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BY-1215 H9c2(2-1)大鼠胚胎心肌細胞系

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H9c2(2-1)大鼠胚胎心肌細胞系
H9c2(2-1)大鼠胚胎心肌細胞系作為源自大鼠胚胎心室肌組織的心肌樣細胞模型,因保留心肌細胞的收縮功能及電生理特性,在心肌發育機制、心肌損傷修復及心血管疾病病理研究中具有重要價值,成為探究心肌生理功能及相關疾病的關鍵實驗工具。
細胞特性與來源背景:該細胞系源自大鼠胚胎 14 天心室肌組織,經原代培養和克隆化篩選建立。細胞形態呈梭形或多角形,部分呈分支狀,胞體大小均勻(長度約 50-80μm,寬度約 15-20μm),胞質豐富且呈嗜酸性,可見大量排列整齊的肌原纖維,約 30% 細胞可形成肌管樣結構,細胞核呈橢圓形,位于細胞中央,核仁明顯。生長方式為貼壁生長,呈平行排列或交織成網,具有一定的接觸抑制,傳代后 24 小時貼壁率達 94%。核心參數表現出心肌細胞特征:倍增時間約 55 小時,連續傳代 30 次后仍保持穩定的生物學特性;表面標志物表達du特,心肌肌動蛋白(α-actin)陽性率達 96%,心肌特異性肌鈣蛋白 T陽性率 92%, connexin43 陽性率 88%;具有正常的二倍體核型(染色體數 42 條),無染色體畸變;可自發性收縮,收縮頻率約 30-40 次 / 分鐘,在腎上腺素刺激下頻率可增加至 60 次 / 分鐘;能分泌腦鈉肽(BNP),基礎分泌量達 25pg/mL,在缺氧處理后分泌量增加 3.5 倍;無微生物污染,細胞純度達 97%,保障實驗結果的可靠性。
科研應用價值:在心肌分化研究中,H9c2 (2-1) 細胞經 5 - 氮雜胞苷處理 7 天后,肌小節結構成熟度提升 60%,收縮同步性增加 50%,心肌轉錄因子 GATA4 表達量增加 4.2 倍,可模擬心肌細胞的成熟分化過程,為解析心肌發育機制提供理想模型。
心肌損傷修復研究方面,該細胞經缺氧 / 復氧處理后,乳酸脫氫酶(LDH)釋放量增加 4.5 倍,凋亡率達 38%,活性氧(ROS)水平提升 65%;而經血管內皮生長因子(VEGF)處理后,細胞存活率提升 40%,抗氧化酶 SOD 活性增加 3.2 倍,可模擬心肌缺血再灌注損傷及修復過程,適用于探究心肌保護機制。
心血管疾病研究領域,該細胞經高糖(30mM)處理后,細胞外基質蛋白 fibronectin 表達量增加 2.8 倍,心肌纖維化標志物 α-SMA 陽性率提升 45%,可模擬糖尿病心肌病的心肌重構過程,為探究代謝性心肌病的發病機制提供實驗基礎。此外,該細胞與心肌成纖維細胞共培養時,成纖維細胞的膠原分泌量增加 3 倍,可用于探究心肌細胞 - 成纖維細胞相互作用在心肌纖維化中的調控機制。
培養與保存規范:推薦使用含 10% 胎牛血清的 DMEM 高糖培養基,添加 2mM 谷an酰胺、1mM 丙酮酸鈉及 1% 抗生素混合液,培養環境為 37℃、5% CO?飽和濕度培養箱。培養基需每 2 天更換一次,以維持細胞的收縮功能。傳代時,用 PBS 沖洗細胞 2 次,加入 0.25% 胰dan白酶 - EDTA 混合液,37℃孵育 5-8 分鐘,待細胞間隙增大后輕輕吹打使細胞脫落,傳代比例為 1:4-1:6,每 3-4 天傳代一次,避免過度密集影響收縮特性。
凍存液采用培養基 + 10% DMSO+20% 胎牛血清的混合液,細胞濃度調整為 5×10?個 /ml,經程序降溫(-20℃1 小時→-80℃過夜→液氮保存)后,復蘇存活率達 86% 以上,2-3 代內可恢復正常的生長和收縮功能。運輸采用 T-25 培養瓶活細胞運輸,收到細胞后需靜置培養 24 小時,更換培養基后觀察細胞形態及收縮情況,確認無異常漂浮物后進行實驗。該細胞系僅限科研使用,操作時需避免頻繁振動培養瓶,以防影響細胞間連接。
H9c2 (2-1) 大鼠胚胎心肌細胞系以其穩定的心肌特性、完整的收縮功能及典型的電生理響應,在心肌生物學研究與心血管疾病機制探索中發揮著重要作用,為揭示心肌疾病的發病機制和開發心肌保護藥物提供了可靠的細胞模型。

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