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人ELISA試劑盒使用中遇到的常見問(wèn)題2018/04/04: 人ELISA試劑盒使用中遇到的常見問(wèn)題：1、如何儲(chǔ)存和解凍血清才不會(huì)使產(chǎn)品質(zhì)量受損?將血清從冷凍箱取出后，先置于2——8℃冰箱使之融解，然后在室溫下使之全融。但必須注意的是，融解過(guò)程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。長(zhǎng)時(shí)間儲(chǔ)存在2-8℃時(shí)，血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可見的混濁。因此，推薦在-20℃以下儲(chǔ)存血清，并避免反復(fù)凍融。我們建議血清應(yīng)保存在-2O℃。若存放于4℃時(shí)，請(qǐng)勿超過(guò)一個(gè)月。若一次無(wú)法用完一瓶，建議無(wú)菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi)，再放回冷

大鼠ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)稀釋血清的步驟2018/04/02: 大鼠ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)稀釋血清的步驟：先把蛋白稀釋一定的倍數(shù)，比如說(shuō)10倍、20倍稀釋（這樣可以大體確定一個(gè)參數(shù)），將抗原進(jìn)行一系列稀釋包被微量反應(yīng)板，再用一定稀釋度的陽(yáng)性參考血清和陰性參考血清進(jìn)行孵育后洗滌，再加酶結(jié)合物進(jìn)行反應(yīng)，經(jīng)孵育洗滌后，加底物溶液顯色，終止反應(yīng)后分別測(cè)定O.D值，選擇O.D值≥1.0的那個(gè)抗原稀釋度為*適包被濃度。一般總是要選擇那個(gè)O.D值稍大于1.0，而不選擇小于1.0的抗原濃度。陰性參考血清O.D值要求使用注意事項(xiàng)1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分

人ELISA試劑盒標(biāo)本的采集與保存2018/03/30: 人ELISA試劑盒標(biāo)本的采集與保存：1.血清：全血標(biāo)本請(qǐng)于室溫放置2小時(shí)或4℃過(guò)夜后于1000g離心20分鐘，取上清即可檢測(cè)，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融2.血漿：用EDTA或肝素作為抗凝劑，標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2-8°C1000g離心20分鐘，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。3.組織勻漿：用預(yù)冷的PBS(0.01mol/L,pH=7.2-7.4)沖洗組織，去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細(xì)胞會(huì)影響測(cè)量結(jié)果），稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織不對(duì)應(yīng)體積的

大鼠ELISA試劑盒操作步驟及方法2018/03/28: 大鼠ELISA試劑盒操作步驟及方法1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。2.加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.

小鼠ELISA試劑盒樣本的采納和保存辦法小結(jié)2018/03/26: 小鼠ELISA試劑盒樣本的采納和保存辦法小結(jié)：可用作ELISA測(cè)定的標(biāo)本非常廣泛，體液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、糞便)等均可作標(biāo)本以測(cè)定其間某種抗體或抗原成份。重復(fù)凍融會(huì)使抗體效價(jià)下跌，所以測(cè)抗體的血清標(biāo)本如需保存作多次檢測(cè)，宜少數(shù)分裝冰存。一般說(shuō)來(lái)，在5天內(nèi)測(cè)定的血清標(biāo)本可放置于4℃，超越一周測(cè)定的需低溫冰存。如在冰箱中保存過(guò)久，其間的可發(fā)作聚合，在間接法ELISA中可使本底加深。保存血清自采集時(shí)就應(yīng)留心無(wú)菌操作，也可參加恰當(dāng)防腐劑。除特別情況外，在醫(yī)學(xué)檢修中均以血清作為檢測(cè)

