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上海科博瑞生物科技有限公司
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減少ELISA實驗誤差需注意的地方2023/04/26
做任何實驗,我們能做的就是盡zui大的努力減少實驗誤差,在ELISA試劑盒實驗操作中,誤差分有系統誤差、偶然誤差、過失誤差,而一個小小的誤差主意能夠影響到實驗,那么怎樣才能縮小實驗誤差呢?除了需要細心之外,還有一些需要重點ELISA試劑盒注意的地方①檢驗技師應具備從事實驗室操作的基本素質和實踐經驗。能熟練操作實驗儀器、器械,具有一定總結和分析問題的能力,對實驗中出現的意外情況能及時妥善解決。②使用校對過的微量移液器,排除自然誤差。移液器準確與否對定量檢測尤為重要。③仔細閱讀說明書,嚴格按照說明書
科博瑞生物elisa試劑盒原理與組成2023/04/19
科博瑞生物專業提供各類進口,國產ELISA試劑盒,生化試劑盒,生化試劑,細胞,菌種等產品,并提供實驗外包,技術指導,操作指導,代做實驗,代做課題等技術服務。1.夾心法:夾心法常用于檢測大分子抗原,一般的操作步驟為:a.將具有專一性的抗體固著(coating)于塑膠孔盤上,完成后洗去多余抗體b.加入待測檢體,檢體中若含有待測的抗原,則其會與塑膠孔盤上的抗體進行專一性鍵結c.洗去多余待測檢體,加入另一種對抗原專一的一次抗體,與待測抗原進行鍵結d.洗去多余未鍵結一次抗體,加入帶有酶的二次抗體,與一次抗
免疫檢測的基礎知識2023/04/11
ELISA是一種免疫測定。免疫測定(immunoassay,IA)是應用免疫學技術測定標本的方法。在臨床檢驗中主要通過抗原抗體反應檢測體液中的抗體或抗原性物質。1.1抗原抗原是能在機體中引起特異性免疫應答的物質。抗原進入機體后,可刺激機體產生抗體和引起細胞免疫。在免疫測定中,抗原是指能與抗體結合的物質。能在機體中引起抗體產生的抗原多為分子量大于5000的蛋白質。小分子化合物在與大分子蛋白質結合后能引起機體產生特異性抗體的,稱為半抗原(hapten)。例如某些激素、藥物等。抗原的反應性取決于抗原決
正確保存人跨膜受體蛋白elisa試劑盒真的很重要2023/04/10
elisa試劑盒是一種廣泛應用于生物醫學研究的工具,用于檢測人跨膜受體蛋白。正確定儲存Elisa試劑盒對于確保試劑盒的穩定性和可靠性至關重要。人跨膜受體蛋白elisa試劑盒的儲存方法包括以下幾個方面:1、溫度:Elisa試劑盒應儲存在2-8°C的溫度下,防止試劑被暴露在高溫環境下。長時間的高溫暴露會導致試劑的失效。2、干燥:為了避免潮濕和氧化,Elisa試劑盒的容器應始終保持干燥并密封。這可以通過在使用完試劑后緊密關閉容器來實現。如果試劑盒的密封被破壞,試劑盒將容易受到潮濕和氧化損傷。3、避光:
ELISA中非特異性顯色原因分析2023/03/27
【摘要】:影響ELISA中非特異性顯色的原因很多,如試劑盒特異性、檢驗標本中含酶標記物的干擾物,操作過程中的問題。本文就這一原因作一簡要分析,以便可以通過以上措施把非特異顯色降至zui低限度,從而提高檢測的特異性,并得到更準確、可靠的實驗結果。【關鍵詞】ELISA非特異性顯色酶聯免疫吸附試驗(ELISA)自1971年自問世以來,以其敏感性高,特異性強,操作簡便、安全,而廣泛應用于臨床診斷,開創了免疫學診斷的新紀元。但同其它免疫診斷方法一樣酶免試劑在它的研究、生產及使用中常常會碰到非特異性問題,本
酶聯免疫吸附測定(ELISA)操作要點2023/03/24
1標本的采取和保存可用作ELISA測定的標本十分廣泛,體液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、糞便)等均可作標本以測定其中某種抗體或抗原成份。有些標本可直接進行測定(如血清、尿液),有些則需經預處理(如糞便和某些分泌物)。大部分ELISA檢測均以血清為標本。血漿中除尚含有纖維蛋白原和抗凝劑外,其他成份均同等于血清。制備血漿標本需借助于抗凝劑,而血清標本只要待血清自然凝固、xue塊收縮后即可取得。除特殊情況外,在醫學檢驗中均以血清作為檢測標本。在ELISA中血漿和血清可同等應用。血清標本可
影響ELISA試驗效果常見問題原因分析及解決辦法2023/03/20
ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在臨床上得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。我將操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給同行帶來一些啟發,提高試驗質量。操作步驟可能原因解決辦法選擇試劑選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。加樣1.血清或血漿標本分離不好即進行加樣;2.手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時);3
細胞培養技術簡要總結2023/03/14
細胞培養泛指所有體外培養,其含義是指從動物活體體內取出組織,于模擬體內生理環境等特定的體內條件下,進行孵育培養,使之生存并生長。細胞培養工作現已廣泛應用于生物學、醫學、新藥研發等各個領域,成為最重要的基礎科學之一。細胞培養常用培養基來維持細胞生長的所需營養,培養基一般分為固體培養基和液體培養基。液體培養基中加入一定的凝固劑(如瓊脂)或固體培養物(如麩皮、大米等)便成為固體培養基。固體培養基在營養通風的表面可培養單個菌落,在細胞的分離鑒定、技術等方面起到相當重要的作用。下面來簡單介紹下細胞培養的過
影響細胞株凍存的因素2023/03/10
你們細胞是怎么凍存的?求解!!!我的是4度冰箱放半小時,-20度冰箱半小時,然后轉移到-80度冰箱!但是放在-80度冰箱1個月后,細胞復蘇就感覺狀態不太好了!!做實驗前要先學會凍存,以備自己在后面的實驗中能保持同一來源、穩定可靠的細胞,且可減少污染或其它不利影響。影響凍存細胞活性的因素1、細胞凍存保護劑:常用的有二甲基亞砜(DMSO)和甘油,常用的濃度為5%-10%(90%小牛血清)。DMSO對二倍體細胞的毒性較甘油小。2、細胞懸液的凍結速度:慢凍時冰凍在細胞外形成,因此不致損害細胞。多數細胞以
我司ELISA試劑盒產品用處大講解2023/03/10
ELISA試劑盒用處:使用定性夾心免疫檢測技術,用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板條,這些多肽是我國型HEVdu株中心氨基酸序列中抗原性很強的肽段,分別來自于該du株的開放閱讀框2和開放閱讀框3。將樣品或規范品參加孔中并孵育,假如其中存在HEVIgM抗體,這些抗體就會與HEV的多肽抗原結合,并固定在上面,洗板除掉其它非特異性抗體和樣品中的其它成份。然后參加羊抗人IgM-HRP(辣根過氧化物酶)酶結合物,經第二次孵育后,酶結合物就會與*次孵育結合上的HEVIgM抗體相結合,洗板除掉未結合的酶結合物
使用小鼠麥胚凝集素elisa試劑盒需要注意這些因素2023/03/09
小鼠麥胚凝集素elisa試劑盒是一種常見的生物分析試劑盒,它能夠通過檢測樣品中特定的蛋白質、抗體等分子來實現對生物體系的分析和檢測。但是,在使用ELISA試劑盒時也需要注意一些事項,以確保實驗的準確性和可靠性。1、實驗前準備在進行ELISA實驗前,需要對小鼠麥胚凝集素elisa試劑盒進行充分的準備工作。首先,需要核對試劑盒的使用說明書,了解試劑盒中各種試劑的性質、用途、儲存條件等信息。其次,需要對試劑盒中的試劑進行充分的混勻,以確保試劑的均勻性和穩定性。最后,需要對實驗設備、試劑管、移液器等實驗
蛋白保存方法詳解2023/03/07
生物大分子的貯藏保存可分為干態和液態貯藏兩種。蛋白質失活受多種理化因素的影響,主要有空氣、溫度、水分、光線、酸堿度、樣品狀態、微生物活動、保存時間和容器等。這些因素可單獨起作用,但更多情況是協同作用。總的來說,蛋白質的保存主要考慮其構型穩定、活性中心的保護、避免輔助因子喪失等,以防止其變性、解聚或降解。由于溫度和水分對蛋白質的穩定性影響很大,故蛋白質最好是低溫、冷凍或冷凍干燥后低溫干燥保存。1.液態保存(1).在低溫下保存蛋白質對熱敏感,溫度越高,穩定性越差。因此,低溫保存蛋白質溶液在絕大多數情
ELISA試劑盒(酶聯免疫分析測試法)實驗操作中常見問題分析(三)2023/02/22
(4)顯色和比色TMB經HRP作用后,約40分鐘顯色達ding峰,隨即逐漸減弱,至2小時后即可wan全消退至無色。TMB的終止液有多種,疊氮鈉和十二烷基硫酸鈉(SDS)等酶抑制劑均可使反應終止。這類終止劑尚能使藍色維持較長時間(12-24小時)不褪,是目視判斷的良好終止劑。此外,各類酸性終止液則會使藍色轉變成黃色,此時可用特定的波長(450nm)測讀吸光值。酶標比色儀簡稱酶標儀,通常指專用于測讀ELISA結果吸光度的光度計。酶標儀的主要性能指標有:測讀速度、讀數的準確性、重復性、精確度和可測范圍
ELISA試劑盒(酶聯免疫分析測試法)實驗操作中常見問題分析(二)2023/02/17
