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當(dāng)前位置：蘇州阿爾法生物實(shí)驗(yàn)器材有限公司>>技術(shù)文章

從微生物和細(xì)胞中中分離線粒體的基本步驟方法2023/06/09: 在人體內(nèi)，線粒體是我們身體的“能量中心”，它們可以將營養(yǎng)物質(zhì)轉(zhuǎn)化為ATP等可用能源。除了在人體內(nèi)外動(dòng)植物細(xì)胞中都能發(fā)現(xiàn)線粒體存在。通過從微生物和細(xì)胞中分離出線粒體，我們可以更好地了解其內(nèi)在機(jī)制和功能。在本文中，我們將介紹從微生物和細(xì)胞中分離線粒體的基本步驟方法。什么是線粒體自20世紀(jì)初被發(fā)現(xiàn)以來，線粒體一直被認(rèn)為是細(xì)胞內(nèi)部的主要能量儲(chǔ)備所在。線粒體是由兩個(gè)膜界限組成的可變形的類囊體結(jié)構(gòu)，在其內(nèi)側(cè)膜中包含酶群，參與三磷酸腺苷(ATP)的形成。線粒體可進(jìn)一步劃分為許多結(jié)構(gòu)不同的亞種，這些亞種通過形態(tài)

什么是細(xì)胞外基質(zhì)2023/06/06: 什么是細(xì)胞外基質(zhì)？細(xì)胞外基質(zhì)是一種位于細(xì)胞外的復(fù)雜結(jié)構(gòu)，由各種生物分子組成，包括蛋白質(zhì)、多糖類物質(zhì)和其他細(xì)胞外分子。細(xì)胞外基質(zhì)在維持組織結(jié)構(gòu)、提供支持和保護(hù)細(xì)胞方面發(fā)揮著重要的作用。這個(gè)復(fù)雜的基質(zhì)不僅填充著細(xì)胞之間的空間，還通過與細(xì)胞表面的受體相互作用，調(diào)節(jié)細(xì)胞的功能和行為。細(xì)胞外基質(zhì)在許多生物學(xué)過程中都起著重要的角色，如細(xì)胞遷移、細(xì)胞黏附、信號(hào)傳導(dǎo)和組織修復(fù)。在細(xì)胞外基質(zhì)中，蛋白質(zhì)是最為重要的組成部分之一。它們可以形成纖維蛋白網(wǎng)絡(luò)，提供支持和機(jī)械強(qiáng)度，使細(xì)胞能夠維持其結(jié)構(gòu)。此外，蛋白質(zhì)還可以通

生物反應(yīng)器培養(yǎng)生產(chǎn)人造肉的方法2023/06/02: 培養(yǎng)肉（CM）是指一種可持續(xù)替代品，通過生物反應(yīng)器培養(yǎng)細(xì)胞并將其結(jié)合到可食用微載體中，生產(chǎn)出與動(dòng)物源性肉類相似的素肉產(chǎn)品。為了減少對環(huán)境的影響、提高動(dòng)物福利并為不斷增長的人口提供蛋白質(zhì)來源，CM產(chǎn)品開發(fā)引發(fā)了廣泛的學(xué)術(shù)界和工業(yè)界興趣。然而，要使這一領(lǐng)域發(fā)揮其全部潛力，必須克服重大挑戰(zhàn)，主要是開發(fā)可擴(kuò)展的細(xì)胞擴(kuò)增和細(xì)胞到肉類加工的技術(shù)方法。可擴(kuò)展的細(xì)胞擴(kuò)增方法對于生成大量可用于進(jìn)一步加工成CM的細(xì)胞至關(guān)重要。長期以來，使用微載體進(jìn)行細(xì)胞附著和增殖，在可擴(kuò)展生物反應(yīng)器中有效擴(kuò)增貼壁依賴性細(xì)胞。這種培

生化培養(yǎng)箱和霉菌培養(yǎng)箱的區(qū)別2023/06/02: 在生物學(xué)研究領(lǐng)域，培養(yǎng)箱是非常重要的設(shè)備之一。不同種類的微生物需要不同種類的培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。這篇文章將會(huì)介紹生化培養(yǎng)箱和霉菌培養(yǎng)箱的區(qū)別。什么是生化培養(yǎng)箱？生化培養(yǎng)箱是一種常見的實(shí)驗(yàn)室設(shè)備，它主要用于在恒定的溫度、濕度和光照條件下培養(yǎng)細(xì)胞、組織和微生物。它通常由密封的箱體、溫度控制系統(tǒng)、濕度調(diào)節(jié)系統(tǒng)和光照裝置組成。生化培養(yǎng)箱廣泛應(yīng)用于細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)菌培養(yǎng)、酶反應(yīng)等實(shí)驗(yàn)中。其溫度范圍通常可以調(diào)節(jié)到較高的溫度，以滿足不同實(shí)驗(yàn)需求。這種設(shè)備有一個(gè)封閉的環(huán)境，可以控制溫度、濕度和二氧化碳濃度等參數(shù)，以提供

