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人ELISA試劑盒 實驗的詳細解說2018/07/20
人ELISA試劑盒實驗的詳細解說1.加樣:標準品設定5個濃度點10個孔,每個濃度設定平行孔,加入50微升不同濃度的標準品,空白孔設定1個孔加入50微升蒸餾水(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔,在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。2.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。3.配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍
小鼠ELISA試劑盒過程嚴格控制操作2018/07/18
小鼠ELISA試劑盒過程嚴格控制操作1.加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。2.合理安排檢查量,避免反響板過多造成洗板等候時刻長。3.汲取液體時,要用量程和需求量挨近的槍去吸,削減差錯。4.要盡量做雙孔實驗,這么才既能確保數據的準確性,又能反映出試劑盒的精密度。5.樣品稀釋液運用加液器加注,并常常校正其準確性。6.為避免樣品蒸騰,實驗時將反響板放于鋪有濕布的密閉盒內,酶標板加上蓋或覆膜。7.未運用完的酶標板或許試劑,請于2-8℃保存。辣根過氧化物酶符號抗人IgG工作液請根據所需的量裝備運用。
大鼠ELISA試劑盒實驗室常用2018/07/16
大鼠ELISA試劑盒實驗室常用基本原理:將靶蛋白-GST融合蛋白親和固化在谷胱甘肽親和樹脂上,作為與目的蛋白親和的支撐物,充當一種“誘餌蛋白”,目的蛋白溶液過柱,可從中捕獲與之相互作用的“捕獲蛋白”(目的蛋白),洗脫結合物后通過sds-page電泳分析,從而證實兩種蛋白間的相互作用或篩選相應的目的蛋白,“誘餌蛋白”和“捕獲蛋白”均可通過細胞裂解物、純化的蛋白、表達系統以及體外轉錄翻譯系統等方法獲得。此方法簡單易行,操作方便。注:GST即谷胱甘肽巰基轉移酶(glutathioneS-transfe
人ELISA試劑盒操作規程2018/07/11
人ELISA試劑盒操作規程1、法定標準品及標定檢驗方法:法定標準品是指USP、EP、CP等標準品的現行批號,要選擇藥典的檢驗方法;不同的標準采用不同的藥典檢驗方法。2、工作標準品質量標準的建立:要首先建立工作標準品的質量標準,總的原則是在原法定標準的基礎上建立,該標準要嚴于藥典標準;要將主成份含量提高,有關物質的限度降低,其它項目可不變。3、工作標準品的來源和標定:a、工作標準品的來源:近期的質量較好的放行原料藥,外購的符合含量要求的化合物。b、要按照工作標準品的質量標準進行標定檢驗;標定時要全
小鼠ELISA試劑盒基本原理使用說明書2018/07/09
小鼠ELISA試劑盒基本原理使用說明書本試劑盒采用雙抗體夾心法。用ANG1抗體包被于酶標板上,實驗時標本或標準品中的ANG1會與包被抗體結合,游離的成分被洗去。依次加入生物素化的ANG1抗體和辣根過氧化物酶標記的親和素。抗小鼠ANG1抗體與結合在包被抗體上的小鼠ANG1結合、生物素與親和素特異性結合而形成免疫復合物,游離的成分被洗去。加入發光底物混合液,發光底物在辣根過氧化物酶的催化下發出熒光,用化學發光免疫分析儀測定化學發光值(RLU),ANG1濃度與化學發光值之間呈正相關,通過繪制標準曲線求
大鼠ELISA試劑盒實驗中造成誤差的原因2018/07/03
大鼠ELISA試劑盒實驗中造成誤差的原因1.各種儀器:設備的準確性、穩定性、效率以及被污染等情況帶來的誤差。如:①由于放射性測量儀器的穩定性、效率、樣品試管的材料和均勻性及被測物的放射性強度等原因。②由于樣品的自吸收,本底校正,測定時間,可能的污染等原因。③在試驗室中所有的移液管、微量取樣器以及天平的刻度、校準和使用方法等原因。④由于反應試管、移液管以及測定用試管等表面清潔度和所引起的不同吸附等原因都可以對測定結果帶來誤差。2.試劑的純度、質量和穩定性的影響也是造成誤差的重要因素。如標記抗原的比
人ELISA試劑盒樣品制備2018/06/29
人ELISA試劑盒樣品制備:1、研磨樣品,用20目篩過濾,不馬上使用的樣品要放在冰箱儲存。2、在燒杯中稱量50g樣品和5gNaCl。3、并加入100ml80%的甲醇水溶液,密封放置。4、劇烈震蕩1分鐘。5、用WhatmanGF/A濾紙過濾至少10ml樣品處理液,然后轉移到一個新的干凈的容器中。6、用20ml的水稀釋5ml的提取液。作步驟:注意:標準和樣品做平行可以增加精密度和準確度1.使用前將試劑盒和樣品處理液提前從冰箱中拿出來使其達到室溫。2.從鋁箔袋中拿出要求數量的微孔條,放入干燥劑并重新封
