人ELISA試劑盒使用中遇到的常見問題:
1、 如何儲(chǔ)存和解凍血清才不會(huì)使產(chǎn)品質(zhì)量受損?
將血清從冷凍箱取出后,先置于2——8℃冰箱使之融解,然后在室溫下使之全融。但必須注意的是,融解過程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。
長(zhǎng)時(shí)間儲(chǔ)存在2-8℃時(shí),血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可見的混濁。因此,推薦在-20℃以下儲(chǔ)存血清,并避免反復(fù)凍融。
我們建議血清應(yīng)保存在-2O℃。若存放于4℃時(shí),請(qǐng)勿超過一個(gè)月。若一次無法用完一瓶,建議無菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi),再放回冷凍。
2、血清中包含絮狀沉淀,它們是什么,怎么處理?
沉淀包含纖維蛋白和脂蛋白。這是正常特性,不會(huì)影響產(chǎn)品性質(zhì)。要除去沉淀,離心血清(400g,1-2分鐘)或者簡(jiǎn)單的讓其沉淀在瓶子底部,將血清小心的轉(zhuǎn)移到另一個(gè)無菌瓶里(一般不建議采用過濾的方法除去沉淀,因?yàn)槌恋頃?huì)堵塞濾膜而無法過濾)。大多情況輕輕搖動(dòng)沉淀并加熱至37℃就會(huì)再溶解。所以,使用產(chǎn)品時(shí)要搖動(dòng)并加熱血清至37℃,沉淀會(huì)自然消失。
3、實(shí)驗(yàn)室如何選擇適合的血清?
國內(nèi)一致認(rèn)為HYCLONE的血清是的,但是根據(jù)我在北美的經(jīng)歷,國外一般認(rèn)為GIBCO比HYCLONE好,所以并不是價(jià)格決定質(zhì)量,但是總的來說這兩種價(jià)格普遍偏貴,一般不是太嬌氣的細(xì)胞,國產(chǎn)的就夠用了。
4、 如何避免血清中產(chǎn)生沉淀?
按如下操作可避免沉淀的產(chǎn)生:
(1)解凍血清時(shí),請(qǐng)隨時(shí)將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生。
(2) 血清分裝凍存時(shí),須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一。
(3) 勿直接由-20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。
(4) 勿將血清置于37℃太久,否則血清會(huì)變得渾濁,同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定的成份也會(huì)因此受到破壞,從而影響血清的品質(zhì)。
(5) 血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無須做此步驟。
(6) 若必須做血清的熱滅活,請(qǐng)遵守56℃,30分鐘的原則,并且隨時(shí)搖晃均勻。溫度過高,時(shí)間過久或搖晃不均勻,都會(huì)造成沉淀物的增多。
人ELISA試劑盒活化凝血因子X(FXa)ELISA試劑盒 ,英文名: FXa ELISA Kit
活化凝血因子Ⅻ(FⅫa)ELISA試劑盒 ,英文名: FⅫa ELISA Kit
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環(huán)孢素A(CsA)ELISA試劑盒 ,英文名: CsA ELISA Kit
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花生四烯酸5脂加氧酶(ALOX-5)ELISA試劑盒 ,英文名: ALOX-5 ELISA Kit
花生四烯酸15脂加氧酶(ALOX15/LOG15)ELISA試劑盒 ,英文名: ALOX15/LOG15 ELISA Kit
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琥珀酰輔酶A合成酶(SCS)ELISA試劑盒 ,英文名: SCS ELISA Kit
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紅細(xì)胞生成素(EPO)ELISA試劑盒 ,英文名: EPO ELISA Kit
紅細(xì)胞膜蛋白(EMP)ELISA試劑盒 ,英文名: EMP ELISA Kit
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