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常見問(wèn)題之影響蛋白表達(dá)因素有哪些？2021/11/25: 1.蛋白本身的特性：蛋白分子量大小、蛋白來(lái)源/物種、是否為毒性蛋白，蛋白翻譯后修飾程度、蛋白自身結(jié)構(gòu)的復(fù)雜程度2.宿主的選擇：宿主本身的特性、蛋白表達(dá)需求等都影響著蛋白表達(dá)3.蛋白需求量：蛋白應(yīng)用范圍對(duì)應(yīng)的需求量不同，所以要根據(jù)需求量確定表達(dá)系統(tǒng)4.質(zhì)粒載體的選擇：載體是攜帶外源基因的工具，要根據(jù)系統(tǒng)選擇合適的載體才能使蛋白更好的表達(dá)5.融合標(biāo)簽的選擇：蛋白重組表達(dá)過(guò)程中采用親和標(biāo)簽融合表達(dá)有兩方面的作用：一方面是為了使蛋白純化過(guò)程變得更加容易；另一方面是為了促進(jìn)某些不溶性蛋白可溶6.蛋白表達(dá)系

常見問(wèn)題之HIS標(biāo)簽蛋白沒(méi)有被洗脫下來(lái)2021/11/24: 蛋白掛柱后洗脫不下來(lái)主要是因?yàn)榈鞍缀椭咏Y(jié)合能力太強(qiáng)或者洗脫條件太溫和，我們可以從以下幾方面考慮解決問(wèn)題。1、洗脫條件太溫和：重新摸索洗脫條件，增加緩沖液中咪唑濃度或者適當(dāng)降低緩沖液pH以確定最佳的洗脫條件或者更、換緩沖液的成分（換成tris-HCl緩沖液）。2、蛋白在柱子中沉淀：適當(dāng)降低上樣量或蛋白濃度，用咪唑線性洗脫。使用添加劑或者改變NaCl的濃度，或者在變性的條件下洗脫（加4-8M的尿素或者4-6M的鹽酸胍）。3、非特異性的疏水或者其他作用：在洗脫液中加非離子的添加劑（例如0.2%的Tr

慢病毒構(gòu)建原理2021/11/23: 慢病毒載體（Lentivirus）是一類改造自人免疫缺陷病毒（HIV）的病毒載體，是逆轉(zhuǎn)錄病毒的一種，基因組是RNA，其毒性基因已經(jīng)被剔除并被外源性目的基因所取代，屬于假型病毒。可利用逆轉(zhuǎn)錄酶將外源基因整合到基因組中實(shí)現(xiàn)穩(wěn)定表達(dá)，具有感染分裂期與非分裂期細(xì)胞的特性。◆慢病毒基因組進(jìn)入細(xì)胞后，在細(xì)胞漿中反轉(zhuǎn)錄為DNA，形成DNA整合前復(fù)合體，進(jìn)入細(xì)胞核后，DNA整合到細(xì)胞基因組中。整合后的DNA轉(zhuǎn)錄成mRNA，回到細(xì)胞漿中，表達(dá)目的蛋白；或產(chǎn)生小RNA。慢病毒介導(dǎo)的基因表達(dá)或小RNA干擾作用持續(xù)且

帶你學(xué)會(huì)一種藥物研究利器——等溫滴定量熱法2021/11/23: 等溫滴定量熱法(IsothermalTitrationCalorimetry,ITC)是近年來(lái)發(fā)展起來(lái)的一種研究生物熱力學(xué)與生物動(dòng)力學(xué)的重要方法，它通過(guò)高靈敏度、高自動(dòng)化的微量量熱儀連續(xù)、準(zhǔn)確地監(jiān)測(cè)和記錄一個(gè)變化過(guò)程的量熱曲線，原位、在線和無(wú)損傷地同時(shí)提供熱力學(xué)和動(dòng)力學(xué)信息。ITC檢測(cè)方式與化學(xué)反應(yīng)中的酸堿滴定法相似，在ITC測(cè)定中，首先將一種反應(yīng)物置于一個(gè)溫控樣品池中，并通過(guò)一個(gè)熱電偶回路與一個(gè)參比池相偶聯(lián)，樣品池和參比池處于相同的外部環(huán)境。特定的滴定劑（按實(shí)驗(yàn)需要選擇）定量滴加到樣品池中，當(dāng)

