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上海聯碩生物科技有限公司
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關于細胞培養牛血清種類2020/06/01
一、組份與比例不同胎牛與小牛血清組份與比例不同,兩者所含的促細胞成長因子、促貼附因子、激素及其他活性物質等組份與比例不同,用處與用法不同:某些細胞必需胎牛血清才干成長,而有些細胞只需小牛血清即可,使用濃度不同,一般在5%-10%,有特殊要求的濃度在20%。二、血清的成份這幾種血清的成份,總體沒有什么顯著不同,只是有一些成分與其生存環境有關,如抗體很等少。此外,因成長發育的需求,有些成分在小牛出世后會發作一些變化。不過還沒有搞清楚它與其它的血清之間的不同。有一點能夠必定,胎牛血清中的部分功用蛋白與
八連排、96深孔板,大量現貨!2020/05/26
八連排LANSOPCR八聯排管●0.2ml聯排管透明,適用于用于熒光定量PCR等檢測。LANSOPCR八聯排管蓋●管蓋與管相配套,具有出色的密封性。有凸蓋和平蓋兩種選擇,其中平蓋適合于實時PCR。LANSOPCR八聯排管帶蓋●管蓋相連,更便利,滿足不同的實驗目的提供更多選擇。96深孔板●高純度聚丙烯制造,材料符合USPVI,化學穩定性高,可以高溫滅菌,適合多道移液器以及自動化設備●錐形圓底孔設計,確保樣品低殘留●數字表示,防止孔與孔之間混淆●符合SBS規定,可穩定疊高●密封性可靠:孔板上部平整均
ELISA檢測試劑盒有哪些免疫測定?2020/05/19
ELISA檢測試劑盒中一般有3次加樣步聚,即加標本,加酶結合物,加底物。加樣時應將所加物加在ELISA試劑盒板孔的底部,避免加在孔壁上部,并留意不行濺起,不行發作氣泡。加標本一般用微量加樣器,按規則的量參加板孔中。每次加標本應更換吸嘴,避免發作交叉污染,也可用一次性的定量塑料管加樣。有此測定(如間接法ELISA)需用稀釋的血清,可在試管中按規則的稀釋度稀釋后再加樣。也可在板孔中參加稀釋液,再在其中參加血清標本,然后在微型震動器上震動1分鐘以保證混和。加酶結合物使用液和底物使用液時可用定量多道加液
無菌操作的技術和注意事項2020/05/15
1、玻璃器皿的消毒和清潔⑴新購玻璃器皿的處理新購玻璃器皿應用熱肥皂水洗刷,流水沖洗,再用1%~2%鹽酸溶液浸泡,以除去游離堿,再用水沖洗。對容量較大的器皿如試劑瓶、燒瓶或量具等,經清水洗凈后應注入濃鹽酸少許,慢慢轉動,使鹽酸布滿容器內壁數分鐘后傾出鹽酸,再用水沖洗。⑵污染玻璃器皿的處理①一般試管或容器可用3%煤酚皂溶液或5%shi炭酸浸泡,再煮沸30分鐘,亦可用肥皂或合成洗滌劑洗刷使盡量產生泡沫,然后用清水沖洗至無肥皂為止。然后用少量蒸餾水沖洗。②細菌培養用的試管和培養皿可先行集中,用1kg/c
關于血清在細胞培養中的鑒別方法及作用2020/05/07
一、鑒別方法:血液凝固析出的淡黃色透明液體。如將血液自血管內抽出,放入試管中,不加抗凝劑,則凝血反應被激活,血液迅速凝固,形成膠凍。其周圍所析出之淡黃色透明液體即為血清,也可于凝血后經離心取得。在凝血過程中,纖維蛋白原轉變成纖維蛋白塊,所以血清中無纖維蛋白原,這一點是與血漿zui大的區別。而在凝血反應中,血小板釋放出許多物質,各凝血因子也都發生了變化。這些成分都留在血清中并繼續發生變化,如凝血酶原變成凝血酶,并隨血清存放時間逐漸減少以至消失。這些也都是與血漿區別之處。但大量未參加凝血反應的物質則