小鼠ELISA試劑盒實驗操作安全常識2018/06/25
小鼠ELISA試劑盒實驗操作安全常識:1.加入試劑之前,把它混勻一下,以免放置時間長了濃度不均。凍存的試劑更是要等全部融化后才能使用。2.試劑標簽要寫上配制者姓名和日期,日期不僅要包括月和日,年也要寫上。可能一瓶試劑存在的年頭比您在實驗室的時間都長。3.有機玻璃不能用酒精擦拭,否則會變白,模糊不清。4.不要把注射器丟棄在普通垃圾桶內,否則會有麻煩。不要把針頭從針套拿出來,把針頭帶著針套連同針管一起丟在尖銳物品回收的盒子里。5.進入動物實驗室保持戴口罩的習慣,避免患上過敏癥。6.對于實驗室的女性來
大鼠ELISA試劑盒檢測概述2018/06/22
大鼠ELISA試劑盒檢測概述ELISA(酶聯接免疫吸附反應分析)是以免疫學反應為基礎,將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的催化作用相結合起來的一種敏感性很高的實驗技術。由于抗原、抗體的反應在一種固相載體-聚苯乙烯微量滴定板的孔中進行,每加入一種試劑孵育后,可通過洗滌除去多余的游離反應物,從而保證試驗結果的特異性與穩定性。實際應用中,通過不同的設計,具體的方法步驟可有多種。即:用于檢測抗體的間接法、用于檢測抗原的雙抗體夾心法以及用于檢測小分子抗原或半抗原的抗原競爭法等等。目前我們對客戶提供比較常用
人ELISA試劑盒使用說明及注意事項:2018/06/20
人ELISA試劑盒使用說明及注意事項:1、設定移液體積:從大量程調節至小量程為正常調節方法,逆時針旋轉刻度即可從小量程調節至大量程時,應先調至超過設定體積刻度,再回調至設定體積,這樣可以保證吉爾森單道移液器的度。2、裝配移液槍頭:將移液槍垂直插入吸頭,左右旋轉半圈,上緊即可。用吉爾森單道移液器撞擊吸頭的方法是非常不可取的,長期這樣操作回導致移液器的零件因撞擊而松散,嚴重會導致調節刻度的旋鈕卡住。3、吸液及放液:垂直吸液吸頭浸入液面3mm以下,吸液前槍頭先在液體中預潤洗慢吸慢放放液時如果量很小則應
小鼠ELISA試劑盒操作中應注意以下四個方面2018/06/15
小鼠ELISA試劑盒操作中應注意以下四個方面1.隨著病情的進展或由其他因素影響,某些抗體在機體內的含量發生大幅波動,因此有必要對標本進行預處理,例如對血清標本作適當稀釋,或離心分離血脂等。間接法測定中,標本適當稀釋還可降低非特異性反應。2.加樣一般使用加液器,在中一般有4次加樣:加標本、加酶結合物、加底物和加終止液。加標本時必須每份標本使用一支移液器吸嘴,以免交叉污染。加酶結合物、底物和終止液時則不需更換吸嘴。3.在成批手工檢測中,還應注意操作時差的影響。加樣及混勻時間的差異,使抗原抗體反應和酶
大鼠ELISA試劑盒使用常見錯誤2018/06/13
大鼠ELISA試劑盒使用常見錯誤,裝吸頭。在移液器使用頻繁的實驗室里,常常可以聽到敲擊吸頭的聲音此起彼伏,頗有為枯燥的實驗室生活增添點音樂的味道。走進細看,原來是使用者怕吸頭不能裝緊,在吸頭裝到移液器上之后,在吸頭盒里再敲擊幾次,希望通過這種沖擊力來保證移液的密封性。那這種操作錯在哪里呢?其一,在撞擊的作用下,吸頭可能會變形而影響移液精度;其二,移液器套柄接觸吸頭的部分經過多次強力的摩擦,會逐漸變得粗糙而難以保證密封性,而為了達到良好的密封性就需要更大的撞擊力,惡性循環就此開始;其三,小量程的移
大鼠ELISA試劑盒樣本收集跟保存提幾個建議2018/06/11
大鼠ELISA試劑盒樣本收集跟保存提幾個建議:1、標本凝固不全,有時為了爭取時間快速檢測,常在血液還未開始凝固時即強行離心分離血清,使血清中仍殘留部分纖維蛋白原,在ELISA測定過程中可以形成肉眼可見的纖維蛋白塊,易造成假陽性結果。2、采血試管洗滌不*,反復使用易交叉污染,塑料試管能吸附抗原物質,樣本久置在塑料管內會使樣本內抗原含量下降造成假陰性。3、嚴重溶血,以HRP為標記的ELISA測定中,殘留在孔內的血紅蛋白具有過氧化物酶樣活性,催化底物顯色造成假陽性。4、混有紅細胞的血清易沉淀或附著在聚
人ELISA試劑盒應留意的問題2018/06/08