NK細(xì)胞是屬于什么細(xì)胞呢？2021/11/22: NK（自然殺傷細(xì)胞）通過(guò)整合識(shí)別MHCI分子的激活和抑制類受體的信號(hào)對(duì)靶點(diǎn)進(jìn)行識(shí)別，對(duì)靶細(xì)胞進(jìn)行直接殺傷，同時(shí)不損傷自身健康細(xì)胞。人體NK細(xì)胞占血液和其他部位中淋巴細(xì)胞的5%-20%，含量豐富，在抗病毒和抗腫瘤免疫中發(fā)揮關(guān)鍵作用。NK是控制急性和慢性病毒感染所必需的，同時(shí)NK能夠促進(jìn)多種腫瘤直接裂解，在不同部位巡邏防止轉(zhuǎn)移。NK細(xì)胞功能的多面性顯示出其在免疫介導(dǎo)的保護(hù)和內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)平衡中具有動(dòng)態(tài)作用。根據(jù)CD56和抗體結(jié)合Fc受體CD16的表達(dá)水平，人類NK可細(xì)分為成熟度和功能特性不同的兩個(gè)主要亞

為什么大多數(shù)細(xì)胞培養(yǎng)需要二氧化碳培養(yǎng)箱2021/11/19: 細(xì)胞培養(yǎng)基的pH一般在7.0-7.4之間。由于碳酸鹽pH緩沖體系是一種生理pH緩沖體系(是人體血液中最重要的pH緩沖體系)，大多數(shù)培養(yǎng)基都是用它來(lái)維持穩(wěn)定的pH值，用粉末配制培養(yǎng)液時(shí)，往往需要加入一定量的碳酸氫鈉。對(duì)于大多數(shù)以碳酸鹽作為pH緩沖體系的培養(yǎng)液，為了維持穩(wěn)定的pH，培養(yǎng)箱中的二氧化碳需要維持在2-10%之間，以維持培養(yǎng)液中溶解的二氧化碳濃度。同時(shí)，用于細(xì)胞培養(yǎng)的容器需要一定程度的通風(fēng)，以便于氣體的交換。使用其他pH緩沖系統(tǒng)是否不需要二氧化碳培養(yǎng)箱？已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，由于空氣中二氧化碳濃度低，

警惕！細(xì)胞系的交叉污染可能是毀掉你實(shí)驗(yàn)的元兇2021/11/18: 您是否有過(guò)這樣的經(jīng)歷……新買到的細(xì)胞或者實(shí)驗(yàn)室傳了幾代的細(xì)胞，又或者是儲(chǔ)存于超低溫冰箱幾年不用的細(xì)胞，需要用到時(shí)腦海里一直有著這樣的問(wèn)題困擾著你，被污染了么?鑒定正確么？用它做研究會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果么?據(jù)統(tǒng)計(jì)約30%細(xì)胞系被交叉污染或錯(cuò)誤辨識(shí)，只因使用了交叉污染或錯(cuò)誤辨識(shí)的細(xì)胞而導(dǎo)致研究結(jié)論錯(cuò)誤、結(jié)果不可重復(fù)、臨床細(xì)胞治療災(zāi)難性后果……，這將浪費(fèi)大量時(shí)間、精力和金錢。世人皆知，細(xì)胞身嬌體貴難養(yǎng)活，養(yǎng)好細(xì)胞實(shí)屬不易。而這其中最煩的是污染、最怕的是掉包。因?yàn)楸M管研究僧們有方法把一切污染的源頭扼殺在搖籃之

安諾倫代理Atlas Antibodies品牌產(chǎn)品——活動(dòng)好價(jià)熱銷中2021/11/16: AtlasAntibodies是提供人類蛋白圖譜(HPA)認(rèn)證抗體的供應(yīng)商。傳承HPA優(yōu)秀科研基因，擁有強(qiáng)大的供應(yīng)能力，提供針對(duì)所有人類蛋白質(zhì)的高品質(zhì)抗體。HPA項(xiàng)目于2003年由瑞典研究人員發(fā)起，運(yùn)用人類蛋白抗體和轉(zhuǎn)錄組學(xué)，對(duì)人體正常及癌變細(xì)胞組織樣本進(jìn)行免疫染色(IHC)，建立shi界上第一個(gè)以IHC染色結(jié)果為主的、可供開放訪問(wèn)的人類蛋白圖譜數(shù)據(jù)庫(kù)，以推動(dòng)人類在新型診斷、治療靶點(diǎn)和創(chuàng)新藥等領(lǐng)域的探索。該項(xiàng)目成立之初便在科學(xué)界引起強(qiáng)烈反響，無(wú)數(shù)科學(xué)家希望獲得這些抗體用于研究，AtlasAnti