細胞培育的一般進程2020/04/29
一、細胞準備工作準備工作的內容包括器皿的清洗、干燥與消毒,培育基與其他試劑的制造、分裝及滅菌,無菌室或超凈臺的清潔與消毒,培育箱及其他儀器的檢查與調試等。?二、選材在無菌環境下從機體取出某種安排細胞,通過必定的處理后接入培育器血中,這一進程稱為選材。理論上講各種動物和人體內的所有安排都可以用于培育,實際上幼體安排比成年個別的安排簡單培育,分解程度低的安排比分解高的簡單培育,腫瘤安排比正常安排簡單培育。選材后應立即處理,趕快培育,因故不能立刻培育時,可將安排塊切成黃豆般大的小塊,置4℃的培育液中保
動物血清如何做到質量保證的?2020/04/23
在細胞培育試驗中,血清一般作為基礎生長培育基的添加劑。而在試驗進程中是否挑選添加血清,主要依據基礎培育基化學成分,培育細胞的類型和培育系統而定。血清的質量大大的影響到試驗作用。一:血清的采集在出產進程中,全血運用無菌一次性塑料袋搜集,待凝聚后分離,搜集和冷凍貯存血清。操控初始搜集是操控終血清產質量量的關鍵因素。只要初始質料符合咱們的規范時才干答應出產。二:產質量料的挑選在商場存在兩個胎牛血清規范:美國農業部規范(USDA)和歐洲規范。美國農業部規范,原始血清必須采自未發生瘋牛病(BSE)和口蹄疫
透析袋如何選擇與使用2020/04/21
一、透析透析就是利用小分子能夠通過,而大分子不能夠通過半透膜的原理,將大小分子量物質分開的一種實驗手段;在膜兩側存在濃度差時,溶質從高濃度的一側(通常是樣品置于透析袋中)擴散通過半透膜到低濃度的一側(透析溶液一側)直至膜兩邊濃度達到平衡。如下圖所示:利用透析分離物質的優缺點:優點:樣品回收率高;操作簡單,無需繁瑣準備工作;成本低廉,可一次性使用;分離條件溫和;無需監控缺點:耗時較長(24-48小時);要求較為明顯的樣品和雜質之間的分子量差(1-2個數量級)。二、三種不同類型的透析袋1、普通型透析
如何保存化學試劑2020/04/16
試驗中的化學試劑大多具有不穩定性,保存方法也因性質不同而不同,那試劑應如何保存呢?常用不穩定試劑的分類及保存要求:(1)易揮發、低燃點的試劑要密封,放于陰涼、通風、遠離火源處保存。(2)易揮發或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風處保存。?(3)與二氧化碳反響的物質要密封包村。因為其相應的溶液較固體更易反響,所以更要留意密封保存。(4)易與氧氣作用的試劑,不宜長時間存放其水溶液;亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放;鉀,鈉,白磷更要選用液封方式。(5)化學試劑與水蒸氣,水發作反響的物質要密封,并遠離水源保
關于細胞傳代的操作2020/04/14
1.細胞吸除培育瓶內舊培育液。2.參加無菌pbs洗液(5-8mL)悄悄潤濕細胞,稀釋多余的培育基,之后吸走洗液,動作要輕,不可吹打到細胞。3.向瓶內參加含0.25%EDTA的胰蛋白酶混合液少許,以能覆滿瓶底為限。4.置溫箱中2~5分鐘,一旦鏡檢發現細胞質回縮,細胞間隙增大后,細胞變圓,比較松動后,當即終止消化。?5.參加該細胞對應的培育基6mL(T25培育瓶)或12mL(T75培育瓶)終止消化。6.用吸管通過吸取的培育基悄悄反復吹打瓶壁細胞,使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時應盡量以少的次數將細