人ELISA試劑盒應留意的問題:1、封板膜只限一次性運用,以避免穿插污染。2、底物請避光保存。3、嚴厲依照技能說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準。4、一切樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按感染物處理。5、本試劑不同批號組分不得混用。6、如與英文說明書有異,以英文說明書為準。操作時樣本的制備辦法:A、高值樣本:a)至少選用三個高濃度樣本,稀釋倍數應為功能標明的zui大稀釋倍數、并適當添加或減小稀釋份額。b)選取含被測物的高值樣本,必要時可添加被分析物的純品,并計算出理論值。c)運用混合
小鼠ELISA試劑盒樣本取血及注意事項2018/06/06
小鼠ELISA試劑盒樣本取血及注意事項。1剪尾采血小鼠每次采血量0.1ml,大鼠每次采血量0.3-0.5ml左手拇指和食指從背部抓住鼠頸部皮膚,將鼠頭朝下,鼠保定后將其尾巴置于50℃熱水中浸泡數分鐘,使尾部血管充盈。擦干尾部,再用剪刀或刀片剪去尾尖1-2mm,用試管接流出的血液,同時自尾根部向尾尖anmo。取血后用棉球壓迫止血并用6%液體火棉膠涂在傷口處止血。2摘除眼球采血小鼠采血量0.5-1ml左手抓住小鼠頸部皮膚,輕壓在實驗臺上,取側臥位,左手食指盡量將小鼠眼周皮膚往頸后壓,使眼球突出。用眼
大鼠ELISA試劑盒實驗操作經驗2018/06/04
大鼠ELISA試劑盒實驗操作經驗1.elisa實驗中每一個步驟都要認真對待,省去任何一個步驟或者不認真對待都可能導致elisa實驗的失敗2.ti頭吸完后馬上從移液器上取下來,以免忙亂的時候又以同一tip汲取另一種試劑3.elisa實驗開始前認真做個實驗計劃,做實驗時專心致志不要三心二意注意力不集中更不能一邊聊天一邊操作,必要時候進行記錄以便后期尋找出錯原因,在有部分實驗數據出來時,就著手寫文章4.每次elisa實驗結束,也要及時做好實驗報告5.在加入試劑之前,把它混勻一下,以免放置時間過長濃度不
人ELISA試劑盒驗時安全知識講解2018/06/01
人ELISA試劑盒驗時安全知識講解:(1)通常購買試劑盒時要想到一次性用完,若估算不準有剩余的話,要更加注意其保管和管理。(2)購買后,請務必查看標簽上的注意事項。(3)做好預防顛倒,摔壞的措施和管理體制。(4)在使用前再次確認標簽上的注意事項,做好必要的安全對策。(5)對沒有標明其危險特性的ELISA試劑盒也要慎重地進行操作。(6)必須戴好防護用具,小心翼翼進行操作。(7)萬一操作者并非專業技術人員,必須在專業人士的指導監督下進行操作。(8)請參照相關法規、文獻、MSDS等信息,理解并掌握好試
小鼠ELISA試劑盒應留意的問題2018/05/30
小鼠ELISA試劑盒應留意的問題:1、封板膜只限一次性運用,以避免穿插污染。2、底物請避光保存。3、嚴厲依照技能說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準。4、一切樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按感染物處理。5、本試劑不同批號組分不得混用。6、如與英文說明書有異,以英文說明書為準。操作時樣本的制備辦法:A、高值樣本:a)至少選用三個高濃度樣本,稀釋倍數應為功能標明的zui大稀釋倍數、并適當添加或減小稀釋份額。b)選取含被測物的高值樣本,必要時可添加被分析物的純品,并計算出理論值。c)運用混
大鼠ELISA試劑盒運用留心以下相關事宜2018/05/28
大鼠ELISA試劑盒運用留心以下相關事宜:1、若不相同批號試劑盒的不相同組分(A液或酶工作液),或不相同試劑盒的不相同組分進行交叉運用,有或許出現顯色淺或本底高,花板等現象。2、不相同出產的試劑盒因出產工藝和操作方法略有不相同,有必要依照所用試劑盒嚴厲操作。3、反應時間的過失,做許多標本時,*孔和zui終一孔以及一些特別標本或許影響較大。4、臨界值附近標本不堅定為正常現象,任何試劑盒均不可避免,能夠思考將標本做奇數次復檢。5、ELISA試劑盒加樣時樣品量過失,對于陰或很陽的標本影響不大,但對閾值
人ELISA試劑盒實驗收集的標本2018/05/25
人ELISA試劑盒實驗收集的標本尿液標本同血標本一樣,尿液標本受飲食、運動、藥物量等因素的影響也較大,特別是飲食的影響,故一般來說晨尿優于隨機尿。晨尿是指清晨起床后的*次尿標本,較濃縮和酸化,有形成分(如血細胞,上皮細胞,管形)相對集中便于觀察。隨機尿即隨意一次尿,留取方便,但受飲食、運動、藥物影響較甚,易于出現假陽性和假陰性結果,如飲食性蛋白尿,飲食性糖尿,維生素C干擾潛血結果等。餐后尿(午餐后2小時收集的患者尿液)適用于尿糖,尿蛋白和尿膽原的檢查,此時的尿標本可增加試驗敏感性,檢出較輕微的病
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