噬菌體繁殖有哪些特點(diǎn)？2021/11/15: 1.毒性噬菌體指在宿主菌體內(nèi)復(fù)制增殖，產(chǎn)生許多子代噬菌體，并最終裂解細(xì)菌。毒性噬菌體的增殖方式是復(fù)制，其增殖過(guò)程經(jīng)歷吸附穿入、生物合成和成熟釋放3個(gè)階段。進(jìn)入菌細(xì)胞內(nèi)的噬菌體核酸首先經(jīng)早期轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生早期蛋白質(zhì)，并復(fù)制子代核酸，再進(jìn)行晚期轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生噬菌體的結(jié)構(gòu)蛋白。子代噬菌體達(dá)到一定數(shù)量時(shí)，由于噬菌體合成酶類的溶解，菌細(xì)胞突然裂解，釋放出的噬菌體再感染其他敏感細(xì)菌。2.溫和噬菌體感染宿主菌后并不增殖。其基因整合于細(xì)菌染色體上，即前噬菌體，隨細(xì)菌染色體的復(fù)制而復(fù)制，并隨細(xì)菌分裂而分配至子代細(xì)菌的染色體中

抗體開發(fā)技術(shù)優(yōu)勢(shì)2021/11/12: 艾柏森（北京）生物科技有限公司是美國(guó)一家以生命科學(xué)前沿領(lǐng)域研究與醫(yī)藥應(yīng)用、工業(yè)化生產(chǎn)一體化為主要業(yè)務(wù)方向的高新技術(shù)服務(wù)企業(yè)。目前，公司圍繞多位外籍科學(xué)家先后組建了分子細(xì)胞生物學(xué)研究技術(shù)團(tuán)隊(duì)、蛋白生產(chǎn)與抗體制備實(shí)驗(yàn)中心、模式動(dòng)物基因工程研究團(tuán)隊(duì)以及生物化學(xué)仿制藥研究技術(shù)團(tuán)隊(duì)等多個(gè)技術(shù)研發(fā)部門。以抗體藥物研發(fā)一條鏈解決方案為基礎(chǔ)，我們主要為客戶提供抗體制備、重組蛋白/抗體制備、蛋白晶體學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)、噬菌體庫(kù)構(gòu)建、噬菌體庫(kù)篩選，單克隆抗體藥物開發(fā)（抗體篩選、抗體藥效學(xué)、抗體測(cè)序、抗體分析、抗體人源化

艾柏森抗體親和力成熟技術(shù)2021/11/11: 目前，藥用抗體的研發(fā)主要基于雜交瘤細(xì)胞或者體外抗體庫(kù)。通過(guò)抗原設(shè)計(jì)和抗體篩選，人們初步獲得陽(yáng)性的hits，再進(jìn)一步通過(guò)一系列生物性質(zhì)檢測(cè)和功能驗(yàn)證，終得到有藥用潛力的抗體。在實(shí)際研發(fā)過(guò)程中，經(jīng)過(guò)了常規(guī)篩選所得的抗體，有諸多方面需要更細(xì)致的改進(jìn)，包括親和力、免疫原性、半衰期等等，抗體領(lǐng)域這些年來(lái)做了很多相關(guān)的研究和實(shí)踐。其中，抗體親和力成熟是研究的重要方向之一。理論上，抗體親和力的提高有助于改善抗體的特異性和效力，有助于減少用藥劑量，降低毒副作用等。雖然實(shí)際的研究證明親和力的提高與抗體效價(jià)的提高并

安諾倫代理Gerbu品牌產(chǎn)品——提供用于多抗與單抗生產(chǎn)的高性價(jià)比佐劑2021/11/10: GERBU公司在原材料采購(gòu)和制造領(lǐng)域有超過(guò)25年的豐富經(jīng)驗(yàn)。GERBU提供廣泛的精細(xì)化學(xué)品，生物試劑，緩沖液，洗滌劑，介質(zhì)等。例如ACES、AEBSF、白蛋白、氨芐青霉素、抗生物素蛋白、DTT、甘氨酸、HEPES、IPTG、煙酰胺衍生物等。GERBU完mei的生物相容性佐劑已經(jīng)越來(lái)越成為單克隆和多克隆抗體生產(chǎn)的標(biāo)準(zhǔn)。GERBU成立于1986年，建立生化生產(chǎn)，并與保加利亞（格爾布）和俄羅斯進(jìn)行貿(mào)易；它記錄了跨越兩代人的經(jīng)歷和接觸。它今天的重點(diǎn)是西部貿(mào)易：然而，良好的關(guān)系使得能夠在全球范圍內(nèi)建立大宗