高速冷凍離心機(jī)使用方法2023/06/01: 高速冷凍離心機(jī)使用方法高速冷凍離心機(jī)是一種用于制備生物樣品的常見實(shí)驗(yàn)室儀器，它通過離心和低溫的作用將生物樣品快速凍結(jié)，以保護(hù)樣品的原始狀態(tài)和結(jié)構(gòu)，以及為后續(xù)實(shí)驗(yàn)提供優(yōu)質(zhì)的樣本。在正確的使用和操作下，高速冷凍離心機(jī)可以有效地提高生物實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性和可靠性。本文將詳細(xì)介紹高速冷凍離心機(jī)的操作及注意事項(xiàng)。一、高速冷凍離心機(jī)操作1、準(zhǔn)備樣品在使用高速冷凍離心機(jī)之前，樣品必須被正確準(zhǔn)備。使用者需要確保樣品已被正確標(biāo)記和存儲(chǔ)，并根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要選擇合適的樣品量和離心管。2、準(zhǔn)備離心機(jī)在準(zhǔn)備使用高速冷凍離心機(jī)之前，

低溫冷凍高速離心機(jī)和普通離心機(jī)的區(qū)別2023/05/30: 離心機(jī)是一種常見的實(shí)驗(yàn)室設(shè)備，用于分離混合物中的不同組分。它通過利用離心力將樣品離心分離成不同的層次，以實(shí)現(xiàn)分離的目的。冷凍離心機(jī)和普通離心機(jī)是兩種常見的離心機(jī)，下面說明一下冷凍離心機(jī)和普通離心機(jī)的區(qū)別以及高速冷凍離心機(jī)的用途。普通離心機(jī)是一種常規(guī)離心機(jī)，通常用于離心分離、沉淀、洗滌等常規(guī)實(shí)驗(yàn)操作。普通離心機(jī)的工作原理是通過高速旋轉(zhuǎn)離心機(jī)轉(zhuǎn)子，產(chǎn)生離心力，將樣品離心分離成不同的層次。普通離心機(jī)的離心力一般在1萬至2萬g之間。轉(zhuǎn)速范圍通常在1000至15000rpm之間。它們通常在室溫下工作，適用

細(xì)胞微絲骨架染色失敗的原因及解決辦法2023/05/24: 微絲骨架染色常見問題及解決方案微絲骨架是細(xì)胞的一種重要組成部分，其主要由微絲和微管兩部分組成。微絲是一種細(xì)胞內(nèi)直徑約為7納米的蛋白質(zhì)纖維，主要由肌動(dòng)蛋白組成，參與細(xì)胞的運(yùn)動(dòng)、收縮和細(xì)胞分裂等過程。微管則是一種細(xì)胞內(nèi)直徑約為25納米的管狀結(jié)構(gòu)，主要由α-和β-微管蛋白組成，參與細(xì)胞的分裂、纖毛和鞭毛的運(yùn)動(dòng)等過程。微絲骨架染色無法染上的原因可能有以下幾點(diǎn)：染色劑選擇不當(dāng)：不同的染色劑對微絲骨架的染色效果不同，如果使用的染色劑不適合微絲骨架的染色，則會(huì)導(dǎo)致染色失敗。例如，熒光素酰亞胺（FITC）和三硝