(3)操作技術的影響操作過程的控制:1嚴格按照試劑說明書進行操作。操作前將試劑在室溫下平衡30~60min。2加樣后及時放人孵箱。標本較多時,要分批操作。按說明步驟嚴格控制操作時間,防止孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗che底。3封板溫育時,各孔一定要封嚴,防止陽性標本的液體蒸發,產生周邊現象從而導致“花板”的出現。4用洗板機洗板時,保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干:還要防止針口有纖維蛋白或異物,這些異物在洗板的
ELISA試劑盒(酶聯免疫分析測試法)實驗操作中常見問題分析(一)2023/02/11
由于ELISA(酶聯免疫試驗)具有靈敏度較高、特異性好的特點,已廣泛應用于各種傳染性疾病的篩查如肝炎、愛滋、優生優育等。雖然洗板只是ELISA實驗重要環節中的一個,但作為專業的洗板機生產廠家,我們必須對影響ELISA實驗結果各因素有一定的認識。優質的試劑,良好的儀器和正確的操作是保證ELISA檢測結果準確可靠的必要條件。如不注意,就易出現白板、花板、色弱和假陽性等現象。尤其是花板現象(就是空白、陰性、陽性對照以及室內質控孔結果正常,而標本孔的OD值卻明顯偏高)是各個廠家洗板機調試中經常遇到的問題
人血ELISA試劑盒的有效期是多久?2023/02/09
人血ELISA試劑盒將人血幼素(HJV)抗體包被于96孔微孔板中,制成固相載體,向微孔中分別加入標準品或標本,其中的人血幼素(HJV)與連接于固相載體上的抗體結合,然后加入生物素化的人血幼素(HJV)抗體,將未結合的生物素化抗體洗凈后,加入HRP標記的親和素,再次洗滌后加入TMB底物顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,井在酸的作用下轉化成黃色。顏色的深淺和樣品中的人血幼素(HJV)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(0.D.值),計算樣品濃度。人血ELISA試劑盒的有效期是多
凝血酶的作用2023/02/06
凝血酶又叫做凝血酵素,為白色或類白色的凍干塊狀物或粉末。是一種由凝血酶前體(血漿中的必要成分)形成的蛋白質水解酶,催化纖維蛋白元變成纖維蛋白而促使血液凝固。用于毛細血管出血的局部止血以及外科手術后組織愈合。凝血酶能使纖維蛋白原轉化成纖維蛋白。局部應用后作用于病灶表面的血液很快形成穩定的凝血kuai,用于控制毛細血管、靜脈出血,或作為皮膚、組織移植物的黏合、固定劑。pH<5時失效。凝血酶對血液凝固系統的其他作用尚包括誘發血小板聚集及繼發釋放反應等。每1ml中含500單位的0.9%氯化鈉溶液微顯渾濁
DTT(二硫蘇糖醇)的作用2023/01/31
DTT(二硫蘇糖醇)的作用DTT即DL-Dithiothreitol,中文名為二硫蘇糖醇。分子式為C4H10O2S2,分子量為154.25,。常用還原劑,有抗氧化作用。DTT和巰基乙醇相比,作用相似,但DTT的刺激性氣味要小很多,毒性也比巰基乙醇低很多。而且DTT比巰基乙醇的濃度低7倍時,兩者效果相近。DTT的特性:DTT是一種很強的還原劑,其還原性很大程度上是由于其氧化狀態六元環(含二硫鍵)的構象穩定性。它的氧化還原電勢在pH為7時為-0.33伏。由于容易被空氣氧化,因此DTT的穩定性較差;但
大鼠Bcl-2試劑盒選型和使用時要注意些什么?2023/01/09
大鼠Bcl-2試劑盒的產品選型要注意這幾點:1、是檢測抗體還是抗原。(1)檢測抗原常用于檢測抗原的方法是非競爭性的雙抗體夾心法,其次是競爭法,但競爭法在具體實驗中有些困難;特別是檢測微生物的抗原,因為其需標記抗原,對于某些抗原很難做到甚至是不可能的。在競爭法中,沒標記的抗原與標本直接混合在一起,許多標本中含有酶抑制劑或蛋白A樣物質(例如糞便),可影響elisa結果。(2)檢測抗體檢測抗體種類常用的方法是檢測抗體種類的捕獲法,這個方法用于檢測特異性IgG,IgA盒IgM。這個方法的是因相捕獲的抗體
凍存過的全血為什么不建議再拿來做ELISA實驗2023/01/09
很多ELISA實驗新手客戶都會咨詢我司技術能否把全血提取出來放-70℃條件保存,等實驗開展了(比如一個月左右的時間)再離心全血取血清或者血漿做ELISA實驗?這種做法我司技術都是持反對建議的。與此同時,也是明確要求我司銷售人員在與客戶售前溝通時建議老師全血樣本提取好了應該及時離心出血清或者血漿。并要求-70℃條件下保存,如果一個月左右可以開展實驗可以-20℃保存,期間不能反復凍融。至于凍存后的全血不可以再提取血清、血漿樣本來做elisa的具體原因如下:1.全血凍存后解凍,用常規離心方式提取血清仍
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