CAR T細(xì)胞免疫療法是什么？2021/11/10: CAR-T英文全稱是ChimericAntigenReceptorT-Cell，中文叫嵌合抗原受體T細(xì)胞。CAR-T細(xì)胞免疫療法是醫(yī)學(xué)界新出現(xiàn)的治療腫瘤和癌癥的一種方法。它先從病人身上提取出免疫T細(xì)胞，然后利用基因工程技術(shù)，在體外寫入能讓T細(xì)胞識(shí)別特定腫瘤細(xì)胞并殺死腫瘤細(xì)胞的基因片段，這種CAR-T細(xì)胞在實(shí)驗(yàn)室中大量培養(yǎng)，之后再把擴(kuò)增后的這種"加強(qiáng)型"免疫T細(xì)胞回輸?shù)讲∪梭w內(nèi)進(jìn)行治療。CAR-T治療簡(jiǎn)單來(lái)說(shuō)分為下列步驟：1、采用血漿分離置換法提取收集患者體內(nèi)白細(xì)胞，該步驟提取血液細(xì)胞，并分離出一

生物實(shí)驗(yàn)的基本原理2021/11/09: 生物學(xué)實(shí)驗(yàn)都是些看不見，摸不著的東西，所以基本上都是使用這個(gè)方法，看不見的，我們拿看的見的去標(biāo)記它，測(cè)不著的或者不好測(cè)的，拿可以測(cè)容易測(cè)的去標(biāo)記它。很多的實(shí)驗(yàn)手段，其實(shí)最初都是很簡(jiǎn)單的，為了提高靈敏度和精度，不斷改進(jìn)，越來(lái)越煩瑣，抑或者出現(xiàn)了一些分支。通常這時(shí)候，最初那個(gè)簡(jiǎn)單的，最根本的東西就被人所忘記。看到的盡是表面上的細(xì)節(jié)。至少現(xiàn)在的書太二了，本來(lái)基本上一樣的實(shí)驗(yàn)，闡述原理的時(shí)候被描成了兩樣的東西。同位素標(biāo)記，熒光標(biāo)記自不用說(shuō)。芯片實(shí)驗(yàn)也是標(biāo)記，array上的spot序列是已知的，它會(huì)跟什么

干貨分享！比一比，分選細(xì)胞您需要多長(zhǎng)時(shí)間？2021/11/08: 細(xì)胞分選在多種研究領(lǐng)域都有涉及，例如腫瘤學(xué)，神經(jīng)生物學(xué)，免疫學(xué)等。上次和大家分享了磁珠分選，除了磁珠分選還有流式分選，今天小編在這里跟大家聊一下流式分選的原理、應(yīng)用及與磁珠分選的區(qū)別，希望能幫到大家一二。1流式細(xì)胞儀分選原理流式細(xì)胞儀分選細(xì)胞有兩種方法：一是“CatchTuber”即“捕獲管法”就是機(jī)械手臂以極快的速度出入樣品液流，在細(xì)胞通過(guò)激光照射并被確認(rèn)之后快速捕獲目標(biāo)細(xì)胞至收集系統(tǒng)中，此種方法常用于小型臺(tái)式機(jī)。另一種方法是電子偏轉(zhuǎn)的方式，即將熒光染色確認(rèn)的細(xì)胞標(biāo)記正或負(fù)電荷，通過(guò)電磁場(chǎng)偏轉(zhuǎn)

免疫組化：非特異性染色的八大原因2021/11/08: 免疫組化，免疫組織化學(xué)技術(shù)（immunohistochemistry），是一項(xiàng)利用抗原抗體反應(yīng)，通過(guò)使標(biāo)記抗體的顯色劑顯色來(lái)確定組織細(xì)胞內(nèi)抗原，對(duì)蛋白定位，定性的實(shí)驗(yàn)技術(shù)。非特異性染色的八大原因然而，結(jié)果卻未必都是那么如意的，常常出現(xiàn)下面這種狀況，好好的一張片子染得臟臟的，這就是最常見的非特異性染色。1.抗體問(wèn)題，真的是一分錢一分貨啊！一抗用多克隆抗體容易出現(xiàn)非特異性染色，建議用高純度，高效價(jià)的針對(duì)更具特異性抗原決定簇的單克隆抗體來(lái)解決。單克隆抗體很貴，不過(guò)結(jié)果真的很好。尤其是背景非特異性染色不