恒溫培養(yǎng)箱和生化培養(yǎng)箱區(qū)別2023/05/24: 恒溫培養(yǎng)箱和生化培養(yǎng)箱選購只拿恒溫培養(yǎng)箱、生化培養(yǎng)箱都是實(shí)驗(yàn)室中常用的兩種設(shè)備，那么生化培養(yǎng)箱和恒溫培養(yǎng)箱區(qū)別是什么，下面將對這些方面進(jìn)行詳細(xì)的介紹。一、功能區(qū)別恒溫培養(yǎng)箱主要用于生物實(shí)驗(yàn)室中的生物培養(yǎng)和繁殖。其主要功能是提供穩(wěn)定的溫度、濕度和氧氣濃度等環(huán)境條件，以促進(jìn)生物的生長和繁殖。恒溫培養(yǎng)箱具有溫度控制、濕度控制、氧氣控制等功能，可以根據(jù)不同的生物需求進(jìn)行調(diào)節(jié)。生化培養(yǎng)箱則主要用于生物學(xué)研究和實(shí)驗(yàn)室分析。其主要功能是提供嚴(yán)格的溫度、濕度和氣體控制，以保證實(shí)驗(yàn)的精確性和可重復(fù)性。生化培養(yǎng)箱還

瓊脂糖凝膠電泳實(shí)驗(yàn)步驟2023/05/19: (1)安裝電泳管選擇聚含均勻、無氣泡、無裂縫、膠面平整并與管壁沒有脫離現(xiàn)象的合格凝膠電泳管插入上電極槽底板的各圓孔中，留1/5在底板上方，保證使電泳管與底板垂直，密封處不致滲漏。(2)加樣可利用上述方法制成樣品膠，也可以用如下的一種方法加樣。將樣品溶于200mg/ml濃度的蔗糖溶液中，或溶在10%甘油中，然后加在濃縮膠的表面。或?qū)⑷刍沫傊c樣品溶液混合后加在濃縮膠表面。或用與電泳管內(nèi)徑相近的圓形厚濾紙片，將樣品溶液吸收后，緊貼在濃縮膠表面。如樣品是固體，應(yīng)先溶在濃縮膠緩沖液中，并加入足夠量lm

瓊脂糖凝膠電泳影響凝膠聚合的因素有哪些2023/05/19: 對于一般的分析工作，特別是定量分析工作來講，人們強(qiáng)調(diào)制備的凝膠要有很好的可重復(fù)性。如果制備得到的凝膠本身沒有重復(fù)性，比如孔徑前后兩次凝膠相差頗大，那么在這樣的條件下，所得到的分析結(jié)果，其可信性就有問題，往往會(huì)使幾次結(jié)果不能重復(fù)。所以，為了要獲得可靠的分析結(jié)果，在制膠時(shí)對能影響凝膠聚合的種種因素必須加以控制。有哪些主要因素，又怎樣來控制它們的條件，分別簡述如下：(1)制備凝膠用的主要試劑丙烯酰胺、甲叉雙丙烯酰胺至少是分析純級(jí)的試劑。存放時(shí)間一般不超過1年,如果存放時(shí)間過長，丙烯酰胺受潮水解，丙烯酸

原生質(zhì)體葉肉細(xì)胞瞬時(shí)表達(dá)實(shí)驗(yàn)步驟2023/05/18: 原生質(zhì)體葉肉細(xì)胞瞬時(shí)表達(dá)實(shí)驗(yàn)步驟1、生長培養(yǎng)好的試驗(yàn)材料（一般為生長20天左右的擬南芥幼苗葉片）2、在擬南芥開花前取樣（30片葉子左右即可）3、切取葉片為0.5-1mm的細(xì)條（如果材料能達(dá)到每克107個(gè)原生質(zhì)體，10-20片葉子需要5-10mL酶解液）4、迅速將切下的樣品轉(zhuǎn)到酶解液中，要求全浸沒。5、黑暗條件下抽真空30min。6、連續(xù)酶解，室溫下23℃黑暗中靜止酶解3h7、利用光學(xué)顯微鏡檢查原生質(zhì)體（30-50μm大小）8、在過濾前加入等量的W5溶液9、洗干凈濾網(wǎng)，并用W5潤濕，之后過濾10、

HEK293培養(yǎng)基選購指南2023/05/10: 嘿，小伙伴，HEK293細(xì)胞咋養(yǎng)啊？用啥培養(yǎng)基呀？哈哈，這個(gè)簡單，毋庸置疑地告訴你，DMEM和RPMI都行啊！HEK293細(xì)胞是廣泛應(yīng)用于科研領(lǐng)域的一種細(xì)胞模型，當(dāng)然要注意選用適合它們的培養(yǎng)基啦。妥妥地，你得選擇營養(yǎng)豐富、含有充足生長因子和營養(yǎng)成分的培養(yǎng)基啊。DMEM和RPMI這兩個(gè)培養(yǎng)基都含有足夠的碳水化合物、氨基酸和維生素，供給細(xì)胞所需的能量和材料，保證細(xì)胞生長和繁殖。這兩種培養(yǎng)基各有千秋啊！DMEM培養(yǎng)基一般用于腫瘤細(xì)胞和無血清培養(yǎng)；而RPMI培養(yǎng)基則多用在白血細(xì)胞培養(yǎng)和腫瘤細(xì)胞等黏附生長