細胞爬片制備詳細過程2020/04/10
一、爬片的準備1.爬片可用一般的蓋玻片,也可用爬片;2.應用蓋玻片,可根據自己的需要剪裁成合適的大小,以備置于6孔板、12孔板或24孔板;裁剪時可用前護士輸液用于打開玻璃安瓶的小沙輪,或者是口腔科的那種小沙輪,輕輕劃一下后,稍用力一掰就分開了。如果接種大皿的話,我一般不將蓋玻片切開,直接清潔后放入培養皿中,到染色時再將之切開,這樣既保證了細胞均一性,又可同時做幾個指標的染色。3.將剪裁好的爬片,置于濃硫酸中浸泡并過夜,第二天先用自來水沖洗20遍,再置于無水酒清中浸泡6小時,再用三蒸水沖洗3遍,放
細胞凍存與復蘇操作步驟與注意事項2020/04/07
細胞凍存是細胞保存的主要方法之一。利用凍存技術將細胞置于-196℃液氮中低溫保存,可以使細胞暫時脫離生長狀態而將其細胞特性保存起來,這樣在需要的時候再復蘇細胞用于實驗。而且適度地保存一定量的細胞,可以防止因正在培養的細胞被污染或其他意外事件而使細胞丟種,起到了細胞保種的作用。一、原理在不加任何條件下直接凍存細胞時,細胞內和外環境中的水都會形成冰晶,能導致細胞內發生機械損傷、電解質升高、滲透壓改變、脫水、PH改變、蛋白變性等,能引起細胞死亡。如向培養液加入保護劑,可使冰點降低。在緩慢的凍結條件下,
細胞培養方法2020/04/02
1.玻璃吸管和玻璃培養瓶的消毒:高壓蒸汽滅菌15分鐘以上;2)干烤消毒140度2小時以上;2.無菌工作臺先清洗后用75%酒精擦拭干凈,紫外線照射40分鐘以上;各種培養板照射3小時以上;3.培養基(pH7.2)和血清配制好后要做無菌試驗:將血清按10%加入培養基內,用無菌的玻璃離心管或玻璃瓶取*培養基5-10ml置培養箱內培養2-3天,肉眼見無渾濁或沉淀等異物.分裝后置-20度保存;4.消化液(pH7.8)或其它加入液,應用高壓蒸汽滅菌或一次性無菌濾器過濾除菌,分裝成支置-20度保存;5.培養箱應
解析抗原抗體受那些要素影響2020/03/31
在常見實驗呢中,有很多不當操作情況下都會影響抗原—抗體反響的,以elisa試劑盒為例,為您解析這些要素別離來自哪里:抗原—抗體結合進程可分為兩個階段:一階段為特異性結合階段,此階段反響迅速,在數秒鐘至數分鐘內完成,但無可見反響;第二階段為可見反響階段,歷時數分鐘至數小時,此階段易受以下要素的影響。一、電解質抗原和抗體別離有對應的極性基團,能彼此吸附并由親水性變為疏水性。電解質的存在可使抗原—抗體復合物失掉電荷而凝聚,呈現可見反響。故免疫學實驗中多采用生理鹽水稀釋抗原或抗體。二、酸堿度抗原—抗體反
影響ELISA試劑盒試驗成果的要素2020/03/24
ELISA試劑盒,即酶聯免疫法。ELISA法具有靈敏度高、特異性強、重復性好的特點,并具有操作簡潔、無放射性危害的優點,因此多年來廣泛應用于各高校、醫院、血站和科研機構的試驗室中。影響ELISA試驗的要素有如下三方面:一、試劑盒?1、抗原、抗體活性對效價的影響:主要是試劑中抗體(或抗原)的效價下降或失活,成果不易判別。再有ELISA試劑盒靈敏度高,對雜質的反響靈敏度也高,試驗中空白對照OD值偏高或假陽性;2、酶結合物濃度過高,也會導致OD值假性增高。二、試驗儀器1、加樣器是否通過校正,酶免測定血