人ELISA試劑盒雙抗原夾心法測(cè)抗體2018/03/23: 人ELISA試劑盒雙抗原夾心法測(cè)抗體反響辦法與雙抗體夾心法相似。用特異性抗原進(jìn)行包被和制備酶聯(lián)絡(luò)物,以檢查相應(yīng)的抗體。與直接法測(cè)抗體的不一樣的地方為以酶標(biāo)抗原替代酶標(biāo)抗抗體。此法中受檢標(biāo)本不需稀釋,可直接用于測(cè)定,因而其敏感度相對(duì)高于直接法。乙肝標(biāo)志物中抗HBs的檢查常選用本法。本法關(guān)鍵在于酶標(biāo)抗原的制備,應(yīng)根據(jù)抗原構(gòu)造的不一樣,尋找合適的符號(hào)辦法。只需獲得對(duì)于受檢抗原的異性抗體,就可用于包被固相載體和制備酶聯(lián)絡(luò)物而樹立此法。如抗體的來(lái)歷為抗血清,包被和酶標(biāo)用的抗體別離取自不一樣種屬的動(dòng)物。如運(yùn)

小鼠ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)的技術(shù)分析2018/03/21: 小鼠ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)的技術(shù)分析認(rèn)為抗體是一個(gè)對(duì)某病原具有特異性的抗體，則ELISA試劑盒該抗原或該抗體的效果，能夠用來(lái)幫忙區(qū)分，供給血清的個(gè)別，是不是感染或早年感染過(guò)這個(gè)病原。ELISA測(cè)定方式包括以下幾種：雙抗體夾心法、間接法、雙抗原夾心法、IgM抗體捕捉法、比賽抑制法，其間比賽抑制法(HBeAb,HBcAb等選用)因受操作時(shí)差所導(dǎo)致的比賽等因素的影響，效果重復(fù)性較差，質(zhì)量較難操控。不一樣批次查看試劑盒在制作過(guò)程中很難保證質(zhì)量*一致，即使是通過(guò)批批檢的項(xiàng)目其查看效果也存在差異，因而有必要選

人ELISA試劑盒詳解樣品的各步操作方法2018/03/19: 人ELISA試劑盒詳解樣品的各步操作方法：A、細(xì)胞上清液：1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。B、血漿：EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)，1000×g離心30分鐘去除顆粒。C、血清：操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激，使用不含熱原的試管，收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。D、組織勻漿：將組織加入適量鹽水搗碎，1000×g離心10分鐘，取上清液。E、保存：如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70℃保存，避免反復(fù)冷凍，盡可能的不要使用溶血或高血脂血，如果血清中大

小鼠ELISA試劑盒經(jīng)驗(yàn)總結(jié)2018/03/16: 小鼠ELISA試劑盒經(jīng)驗(yàn)總結(jié):1、包被原的性質(zhì)很重要，蛋白濃度，是否降解，這關(guān)系到你做出的抗體可不可以被其識(shí)別，所以保存抗原很重要，我做重組蛋白時(shí)，師兄都嚴(yán)格警告我一定要在冰浴下緩慢融化就是這個(gè)道理。還有有的包被原可能不是蛋白，對(duì)于生物素和脂類物質(zhì)或小分子物質(zhì)我們要事先對(duì)其改造再加以包被，我把方法簡(jiǎn)要的列出如下:①親和素生物素:先親和素先包被載體，加入生物素化的DNA，這種包被方法均勻、牢固，已擴(kuò)大應(yīng)用于各種抗原物質(zhì)。②脂類物質(zhì):可將其在有機(jī)溶劑（例如乙醇）中溶解后加入ELISA試劑盒板孔中，開

小鼠ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)樣本的收集方法2018/03/14: 小鼠ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)樣本的收集方法1.血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。2.血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。3.尿液：用無(wú)菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此

大鼠ELISA試劑盒檢測(cè)結(jié)果的解釋2018/03/12: 大鼠ELISA試劑盒檢測(cè)結(jié)果的解釋由于有相當(dāng)多的因素會(huì)影響檢測(cè)的結(jié)果，如不同的酶標(biāo)板，檢測(cè)試劑的體積，都會(huì)造成OD值的不同，因此，只有使用同一酶標(biāo)板反應(yīng)的試劑檢測(cè)結(jié)果才能比較和分析。對(duì)結(jié)果的臨床解釋請(qǐng)依照試劑盒的說(shuō)明書進(jìn)行.酶標(biāo)儀結(jié)構(gòu)規(guī)格有40孔板，55孔板，96孔板等多種，不同的儀器選用不同規(guī)格的孔板，對(duì)其可進(jìn)行一孔一孔地檢測(cè)或一排一排地檢測(cè).酶標(biāo)儀所用的單色光既可通過(guò)相干濾光片來(lái)獲得，也可用分光光度計(jì)相同的單色器來(lái)得到.在使用濾光片作濾波裝置時(shí)與普通比色計(jì)一樣，濾光片即可放在微孔板的前面，也