MRC-5細(xì)胞培養(yǎng)基的選擇2023/05/10: MRC-5細(xì)胞是一種常用的人類胚肺細(xì)胞，是由1966年從一個(gè)正常的男性胎兒的肺部組織獲得，具有良好的細(xì)胞生長和增殖特性，可廣泛應(yīng)用于細(xì)胞培養(yǎng)、病毒研究和毒性測試等領(lǐng)域。在MRC-5細(xì)胞的培養(yǎng)中，使用的培養(yǎng)基非常關(guān)鍵，不同的培養(yǎng)基可會(huì)影響到細(xì)胞的生長和增殖特性。MRC-5細(xì)胞培養(yǎng)基必須包含合適的營養(yǎng)物質(zhì)，能量來源和生長因子以確保它們能夠健康地生長和增殖。MRC-5細(xì)胞的培養(yǎng)基主要包括基礎(chǔ)培養(yǎng)基、補(bǔ)充物以及抗生素。[1640培養(yǎng)基]其中常使用的基礎(chǔ)培養(yǎng)基是DMEM/F12（Dulbecco的修改Ea

HEK293細(xì)胞培養(yǎng)培養(yǎng)基配制方法2023/05/10: 為了確保HEK293細(xì)胞培養(yǎng)的穩(wěn)定性和成功性，在使用HEK293細(xì)胞培養(yǎng)基時(shí)，需要注意以下事項(xiàng)。培養(yǎng)液的配制HEK293細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)用兩種培養(yǎng)液：DMEM和PMI。在配制培養(yǎng)液時(shí)要嚴(yán)格按照說明書來操作，遵循一定的配方和流程。此外，建議在配制時(shí)使用熱處理的雙倍溶液，這樣能夠避免配制中出現(xiàn)pH值過高或低的問題。篩選培養(yǎng)基在HEK293細(xì)胞培養(yǎng)基的篩選過程中，還需要考慮不同穩(wěn)定性和適應(yīng)性的培養(yǎng)基，以便更好地滿足試驗(yàn)要求。例如，當(dāng)進(jìn)行大規(guī)模培養(yǎng)時(shí)，選擇ProCHO5培養(yǎng)基，可以提高細(xì)胞的適應(yīng)性和生長率。培

培養(yǎng)基種類和細(xì)胞培養(yǎng)基選擇2023/05/04: 1、RPMI-1640MediumRPMI-1640廣泛應(yīng)用于哺乳動(dòng)物、特殊造血細(xì)胞、正常或惡性增生的白細(xì)胞，雜交瘤細(xì)胞的培養(yǎng)，是目前應(yīng)用十分廣泛的培養(yǎng)基。主要用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)。其它像K-562、HL-60、Jurkat、Daudi、IM-9等成淋巴細(xì)胞、T細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞以及HCT-15上皮細(xì)胞等均可參考使用。2、MinimumEssentialMedium（MEM）也稱非必需培養(yǎng)基，它僅含有12種必需氨基酸、谷氨酰胺和8種維生素。成分簡單，可廣泛適應(yīng)各種已建成細(xì)胞系和不同地方的哺乳動(dòng)物細(xì)胞類型

細(xì)胞培養(yǎng)轉(zhuǎn)瓶和細(xì)胞工廠有哪些不同2023/04/27: 近幾十年以來，隨著生命科技的快速發(fā)展，通過從動(dòng)物組織中提取細(xì)胞在體外大規(guī)模培養(yǎng)用以表達(dá)單克隆抗體、新藥開發(fā)等已成為普遍的技術(shù)。細(xì)胞的規(guī)模化擴(kuò)培成為新的細(xì)胞培養(yǎng)需求，目前細(xì)胞擴(kuò)增手段主要有：轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)、細(xì)胞工廠和生物反應(yīng)器擴(kuò)培三種方式。轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)所面臨的挑戰(zhàn)：轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)雖然投資少、結(jié)構(gòu)簡單、技術(shù)成熟、擴(kuò)增只需加轉(zhuǎn)瓶數(shù)量等優(yōu)點(diǎn)，但是占地空間大、勞動(dòng)強(qiáng)度大、產(chǎn)率低、細(xì)胞生長密度低、瓶間差異較難控制等，難以產(chǎn)業(yè)化或規(guī)模化生產(chǎn)。生物反應(yīng)器培養(yǎng)雖然可以大大提高細(xì)胞產(chǎn)率但是剪切力會(huì)降低細(xì)胞的活率，并且微載體與細(xì)胞分

