǔn)曲線一共需要8個(gè)孔。因此,一個(gè)48T試劑盒zui多可以測(cè)定40個(gè)樣本(不做重復(fù)且一次用完),一個(gè)96T試劑盒zui多可以測(cè)定88個(gè)樣本(不做重復(fù)且一次用完)。可以根據(jù)實(shí)際樣本數(shù)量和實(shí)驗(yàn)計(jì)劃選擇合適的產(chǎn)品規(guī)格。2.48T和96T的試劑盒有哪些不同?48T和96T的試劑盒,每個(gè)孔的反應(yīng)體系都是*一樣的。不同的是試劑盒中各組分的規(guī)格,詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū)。3.產(chǎn)品的穩(wěn)定性
  • 2015

    11-23

    了解細(xì)胞的毒性作用

    檢查待測(cè)物對(duì)細(xì)胞的毒性試驗(yàn)有體內(nèi)和體外實(shí)驗(yàn)之分。體外試驗(yàn)是檢查待測(cè)物對(duì)培養(yǎng)細(xì)胞的影響,方法是將一定量待測(cè)物作用于體外培養(yǎng)細(xì)胞,再通過(guò)觀察或測(cè)定細(xì)胞增殖、存活率、形態(tài)改變、DNA合成及遺傳性狀等變化對(duì)細(xì)胞的毒性作用。(一)化學(xué)物質(zhì)的一般毒性檢測(cè)要了解化學(xué)物質(zhì)對(duì)培養(yǎng)細(xì)胞一般生物學(xué)性狀的毒性作用,首先將不同稀釋度的待測(cè)化學(xué)物質(zhì)加至一定數(shù)量的培養(yǎng)細(xì)胞中,培養(yǎng)一定時(shí)間后,觀察細(xì)胞形態(tài)、存活率、增殖情況及DNA合成情況。該方法簡(jiǎn)單易行。例如測(cè)定DNA抑制劑或RNA抑制劑的作用時(shí)。可采用該方法。(二)培養(yǎng)細(xì)胞
  • 2015

    11-20

    免疫吸附劑包被的方式

    免疫吸附劑已包被抗原或抗體的固相載體在低溫(2~8℃)干燥的條件下一般可保存6個(gè)月。有些不完整的試盒,僅供應(yīng)包被用抗原或抗體,檢測(cè)人員需自行包被。包被的方式將抗原或抗體固定在過(guò)程稱為包被(coating)。換言之,包被即是抗原或抗體結(jié)合到固相載體表面的過(guò)程。蛋白質(zhì)與聚苯乙烯固相載體是通過(guò)物理吸附結(jié)合的,靠的是蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)上的疏水基團(tuán)與固相載體表面的疏水基團(tuán)間的作用于。這種物理吸附是非特異性的,受蛋白質(zhì)的分子量、等電點(diǎn)、濃度等的影響。載體對(duì)不同蛋白質(zhì)的吸附能力是不相同的,大分子蛋白質(zhì)較小分子蛋白
  • 2015

    11-18

    骨髓細(xì)胞的培養(yǎng)

    骨髓作為主要的造血場(chǎng)所,可進(jìn)行體外培養(yǎng)。在無(wú)菌條件下,把骨髓細(xì)胞分離出來(lái),置于培養(yǎng)系統(tǒng)中,在合適的環(huán)境中,提供營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),使其繼續(xù)生存或生長(zhǎng)。通過(guò)培養(yǎng)骨髓,可見(jiàn)到造血干細(xì)胞不同分化階段時(shí)各種血細(xì)胞的前驅(qū)細(xì)胞。用通常的形態(tài)學(xué)方法不可能識(shí)別造血干細(xì)胞和各種血細(xì)胞的前驅(qū)細(xì)胞,但在加入各種造血因子的半固體培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)后,可出現(xiàn)單個(gè)前驅(qū)血細(xì)胞的增殖、分化,并形成細(xì)胞克隆。一、材料1.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物小鼠(C57BL/6\B6D2Fl等)2只。2.培養(yǎng)液瓊脂(Difco)、a—MEM、FBS(用新生牛血清、人血清也
  • 2015

