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化工儀器網>產品展廳>試劑標物>行業專用試劑>生化與分子生物學用試劑> RNA甲基化修飾試劑盒

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RNA甲基化修飾試劑盒

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上海譽澄智能科技有限公司生物智能事業部主要代理銷售生物科技領域內科研院校與工業使用的各種實驗試劑、實驗耗材、實驗儀器和石油石化方面的設備。目前所代理的國外產品線,主要集中于分子生物學、免疫生物學、生物信息學、細胞生物學、蛋白質組學等領域;眾多產品線在國內得到客戶的好評與厚愛。合作伙伴的產品與服務已經覆蓋美、英、德、法、日、韓、澳等150多個國家,銷售網絡遍步,銷售額快速增長。客戶使用其產品線的實驗論文在各種性科技期刊(NATURE 自然、PNAS 美國*院刊、Stem Cells 干細胞、 Nucleic Acids Res核酸研究等)上發表。同時,我司也應客戶的需要,提供一些國內的產品與服務,為您提供了便利的可選擇的眾多品牌,在我司定購產品,使您充分享有“一站式”定購服務的便利與好處。相信物美價廉、品質*不僅是客戶的追求,也是我司追求的Z高境界。

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RNA甲基化修飾試劑盒

此品非常適合從細胞與組織等樣本中提取的總RNA,進行RNA甲基化修飾操作,整個實驗時間僅需3小時。

重點提示

使用必讀: 使用:采用RNA甲基化修飾試劑盒處理得到的轉化RNA對于像甲基化特異性PCR, MS-HRM,和亞硫酸鹽測序如:焦磷酸測序和深度測序是非常理想的。其中總RNA可以是 來自哺乳動物,植物,真菌,細菌和病毒等樣本中得到的。  

 

RNA輸入量:對于每次亞硫酸鹽實驗RNA的輸入量是5 ng-1 ug.zui為理想的RNA的輸入 量應該是200 – 500 ng。當使用做甲基化特異性RT-PCR時,RNA的 輸入量可以少至<10 ng,但是PCR循環數應該多于45。RNA處理后的得率取決于RNA的輸 入量,自然的RNA量和起始材料來源。

 

起始材料:非常適合使用各種細胞和組織樣本,比如:來自培養瓶和微孔板培養的細胞, 新鮮和冷凍的組織,石蠟包埋組織,血液,體液樣本等等。

預防措施:       為了避免交叉污染,接下來的預防措施是非常有必要的。F-Spin Columns:仔細地吸 取樣本或溶液到 F-Spin Columns。使用滅菌的槍頭并在轉移完不同的溶液時隨時更換。在 將 F-Spin Columns 放到微型離心機前始終保證蓋子是蓋緊的。在整個操作步驟中必須帶干 凈的手套。為了避免手套接觸到樣本,應該理科更換手套。

產品簡介

報道,5-甲基胞嘧啶(5-mC)不僅廣泛的存在于基因組 DNA 中,在 RNA 中也普 遍存在。但是,RNA 甲基化的功能仍不清楚。有些研究認為 RNA 甲基化在翻譯調控中起著 重要作用,而有些研究認為其在 RNA 的穩定性及結構中起著重要作用。在人類中, 5-mC 會 出現在各種不同形式的 RNA 分子上,包括 tRNAs,rRNAs,mNRAs,非編碼 RNA(ncRNAs)等。 至少有 10275 個的 5-mC 候選位點被發現在 mRNAs 和 ncRNAs,它覆蓋了 10.6%殘留在轉 錄組的總胞嘧啶。5-mC 似乎濃縮在某些類型的 ncRNA,但相對缺乏 mRNAs。然而,絕大多 數(83%)的候選位點中發現在mRNAs。在這些轉錄組上, 5-mC 似乎耗盡在蛋白質編碼序列, 且濃縮在 5’和 3’UTRs。兩個不同的甲基轉移酶,NSUN2 和 DNMT2 已知催化 5-mC 修改在 真核生物的 RNA。zui近強有力的數據表明,RNA 胞嘧啶甲基化作用影響著調節各種生物過 程,如 RNA 穩定性與信使核糖核酸(mRNA)的翻譯。此外,損失 5-mC 在 vault RNAs 導 致異常的處理成 Argonaute-associated 小 RNA 片段,可以作為小分子核糖核酸(即 microRNA) 。 因 此 , 受 損 的 處 理 的 vault ncRNA 可 能 與 導 致 人 類 疾 病 的 病 因 NSUN2-deficiency 人類疾病相關。亞硫酸氫鹽轉化 RNA,緊接著是 RT-PCR 擴增、克隆和 可信的測序分析,來收集可靠的關于 RNA 胞嘧啶甲基化狀態的信息,變得尤為重要。由于 RNA 的不穩定性,導致對于 RNA 的研究十分困難。為此,我公司給您強烈* RNA 甲基 化修飾試劑盒,解決了如上的問題。該產品包括了進行修飾所有必要組件,*設計的混合 液配方包含了 RNA 的保護劑,以防降解。這樣有效保證了胞嘧啶轉化成尿嘧啶,而甲基化 的胞嘧啶幾乎不受影響。

無毒的 RNA 緊緊的結合在離心柱基質上, RNA 可以有效去除殘余的亞硫酸氫和鹽, 得到純凈的修飾 RNA。洗脫后的 RNA 可以用于做 qMSP(即 RT-PCR),克隆,MS-HRM 和測序分析(如:焦磷酸分析和深度測序)等各種 RNA 甲基化后續實驗分析。產品功能簡 介如下:

 

有效且高效地準備轉化好的RNA用于各種下游實驗分析。

。這個

工具是專門為亞硫酸氫鹽轉化和驗證RNA而設計的,具有如下的優勢和特性:

l 快速簡便的操作流程僅需 3 小時   l 將未甲基化的 RNA 胞嘧啶(C)*轉化為尿嘧啶(U),轉化率>99.9% ;不當或錯誤的轉化 率<0.1% (甲基化胞嘧啶轉化成胸腺嘧啶)。  l 強給力的 RNA 保護劑有效防止了 RNA 的降解,保護了>90%的 RNA。  l 包括的對照引物是專門針對特異轉化后的 RNA 設計的,可以用來測試其是否*正確的實現了 亞硫酸鹽轉化。  l 可用于亞硫酸鹽轉化的 RNA 低至每次反應 5 ng  l 簡單、可信和實驗條件始終如一。  

原理/步驟

 包括了所有定性修飾總RNA樣本的必要試劑。*轉化試劑包含了 RNA保護劑,有效防止了化學試劑和嗜熱試劑的降解。這樣提高了胞嘧啶轉化為尿嘧啶的 效率,胞嘧啶脫氨基作用可以可以忽略不計。無毒的RNA捕獲溶液增強了RNA結合在柱基 質上的能力,這樣轉化后的RNA可以有效地被洗脫同時將亞硫酸氫鹽和鹽分*清除。更 值得一提的是,在這個試劑盒中我們配套的提供了一對特異性的甲基化引物,*地方便了 您進行qMSP(甲基化定量PCR)分析。



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