安諾倫重磅代理LB產(chǎn)品精品推薦！雙11折扣*超多福利~2021/11/05: 今天你領(lǐng)汪汪幣了嗎？今天你扔喵糖qiang紅包了嗎？今天你參與瓜分二十億、贏二十億了嗎？一年一度雙十一又又又來(lái)了全民雙十一，科研不缺席安諾倫生物一年一度雙十一*推薦驚喜來(lái)襲！折上滿減熱銷*好禮相贈(zèng)0元試用LB產(chǎn)品折上滿減LeadingBiology是一家不斷發(fā)展的生物技術(shù)公司，在全球范圍內(nèi)提供高純度蛋白，為研究社區(qū)提供細(xì)胞因子相關(guān)產(chǎn)品，用于癌癥、凋亡、發(fā)育、內(nèi)分泌學(xué)、免疫學(xué)、神經(jīng)科學(xué)、蛋白酶和干細(xì)胞研究。LeadingBiology的蛋白質(zhì)包括干擾素、白介素、骨形態(tài)發(fā)生蛋白、腫瘤壞死因子、瘦素、

細(xì)胞衰老檢測(cè)方法與步驟2021/11/05: 細(xì)胞衰老是細(xì)胞在正常環(huán)境條件下發(fā)生的功能減退、逐漸趨向死亡的現(xiàn)象。zhong所周知，衰老的細(xì)胞表現(xiàn)為細(xì)胞體積變大，呈扁平狀；細(xì)胞核變大，核膜內(nèi)陷，染色質(zhì)聚集、固縮、裂解；胞質(zhì)內(nèi)顆粒增加，有空泡形成；線粒體的數(shù)目及形狀發(fā)生改變；膜流動(dòng)性降低；溶酶體內(nèi)容物增多，導(dǎo)致溶酶體酶β-半乳糖苷酶活性升高。衰老細(xì)胞所具有的上述特征成為各種細(xì)胞衰老檢測(cè)手段的依據(jù)。其中，對(duì)衰老相關(guān)β-半乳糖苷酶的檢測(cè)是有效檢測(cè)細(xì)胞衰老的經(jīng)典方法。X-Gal（5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷）是β-半乳糖苷酶的底物，X-

安諾倫代理BioVendor品牌價(jià)格優(yōu)品質(zhì)有保障2021/11/04: BioVendor是歐洲的一家醫(yī)藥科技公司，專注于為分子和細(xì)胞學(xué)實(shí)驗(yàn)室提供體外研究產(chǎn)品，主要產(chǎn)品有重組蛋白、抗體和ELISA試劑盒。目前公司致力于有關(guān)激素和細(xì)胞活素利用方面的研究，產(chǎn)品相關(guān)方向：能量代謝和體重調(diào)節(jié)、骨代謝、心血管疾病和shen病、感染和發(fā)炎、鐵代謝研究、肌肉生長(zhǎng)控制、神經(jīng)組織損壞標(biāo)記、腫瘤學(xué)、胰腺調(diào)節(jié)分子、分泌型磷脂酶A2等。BioVendor–LaboratorníMedicínaa.s.(BioVendorLM)isa“mothercompany”ofthecorporate

兔子單克隆抗體制備2021/11/04: 單克隆抗體制備限于技術(shù)保護(hù)的原因，目前，兔單克隆雜交瘤細(xì)胞制備技術(shù)被一家公司壟斷，所以我們無(wú)法通過(guò)像類似制備小鼠單克隆抗體那樣，制備兔源雜交瘤細(xì)胞獲得兔源單克隆抗體。為此，公司在一大批免疫學(xué)與基因工程學(xué)專家的幫助下，先后建立了兩套兔源單克隆抗體制備方案。這兩種方案均不依賴于兔源骨髓瘤細(xì)胞，但是其抗體的種源特性毫無(wú)疑問(wèn)是兔源，在保留兔源單克隆抗體優(yōu)勢(shì)的同時(shí)，大大壓縮試驗(yàn)周期，提高試驗(yàn)成功率。方案一噬菌體展示技術(shù)M13單鏈絲狀噬菌體展示系統(tǒng)是目前應(yīng)用廣泛的文庫(kù)展示系統(tǒng)，通過(guò)將蛋白、抗體或多肽與噬菌體

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