抗體特異性都有哪些斷定2020/03/20
抗體的特異性斷定抗體的特異性是指與相應抗原或近似抗原物質的辨認才干。抗體的特異性高,它的辨認才干就強。衡量特異性一般以交叉反應率來標明。交叉反應率可用競賽克制試驗測定。以不同濃度抗原和近似抗原別離做競賽克制曲線,核算各自的結合率,求出各安閑IC50時的濃度,并按公式核算交叉反應率。假如所用抗原濃度IC50濃度為pg/管,而一些近似抗原物質的IC50濃度幾乎是無窮大時,標明這一抗血清與其他抗原物質的交叉反應率近似為0,即該血清的特異性較好。拓展延伸:1.抗體的效價斷定不管是用于確診仍是用于醫治,制
血清中常見的幾個問題2020/03/16
保存血清的方法?血清應保存在-5°C至-2°C。然而,若存放于4°C時,請勿超過一個月。若您一次無法用完一瓶,建議將無菌分裝血清至恰當的滅菌容器內,再放回冷凍。如何解凍血清才不會使產品質量受損?將血清從冷凍箱取出后,先置于2-8C冰箱使之溶解,然后在室溫下使之全溶。但必須注意的是,溶解過程中必須規則地搖晃均勻。如何避免沉淀物的產生?1、解凍血清時,請按照所建議的逐步解凍法(-20°C至4°C至室溫),若血清解凍時改變的溫度太大(如-20°C至37°C),實驗顯示非常容易產生沉淀物。2、解凍血清時
血清保存的六點注意事項2020/03/13
1.需要長期保存的血清有必要儲存于-20℃-70℃低溫冰箱中。4℃冰箱中保存時刻切勿超過1個月。由于血清結冰時體積會增加約10%,因而,血清在凍入低溫冰箱前,有必要預留一定體積空間,不然易發作污染或玻璃瓶凍裂。2.一般廠商供給的血清為無菌,無需再過濾除菌。如發現血清有懸浮物,則可將血清加入培養液內一起過濾,切勿直接過濾血清。3.瓶裝血清凍結需采用逐漸凍結法:-20℃至-70℃低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天。然后移入室溫,待全部溶解后再分裝。在溶解過程中需不斷悄悄搖晃均勻(小心勿形成氣泡)
酶聯免疫吸附法2020/03/11
原理:可用于測定抗體,也可用于檢測杭原。其基本原理是采用抗原與抗體的特異反響將待測物與酶連接,然后通過酶與底物發生顏色反響,用于定量測定。酶聯免疫吸附法測定的對象可所以抗體也可所以抗原。3種必要的試劑:①固相的抗原或抗體(免疫吸附劑);②酶符號的抗原或抗體(符號物);③酶效果的底物(顯色劑)。ELISA進程包括:抗原吸附在固相載體上,這個進程稱為包被,加待測抗體,再加相應酶符號抗體,生成抗原--待測抗體--酶符號抗體的復合物,再與該酶的底物反響生成有色產品。借助分光光度計的光吸收核算抗體的量。依
關于血清的使用與儲存2020/03/03
準確的使用及保存血清,才能使血清發揮應有的作用;今天,我司要為您解說血清的使用與儲存:1.使用前處理:大部分血清在使用前必需滅活處置,即56°C30分鐘。滅活的目標是去除血清中的補體身分,避免補體對細胞發作毒性同化。血清始末滅活也會喪失一些對細胞無利的成分,如發展因子,是以也有人提出血清不經滅活直接用于造就,這樣做的前提是確認血清中不含補體身分。對付一些品德高的胎牛血清和新牛血清能夠斟酌不經滅活直接用于細胞造就。2.使用濃度:自從有了分化造就基,血清就是作為一種添加身分與分化造就基稠濁使用,使用
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