基因定點(diǎn)突變技術(shù)2023/04/27: 體外定點(diǎn)突變技術(shù)是當(dāng)前生物學(xué)各領(lǐng)域研究中的一種重要實(shí)驗(yàn)手段，是改造、優(yōu)化基因的便捷方案，是探索啟動(dòng)子調(diào)節(jié)位點(diǎn)的有效手段，也是研究蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和功能之間的復(fù)雜關(guān)系的有力工具。蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)決定其功能，二者之間的關(guān)系是蛋白質(zhì)組研究的重點(diǎn)之一。對某個(gè)已知基因的特定堿基進(jìn)行定點(diǎn)改變、缺失或者插入，可以改變對應(yīng)的氨基酸序列和蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)，對突變基因的表達(dá)產(chǎn)物進(jìn)行研究有助于人類了解蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和功能的關(guān)系，探討蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)/結(jié)構(gòu)域。CRISPR-Cas9系統(tǒng)的靶向雙鏈斷裂（DSB），基因組通常通過非同源端連接（NH

藥廠的清潔和消毒措施2023/04/27: 對于制藥企業(yè)而言，當(dāng)某一產(chǎn)品生產(chǎn)完畢后，總會(huì)有一些微生物和少許原輔料殘留于設(shè)備中，在溫度和濕度達(dá)到一定程度時(shí)，微生物能夠與原輔料中殘留有機(jī)物出現(xiàn)無法物化反應(yīng)，通過大量繁殖能夠形成不同類型代謝物，這些代謝物會(huì)從一定程度上影響藥物藥效甚至?xí)a(chǎn)生毒副作用，從而使制藥企業(yè)每當(dāng)生產(chǎn)一段時(shí)間或者更換產(chǎn)品后會(huì)存在產(chǎn)品質(zhì)量問題，因此無論維修設(shè)備或設(shè)備空閑一段時(shí)間，需要實(shí)現(xiàn)設(shè)備清潔工作。對于制藥企業(yè)來說，清潔主要針對設(shè)備中殘留的微生物或者各種代謝物，其總量在不影響藥品規(guī)定的質(zhì)量、藥效及安全性。清潔管理的重要性我國

CRISPR/Cas9 基因編輯和NGS驗(yàn)證2023/04/26: CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)需要通過下一代測序(NGS)來驗(yàn)證，能夠在核苷酸水平分辨率下進(jìn)行大規(guī)模評(píng)估基因編輯的準(zhǔn)確性和可靠性。高效、可自動(dòng)化和可擴(kuò)展的CIRCLE-seq是一種體外NGS測定，可以對CRISPR介導(dǎo)的切割進(jìn)行靈敏的脫靶檢測。CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)CRISPR代表成簇規(guī)律間隔的短回文重復(fù)序列。這些重復(fù)的DNA片段最初來源于病毒病原體，并作為模板將CRISPR相關(guān)蛋白9(Cas9)核酸內(nèi)切酶引導(dǎo)至新入侵的病毒。當(dāng)Cas9遇到同源病毒序列時(shí)，它會(huì)產(chǎn)生近端雙鏈斷裂(D

科研實(shí)驗(yàn)常用人肝癌細(xì)胞株的區(qū)別2023/04/25: 肝細(xì)胞癌（hepatocellularcarcinoma，HCC）是近年來發(fā)病率急劇上升的惡性腫瘤之一。肝癌細(xì)胞系廣泛應(yīng)用于各類肝癌的研究。肝癌細(xì)胞系的基因組與健康人細(xì)胞系的基因組不同。常見的人肝癌細(xì)胞系有PLC、Huh7、Huh7.5、Hep3B、HepG2、SMMC-7721、MHCC97-H、MHCC9-L等，每一種細(xì)胞系都有自己的特點(diǎn)，但是，SMMC-7721,、MHCC9-L已經(jīng)退出實(shí)驗(yàn)舞臺(tái)，由于它們具有與原代肝癌細(xì)胞相似的生物學(xué)特性，無生物學(xué)改變、特性穩(wěn)定、無限制傳代，為肝癌研究提供

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