    11-16

    細(xì)胞介導(dǎo)細(xì)胞毒作用檢測(cè)法

    (一)原理以NK細(xì)胞為例。將待測(cè)者外周血中的NK細(xì)胞與靶細(xì)胞(K562細(xì)胞)按一定比例混合培養(yǎng)一定時(shí)間,NK細(xì)胞作用于靶細(xì)胞,使靶細(xì)胞被殺死、破壞,進(jìn)而使靶細(xì)胞線粒體內(nèi)的乳酸脫氫酶釋放出來(lái).使底物發(fā)生顏色變化,其顏色深淺與酶的釋放量成正比,檢測(cè)顯色后的光密度OD值,便可推算出NK細(xì)胞的殺傷活性。(二)材料1.待檢者肝素抗凝血,靶細(xì)胞為K562細(xì)胞。2.RPMI1640培養(yǎng)液、淋巴細(xì)胞分離液。3.酶標(biāo)儀、離心機(jī)。(三)方法1.用含5%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)液將靶細(xì)胞調(diào)整到5×104~2×1
  • 2015

    11-13

    胰島素對(duì)細(xì)胞增殖影響的實(shí)驗(yàn)

    胰島素對(duì)離體犢牛小腸上皮細(xì)胞增殖及吸收功能影響的實(shí)驗(yàn)(一)試驗(yàn)原理新生哺乳動(dòng)物胃腸道的生長(zhǎng)發(fā)育非常迅速,這與初乳的攝入有關(guān),初乳中含大量多肽類生長(zhǎng)因子如胰島素等。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)體外犢牛小腸上皮細(xì)胞培養(yǎng)法,用細(xì)胞增殖率和葡萄糖吸收率作為細(xì)胞生長(zhǎng)發(fā)育及功能成熟的指標(biāo),探討胰島素或其他生長(zhǎng)因子對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)發(fā)育的影響,同時(shí)為新生胃腸道營(yíng)養(yǎng)發(fā)育生理研究提供研究方法。(二)材料1.待檢藥物胰島素(o.01μg/ml、0.1μg/ml、1μg/ml、10μg/ml及50μg/m1)。2.動(dòng)物出生1日齡以內(nèi)未吮乳的中
  • 2015

    11-11

    X-Gal和IPTG-X-gal 平板制作

    一、簡(jiǎn)介X-Gal在β-半乳糖苷酶的催化下水解后呈藍(lán)色,因此常用于轉(zhuǎn)基因篩選試驗(yàn)中,如藍(lán)白斑篩選或β-半乳糖苷酶的原位染色檢測(cè)實(shí)驗(yàn)。藍(lán)白斑試驗(yàn)中主要根據(jù)菌落呈現(xiàn)的顏色即可簡(jiǎn)單的挑選出哪些是轉(zhuǎn)化子。分子式為C14H15BrClNO6,分子量為408.63,CASNumber7240-90-6。X–Gal是β–半乳糖苷酶(β–galactosidase)的底物,水解后呈藍(lán)色。基于這個(gè)特點(diǎn),pUC系列載體DNA(或其他帶有l(wèi)acZ基因載體DNA)以lacZ缺失細(xì)胞為宿主進(jìn)行轉(zhuǎn)化時(shí)、或用M13噬菌體載體
  • 2015

    11-09

    細(xì)菌組成可能受到出生時(shí)刻的影響

    一項(xiàng)研究表明,已被證明能夠影響消化和免疫健康的個(gè)人*的細(xì)菌組成可能受到出生時(shí)刻的影響。ELISA試劑盒科學(xué)家對(duì)來(lái)自9位母親和10位出生后不足一天的新生兒進(jìn)行了細(xì)菌取樣。這組科學(xué)家發(fā)現(xiàn),陰道分娩的嬰兒獲得的細(xì)菌群落類似于他們的母親的陰道細(xì)菌組成,而通過(guò)剖宮產(chǎn)出生的嬰兒攜帶了常見(jiàn)的皮膚細(xì)菌,這些細(xì)菌并不比來(lái)自其他剖宮產(chǎn)嬰兒的細(xì)菌更加類似于他們的母親的細(xì)菌組成。通常與乳汁消化、細(xì)菌病或陰道感染有關(guān)的細(xì)菌占了來(lái)自陰道分娩的兒童的皮膚和嘴的樣本的大部分。剖宮產(chǎn)嬰兒的細(xì)菌群落大部分是由與食物中毒、白喉和痤瘡
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