人ELISA試劑盒測(cè)定步驟2018/03/09: 人ELISA試劑盒測(cè)定步驟使用前將所有IL-6ELISA試劑盒和樣本平衡至室溫。推薦所有的樣本、標(biāo)準(zhǔn)和對(duì)照測(cè)定雙份。1.準(zhǔn)備所有的試劑和工作標(biāo)準(zhǔn)品。2.取下多余的微量培養(yǎng)板條，放回裝有干燥劑的錫箔袋中，重新密封。3.每孔加入100ulAssayDiluentRD1W。4.每孔依次加入100ul標(biāo)準(zhǔn)品、樣本和對(duì)照。用橡皮條密封。室溫孵化2小時(shí)。記錄測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)和樣本的分布。5.吸棄孔內(nèi)液體，每孔400ul洗滌液，充分洗滌后*去除液體。在干凈的紙上拍干。反復(fù)洗滌4次。6.每孔加入200ulIL-6Con

大鼠ELISA試劑盒檢測(cè)步驟2018/03/09: 大鼠ELISA試劑盒檢測(cè)步驟ELISA用血清來(lái)檢測(cè)，首先血液要經(jīng)過(guò)至少半個(gè)小時(shí)的凝集，然后取血清。將酶復(fù)合物用稀釋液稀釋后，加血清及陰性、陽(yáng)性對(duì)照，還有就是質(zhì)控品（這是嚴(yán)格的要求，它的范圍必須在質(zhì)控范圍內(nèi)）。經(jīng)過(guò)一個(gè)小時(shí)的孵育，然后洗板，加底物，半個(gè)小時(shí)避光反應(yīng)后加終止液即完成反應(yīng)部分，然后就是讀數(shù)。由數(shù)值來(lái)判斷結(jié)果的陰性或陽(yáng)性。檢測(cè)方法雙抗體夾心法雙抗體夾心法是檢測(cè)抗原zui常用的方法，操作步驟如下：雙抗體夾心法一、將特異性抗體與固相載體連接，形成固相抗體：洗滌除去未結(jié)合的抗體及雜質(zhì)。二、加受

大鼠ELISA試劑盒處理和保存原則有以下幾點(diǎn)2018/03/07: 大鼠ELISA試劑盒處理和保存原則有以下幾點(diǎn)：1、要注意避免出現(xiàn)嚴(yán)重溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團(tuán)，其有類似過(guò)氧化物的活性，因此，在以HRP為標(biāo)記酶的ELISA測(cè)定中，如血清標(biāo)本中血紅蛋白濃度較高，則其就很容易在溫育過(guò)程中吸附于固相，從而與后面加入的HRP底物反應(yīng)顯色。2、樣本的采集及血清分離中要注意盡量避免細(xì)菌污染，一則細(xì)菌的生長(zhǎng)，其所分泌的一些酶可能會(huì)對(duì)抗原抗體等蛋白產(chǎn)生分解作用;二則一些細(xì)菌的內(nèi)源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶本身會(huì)對(duì)用相應(yīng)酶作標(biāo)記的測(cè)定方法產(chǎn)生非特異性干擾。3、冰凍保存的

人ELISA試劑盒操作注意事項(xiàng)簡(jiǎn)介2018/03/05: 人ELISA試劑盒操作注意事項(xiàng)簡(jiǎn)介收集標(biāo)本前都必須有一個(gè)完整的計(jì)劃，必須清楚要檢測(cè)的成份是否足夠穩(wěn)定。我們提倡新鮮標(biāo)本盡早檢測(cè)，對(duì)收集后當(dāng)天就進(jìn)行檢測(cè)的標(biāo)本，及時(shí)儲(chǔ)存在4℃?zhèn)溆茫缬刑厥庠蛐枰芷谑占瘶?biāo)本，請(qǐng)?jiān)炷Ｈ〔暮螅瑢?biāo)本及時(shí)分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。因冰室與室溫存在一定溫差，蛋白極易降解，直接影響實(shí)驗(yàn)質(zhì)量，所以避免反復(fù)凍融。1.血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。2.血漿：應(yīng)根據(jù)

小鼠ELISA試劑盒常用知識(shí)安全性2018/03/02: 小鼠ELISA試劑盒常用知識(shí)安全性：1.避免直接接觸終止液和底物A、B，一旦接觸到這些液體，請(qǐng)盡快用水沖洗。2.實(shí)難中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。3.不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。操作步驟：1.使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時(shí)加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。2.根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來(lái)定，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。3.加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔

大鼠ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)技術(shù)問(wèn)答匯總2018/02/28: 大鼠ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)技術(shù)問(wèn)答匯總1.血清保存:建議血清應(yīng)保存在-5℃至-2O℃。然而，若存放于4℃時(shí)，請(qǐng)勿超過(guò)一個(gè)月。若您一次無(wú)法用完一瓶，建議您無(wú)菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi)，再放回冷凍。2.解凍血清的方法:建議您將血清從冷凍箱取出后，先置于2～8℃冰箱使之融解，然后在室溫下使之全融。但必須注意的是，融解過(guò)程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。3.血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn)，該如何處理?血清中沉淀物的出現(xiàn)有許多種原因，但zui普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成，而血纖維蛋白（形成凝血的蛋白之一

小鼠ELISA試劑盒基本介紹2018/02/10: 小鼠ELISA試劑盒基本介紹質(zhì)粒載體構(gòu)建是分子生物學(xué)研究中zui常用到的手段之一。但由于影響因素較多，對(duì)研究者經(jīng)驗(yàn)要求較高，因而往往費(fèi)時(shí)費(fèi)力。我公司憑借長(zhǎng)期分子生物學(xué)工作的豐富經(jīng)驗(yàn)，集中人力，為您提供、快捷的服務(wù)！可根據(jù)已有載體進(jìn)行改造方案的設(shè)計(jì)，完成現(xiàn)有載體不同功能元件的改造，也可以應(yīng)客戶要求將片段亞克隆至各載體。zui常用的方法：理論上PCR是一個(gè)指數(shù)增長(zhǎng)的過(guò)程，但是實(shí)際的PCR擴(kuò)增曲線并不是標(biāo)準(zhǔn)的指數(shù)曲線，而是S形曲線。這是因?yàn)殡S著PCR循環(huán)的增多，擴(kuò)增規(guī)模迅速增大，Taq酶、dNTP、引

大鼠ELISA試劑盒相應(yīng)解決辦法2018/02/09: 大鼠ELISA試劑盒相應(yīng)解決辦法：1、標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒采血管混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。2、加樣后及時(shí)放入孵箱。3、加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。4、如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。5、標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中加樣

小鼠ELISA試劑盒說(shuō)明書檢驗(yàn)原理2018/02/07: 小鼠ELISA試劑盒檢驗(yàn)原理本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)技術(shù)。特異性抗小鼠TNF-α單克隆抗體預(yù)包被在高親和力的酶標(biāo)板上。酶標(biāo)板孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品、待測(cè)樣本和生物素化的檢測(cè)抗體，經(jīng)過(guò)孵育，樣本中存在的TNF-α與固相抗體和檢測(cè)抗體結(jié)合。洗滌去除未結(jié)合的物質(zhì)后，加入辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的鏈霉親和素(streptavidin-HRP)。洗滌后，加入顯色底物TMB，避光顯色。顏色反應(yīng)的深淺與樣本中TNF-α的濃度成正比。加入終止液終止反應(yīng)，在450nm波長(zhǎng)(參考波長(zhǎng)570-630nm)測(cè)定吸光度值

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